ICS 11.100 C 44 YY 中华人民共和国医药行业标准 YY/T1190—2010 乳糖胆盐发酵培养基 Lactose bile salt fermentation medium 2010-12-27发布 2012-06-01实施 303 国家食品药品监督管理局 发布 数码防伪 YY/T1190—2010 前 言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由全国医用临床检验实验室和体外诊断系统标准化技术委员会（SAC/TC136)归口。 本标准由中国药品生物制品检定所负责起草 本标准主要起草人：刘艳、孙彬裕、康国华、曲守方、高尚先。 YY/T1190—2010 乳糖胆盐发酵培养基 1范围 本标准规定了乳糖胆盐发酵培养基的质量要求、检验方法、使用说明、标志、标签以及包装、运输、 贮存。 本标准适用于大肠杆菌乳糖发酵试验的乳糖胆盐发酵培养基。 2 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T191包装储运图示标志 JF1070一2000定量包装商品净含量计量检验规则 中华人民共和国药典 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3. 1 培养基 culturemedium 由人工方法配合而成的，专供微生物培养、分离、鉴别、研究和保存使用的混合营养物制品。 3. 2 质控菌株qualitycontrolstrain 通常指用于培养基质量控制和性能测定的微生物 3.3 菌落形成单位 colonyformingunit,CFU 在活菌培养计数时，由单个菌体或聚集成团的多个菌体在固体培养基上生长繁殖所形成的集落，以 其表达活菌的数量。 培养基配方 单位：g/L 蛋白陈 20.0 乳糖 10.0 猪胆盐(或牛胆盐、羊胆盐) 5. 0 溴甲酚紫 0. 01 1 YY/T1190—2010 5质量要求 5.1 理化要求 5.1.1外观 应为均一的浅黄色到灰白色。 5.1.2 装量 应不低于标示量。 5.1.3pH值 灭菌后，20℃～25 养基pH值应为7.4土0.1。 5.1.4水分 应不超过6.0% 5.2 微生物生长试 ；接种10CFU~100CFU鼠伤寒 CFU大肠埃希菌，生长良好，培养基变为黄色； 接种10CFU 养基颜色不变；接种10CFU~100CFU金黄色葡萄球菌，生长受抑制。 沙门氏菌，生长良 6 检验方法 P 6.1理化检验 DS 6.1.1 外观 采用目测法，在 6.1.2装量 按JF1070—2000， 6.1.3pH值 S 按使用说明配制培养基，灭菌后，在20℃～25℃时，按《中华人民共和国药典》pH值测定法或其他 标准方法测定，应符合5.1.3的规定 6.1.4水分 取适量培养基，用水分测定仪进行测定，应符合5.1.4的规定。 6.2生长试验 按附录A试验方法进行，接种各质控菌株，生长情况应符合5.2的规定。 使用说明书 使用说明至少应当具有下列内容： 2 YY/T1190—2010 a) 产品名称、规格； b) 配方； c) 用途； d) 使用方法； 注意事项； e) f) 贮存条件与失效期； g) 生产单位名称、联系方式。 标志与标签 标志与标签至少应当具有下列内容： a) 执行标准号； b) 产品注册证 产品名称、 c) 格数量、批号 现 制造厂名称、商标和厂址 d) e) 贮存条件 和失效期。 9 SS 9.1 包装 包装储运 标志应符合GB/T191的规定。包装容器应保证密封性良好，不易破碎。 P 9.2运输 培养基在运 防止内外包装破 9.3贮存 产品应置阴凉 存 YY/T1190—2010 附录A （规范性附录） 乳糖胆盐发酵培养基微生物生长试验方法 A.1质控菌株 大肠埃希菌（Escherichiacoli)（ATCC25922)或[CMCC(B)44113] 鼠伤寒沙门氏菌（Salmonellatyphimurium）（ATCC14028) 金黄色葡萄球菌（Staphylococcusaureus）（ATCC25923） 培养基生长试验可采用上述菌株或其他等同的标准菌株。所用的菌株传代次数不得超过5代（从 菌种保存中心获得的冷冻干燥菌种为第0代），并采用适宜的菌种保藏技术，以保证试验菌株的生物学 特性。 在同一生物安全区内只能同时操作1个菌株。 A.2方法 A.2.1无菌操作要求 培养基生长试验应严格遵守无菌操作，防止微生物污染。 稀释液、培养基、实验器具等灭菌时，应按照《中华人民共和国药典》中灭菌法的要求，采用验证合格 的灭菌程序灭菌。 A.2.2菌种复苏 分别启开大肠埃希菌、鼠伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌菌种，用0.9%生理盐水制成菌悬液，并分 别接种至适量营养肉汤培养基，36℃士1℃培养18h～24h。 A.2.3菌种传代 分别取适量上述复苏后的培养物，接种至营养琼脂培养基斜面或平皿，36℃士1℃培养18h～ 24 h。 A.2.4菌种增菌培养 分别接种上述传代后的新鲜培养物至营养琼脂培养基中，36℃土1℃培养18h24h。 A.2.5菌悬液制备 将上述增菌培养后的大肠埃希菌、鼠伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌的新鲜培养物分别用0.9%无 菌氯化钠溶液稀释，经比浊后，稀释制成每1mL含菌数约相当于10CFU～100CFU的菌悬液。 A.2.6待检培养基的制备和接种 用蒸馏水或去离子水按说明书的浓度配制待检乳糖胆盐发酵培养基，分装于试管中，9mL/管， 121℃灭菌15min，冷至室温后进行以下检测。 检测时，每管加入1mL上述菌悬液。每种质控菌株接种2管，并用1个未接种的试管做空白对 照，36℃士1℃培养18h～24h，观察菌落生长情况，并记录结果。结果应符合5.2的要求。 4 YY/T1190—2010 参考文献 [1] GB/T9969—2008 工业产品使用说明书 总则 [2] 陈天寿.微生物培养基的制造与应用.北京：中国农业出版社.1995 [3] 李影林.中华医学检验全书（上、下卷）.北京：人民卫生出版社.1996 5