ICS 11.100 YY C 44 中华人民共和国医药行业标准 YY/T1185—2010 脑心浸液培养基 Brain heart infusion broth medium 2010-12-27发布 2012-06-01实施 国家食品药品监督管理局 发布 YY/T1185—2010 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准是在参考《中华人民共和国药典》、GB/T4789.28--2003《食品卫生微生物学检验染色法、 培养基和试剂》、WS/T232一2002《商业性微生物培养基质量检验规程》及美国国家临床实验室标准委 员会（NCCLS)标准的基础上，结合中国国情及实际情况和要求而制定 本标准由全国医用临床检验实验室和体外诊断系统标准化技术委员会（SAC/TC136)归口。 本标准由中国药品生物制品检定所负责起草。 本标准主要起草人：孙彬裕、刘艳、康国华、曲守方、高尚先。 H YY/T1185-—2010 脑心浸液培养基 1范围 本标准规定了脑心浸液培养基的质量要求、检验方法、使用说明、标志、标签以及包装、运输、贮存。 本标准适用于脑心浸液培养基。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T191包装储运图示标志 中华人民共和国药典 JJF1070—2000 定量包装商品净含量计量检验规则 美国微生物临床手册 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3. 1 培养基 cuituremedium 由人工方法配合而成的，专供微生物培养、分离、鉴别、研究和保存使用的混合营养物制品。 3. 2 质控菌株qualitycontrolstrain 通常指用于培养基质量控制和性能测定的微生物。 3. 3 菌落形成单位colonyformingunit，CFU 在活菌培养计数时，由单个菌体或聚集成团的多个菌体在固体培养基上生长繁殖所形成的集落，以 其表达活菌的数量。 4 培养基配方 单位：g/L 牛脑浸出粉 7. 7 牛心浸出粉 9.8 蛋白陈 10.0 葡萄糖 2. 0 氯化钠 5. 0 磷酸氢二钠 2. 5 YY/T1185—2010 5质量要求 5.1理化要求 5.1.1外观 应为均一的浅棕褐色粉末。 5.1.2装量 应不低于标示量。 5.1.3 3pH值 灭菌后，20℃～25℃时，该培养基pH值应为7.4士0.2。 5.1.4水分 应不超过6.0%。 5. 2 微生物生长试验 培养基接种质控菌应生长良好。 检验方法 6.1理化检验 6.1.1外观 采用目测法，在自然光线明亮处目视，应符合5.1.1的规定。 6.1.2装最 按JJF1070一2000，使用通用量具，测定装量，应符合5.1.2的规定。 6.1.3 PH值 按使用说明配制培养基，灭菌后，按《中华人民共和国药典》pH值测定法或适宜的pH计测定方法 测定，pH值应符合5.1.3的规定。 6.1.4水分 取适量培养基，用水分测定仪进行测定，应符合5.1.4的规定。 6.2 2微生物生长试验 按附录A试验方法进行，结果应符合5.2的规定。 7 使用说明书 使用说明至少应当具有下列内容： a）产品名称、规格； b）配方； 2 YY/T1185—2010 (3 用途； (p 使用方法； e) 注意事项； f) 贮存条件与失效期； g) 生产单位名称、联系方式。 8 标志与标签 标志与标签至少应当具有下列内容： a) 执行标准号； b）产品注册证号； c) 产品名称、规格、数量、批号； (P 制造厂名称、商标和厂址； e) 贮存条件和失效期。 9包装、运输、贮存 9.1包装 包装储运图示标志应符合GB/T191的规定。包装容器应保证密封性良好，不易破碎。 9.2运输 培养基在运输过程中，应防潮，应防止重物堆压，避免阳光直射和雨雪浸淋，防止与酸碱物质接触， 防止内外包装破损。 9.3贮存 产品应置阴凉于燥处贮存。 YY/T1185-2010 附录A （规范性附录） 脑心浸液培养基微生物生长试验方法 A.1质控菌株 脑膜炎奈瑟氏菌（Neisseriameningitidis）（ATCC13090） 肺炎链球菌（Streptococcuspneumonia）（ATCC6305） 化脓链球菌（Streptococcuspyogenes）（ATCC19615） 培养基生长试验可采用上述菌株或其他等同的标准菌株。培养基药敏试验所用的菌株传代次数不 得超过5代（从菌种保存中心获得的冷冻干燥菌种为第0代），并采用适宜的菌种保藏技术，以保证试验 菌株的生物学特性。 在同一生物安全区内只能同时操作1个菌株。 A.2方法 A.2.1无菌操作要求 微生物生长试验应严格遵守无菌操作，防止微生物污染。 稀释液、培养基、实验器具等灭菌时，应按照《中华人民共和国药典》灭菌法的要求，采用验证合格的 灭菌程序灭菌。 A.2.2菌种复苏 启开质控菌种，用0.9%无菌氟化钠溶液0.3mL制成菌悬液，加至血琼脂斜面培养基中，置 36℃±1℃培养18h~20h， A.2.3菌种传代 刮取上述复苏后的质控菌种的新鲜培养物，加至血琼脂斜面培养基中，36℃士1℃培养24h。 A.2.4菌种增菌培养 刮取上述传代后的质控菌种的新鲜培养物，加至血琼脂斜面培养基中，36℃士1℃培养18h24h。 A.2.5菌悬液制备 将上述增菌培养后的质控菌种的新鲜培养物用0.9%无菌氯化钠溶液制成均匀菌液，经比浊后制 成每1mL含菌数约相当于100CFU～1000CFU的菌悬液，作为工作菌液。 A.2.6培养基制备 将待检脑心浸液培养基，用蒸馏水或去离子水按照说明上标出的浓度配制成溶液，分装于试管中， 9mL/管，121℃灭菌15min，冷却至室温后进行以下检测。 4 YY/T1185—2010 A. 2.7 培养基接种 检测时，除空白对照管外，每管接种1mL工作菌液，置36℃士1℃培养18h～24h(如果必要可培 养至72h)。 A.2.8 观察记录结果 观察并记录各管中微生物生长情况。 5