ICS_11.200 36 YY 中华人民共和国医药行业标准 YY/T 1404—2016 含铜宫内节育器用铜的技术 要求与试验方法 Requirements and tests for copper used for IUD 2016-03-23发布 2017-01-01实施 国家食品药品监督管理总局 发布 YY/T1404—2016 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任 本标准由国家计划生育器械标准化技术委员会（SAC/TC169）提出并归口。 本标准起草单位：上海交通大学医学院附属第九人民医院、上海市医疗器械检测所。 本标准主要起草人：孙皎、姚天平、丁婷婷、陆华、邹凤平。 YY/T1404—2016 含铜宫内节育器用铜的技术 要求与试验方法 范围 本标准规定了含铜宫内节育器用铜的化学成分、要求和试验方法。 本标准适用于含铜宫内节育器使用的铜管和铜丝原材料。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T5121.27一2008铜及铜合金化学分析方法第27部分：电感耦合等离子体原子发射光 谱法 GB/T16886.12 医疗器械生物学评价 第12部分：样品制备与参照样品（GB/T16886.12- 2005,ISO10993-12:2002,IDT) 3 化学成分 按照第5章规定的方法进行试验，铜的最小含量99.99%。其中单项杂质金属含量不大于表1的 规定。 表 1 杂质金属含量 单位为微克每克 单项金属 最大限量 单项金属 最大限量 铅(Pb) 5 确(Te) 3 锯(Cd) 1 锑(Sb) 4 铁(Fe) 10 砷(As) 5 镍(Ni) 10 磷(P) 铋(Bi) 2 银(Ag) 25 锡(Sn) 2 4要求 4.1 铜的纯度 4.1.1 铜原材料中铜含量应符合第3章的规定。 4.1.2 铜原材料杂质金属含量应符合表1的规定。 4.2表面质量 4.2.1 铜原材料表面应洁净，无污泥、油污等污染物。 I YY/T 1404—2016 4.2.2 铜原材料表面应光滑，不应有裂纹、起皮、毛刺、粗拉道现象。 4.3 铜丝直径 如果使用铜丝，铜丝的标称直径一般应不小于0.25mm。当铜丝被包裹于金属或塑料内，则铜丝的 标称直径由制造商规定。 4.4 铜离子释放 制造商应给出铜原材料在体外模拟宫腔液浸泡后的铜离子释放量。 4.5 细胞毒性评价 制造商应给出铜原材料浸提液的细胞活力大于70%时的稀释倍数。 5试验方法 5.1铜的纯度 化学成分应在原材料上取样，按GB/T5121.27一2008的方法或用已认可的用于化学分析的方法 进行试验，应符合4.1.1和4.1.2的要求。 5.2 表面质量 用目力观察并用手拭摸，应符合4.2.1、4.2.2的要求。 5.3 铜丝直径 用通用或专用量具进行测量，应符合4.3的要求。 5.4 铜离子释放 按附录A的方法进行试验，应符合4.4的要求。 5.5 细胞毒性评价 按附录B的方法进行试验，应不大于4.5要求的稀释倍数。 2 YY/T1404—2016 附录A （规范性附录） 铜离子释放试验方法 A.1目的 测定含铜宫内节育器用的铜原材料在模拟宫腔液下的铜离子释放量。 A.2设备 恒温箱（温度波动不大于土0.5C）、电冰箱、离心机、电感耦合等离子体原子发射光谱仪（ICP）、原 子吸收光谱仪（AAS）、超净工作台。 A.3试剂 氯化钠（AR）、氯化钾（AR）、氟化钙（AR）、碳酸氢钠（AR）、葡萄糖（AR）和二水合磷酸二氢钠 （AR）、浓盐酸（37%，AR）、浓硝酸（65%，GR)氢氧化钠（AR）。 A.4 模拟宫腔液制备 用去离子水分别溶解4.97g氯化钠、0.224g氟化钾、0.167g氯化钙、0.25g碳酸氢钠、0.50g葡萄 糖和0.072g二水合磷酸二氢钠，置于1000mL的容量瓶中，再用去离子水稀释至约980mL左右，并 用1.0mol/L的HCl稀溶液或1.0mol/L的NaOH稀溶液将pH调至7.0士0.1，最后用去离子水定容。 A.5 浸泡液制备 在无菌条件下，分别将含铜宫内节育器用的铜（铜管或铜丝）放人模拟宫腔液中，其浸泡比例参照 GB/T16886.12.当铜原材料样品的厚度小于0.5mm，按铜原材料表面积与浸提介质之比为6cm²/mL 的要求，经100倍稀释后置于37.0士0.5℃恒温箱中浸泡。1周内每天换液，第2周至第4周每周更换 2次液（换液时间分别为第10天、14天、17天、21天、24天和28天），之后每周换一次液（分别为 第35天、第42天、第49天和第56天）。收集所有更换下来的液体，1500r/min离心5min。然后取上 清液于0～4℃冰箱内冷藏，同时设置单独的模拟宫腔液为空白对照。 注：若铜原材料样品的厚度大于0.5mm，则铜原材料与漫提介质之比参照GB/T16886.12表1的规定。 A.6 铜离子浓度测定 采用ICP法或AAS法测定1周内每天以及第10天、第14天、第17天、第21天、第24天、 第28天、第35天、第42天、第49天和第56天更换下来的液体以及空白的模拟宫腔液中的铜离子 浓度。 3 YY/T1404—2016 A.7结果分析 根据测得的铜离子浓度，计算在10mL体积时的铜离子释放量，绘制从第1～7天每日铜离子释放 量曲线，以及第8~10天、第11~14天、第15~17天、第18~21天、第22～24天、第25~28天、第29~ 35天、第36～42天、第43～49天和第50～56天时日均铜离子释放曲线。记录1周内单天铜离子最大 A.8报告内容 试验报告应至少包括下列各项内容： a) 样品的识别（样品量、样品批号）； b) 样品到达实验室的日期（如果适用）； c) 第1～7天每日铜离子释放量，以及第8～10天、第11～14天、第1517天、第18～21天、 第22~24天、第25～28天、第29~35天、第36~42天、第43～49天和第50～56天时日均铜 离子释放曲线。（其中轴为天数，y轴为铜离子日/日均释放量）； d) 1周内单天铜离子最大释放量、1周内单天铜离子最小释放量； e）第29～56天的铜离子日平均释放量。 4 YY/T1404—2016 附录B （规范性附录） MTT细胞毒性试验方法 B.1目的 测定含铜宫内节育器用的铜原材料的细胞毒性。 B.2设备 超净工作台、二氧化碳（CO，）培养箱、生物安全柜、酶标仪（配置570nm滤光片，参照650nm）；移 液器。 B.3试剂 B.4溶液制备 B.4.1培养基 用基本培养基MEM配制含10%BCS、4.0mM谷氨酰胺、100IU/mL青霉素、100μg/mL链霉素 的完全培养基，在4℃保持，并且贮存不超过两周。 B.4.2MTT溶液 MTT新鲜溶于不含酚红的MEM中，浓度为1.0mg/mL。溶液采用注射过滤器（孔径≤0.22μm） 经无菌过滤法除菌。溶液宜当天使用。 B.4.3样品漫提液 参照GB/T16886.12，选择含10%BCS的最低限量基本培养基为浸提介质。当铜原材料样品的厚 度小于0.5mm，则按铜原材料与浸提介质之比为6cm/mL，在含5%（体积分数）CO2、37.0℃C士2℃温 度下浸提24h，24h后对标准浸提液进行梯度稀释，进行MTT试验。 注：若铜原材料样品的厚度大于0.5mm，则铜原材料与浸提介质之比参照GB/T16886.12表1的规定。 B.5 5细胞系 采用L929细胞，细胞培养物应无支原体。 B.6 6阴性材料和阳性材料选择 按GB/T16886.12的要求选择阴性和阳性对照材料。 5