ICS 11.100 C 44 YY 中华人民共和国医药行业标准 YY/T1184—2010 流式细胞仪用单克隆抗体试剂 Monoclonal antibody reagent for flow cytometer 2010-12-27发布 2012-06-01实施 国家食品药品监督管理局 发布 YY/T1184—2010 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准是评价流式细胞仪用单克隆抗体试剂产品质量的依据。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由全国医用临床检验实验室和体外诊断系统标准化技术委员会（SAC/TC136)提出。 本标准由全国医用临床检验实验室和体外诊断系统标准化技术委员会（SAC/TC136)归口。 本标准起草单位：北京市医疗器械检验所、贝克曼库尔特商贸（中国）有限公司、碧迪医疗器械（上 海）有限公司。 本标准主要起草人：毕春雷、薛向军、吴煦、杜海鸥、杨宗兵、贺学英。 YY/T1184—2010 流式细胞仪用单克隆抗体试剂 1范围 本标准规定了流式细胞仪用单克隆抗体试剂质量检验的通用技术要求。包括术语和定义、分类和 命名、要求、试验方法、标签和使用说明、包装、运输和贮存。 本标准适用于医学实验室使用流式细胞仪对临床标本进行淋巴细胞表型分析、白血病/淋巴瘤分型 或其他疾病的诊断和监测等所使用的流式细胞仪用单克隆抗体试剂（以下简称试剂），为直接免疫标记 的荧光抗体（又称直标抗体），可用于细胞膜抗原及胞浆内抗原检测 试剂可以是一种荧光素标记的直标抗体，也可以是两种或两种以上直标抗体的混合物。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T191包装储运图示标志 YY/T0466.1一2009医疗器械用于医疗器械标签、标记和提供信息的符号 号第1部分：通用 要求 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 抗体antibody 由免疫原性物质刺激B-淋巴细胞产生，并能与其结合的特异性免疫球蛋白。 注：免疫原性物质的分子包含一种或多种带有独特化学成分的部分，即表位。 ［YY/T0639—2008，定义3.9] 3. 1. 1 多克隆抗体 polyclonalantibody 能够与某类免疫原性物质发生特异性反应的抗体混合物。 [YY/T0639—2008,定义3.9.1] 3. 1. 2 单克隆抗体 monoclonal antibody 能够与某种免疫原性物质的单一表位发生特异性反应的抗体。 [YY/T0639—2008，定义3.9.2] 3.2 阳性细胞 positivecell 表达与试剂反应的特异性抗原的细胞。 3.3 阴性细胞 negative cell 不表达与试剂反应的特异性抗原的细胞。 1 YY/T1184—2010 3. 4 荧光染料fluorochrome 由短波长激发光激发，释放出可见光的试剂。 [YY/T0639—2008，定义3.8] 3. 5 荧光淬灭 fluorescent quenching 荧光猝灭是指荧光素与其他分子（如溶剂和溶质）或粒子（如激光）相互作用引起荧光强度降低的 现象。 3. 6 染色稳定性stainingstability 样本染色完成后，在规定条件下保存，检测结果的一致性。 3. 7 稀释线性 linearity OF 4要求 4.1外观 S 外观应符合如 a） 外观应整文字符号标识清晰 4.2 净含量 S ARI 4.3准确度 采用如下方法之 a) b) 性差异； 取阳性细胞和阴性细胞按照一定比例进行混合，检测结果应在预期值土10%范围。 c) 4.4稀释线性 每个稀释度的重复测试值中位数应位于所有稀释度测试值中位数的绝对值3%或者相对值10%范 围内。 批内精密度 4.5 试剂对同一样本重复检测（n=10），检测结果应符合： 阳性百分比大于等于30%时，CV值应不大于8%；或 b) 阳性百分比小于30%时，CV值应不大于15%；或 c) 平均荧光强度CV值应不大于10%（以荧光强度报告结果时）。 2 YY/T1184—2010 4.6批间精密度 三个批号的试剂对同一样本的检测结果应符合： a) 阳性百分比大于等于30%时，CV值应不大于8%；或 b) 阳性百分比小于30%时，CV值应不大于15%；或 c) 平均荧光强度CV值应不大于10%（以荧光强度报告结果时）。 4.7 染色稳定性 使用试剂对样本进行染色后，在生产企业规定的时间，重复检测，前后两次检测结果的差异相对于 前一次检测的结果变化应符合 a) 阳性百分比大于等 于30%时，相对偏差值应不大于10%； b) 阳性百分比10 c) d) 平均荧光强度相对偏差值应不大于10%（以荧光强度报告结果时)。 4.8稳定性 取到效期后 剂，检测其准确度、批内精密度，应符合4.3、4.5的要求。 S 5试验方法 S 5.1 说明进行正确的校准和操作。 RDS 5.2 外观 目测检查，应 1要求 5.3 净含量 2要求。 S 5.4准确度 可选用以下方法进行验证： a） 取已知靶值的细胞，使用试剂进行标记，制备好的样本在流式细胞仪上进行检测，重复3次，每 次检测结果都应符合4.3a)的要求； b) 取40个未知样本，分别使用待测试剂和对照试剂进行标记，制备好的样本在流式细胞仪上进 行检测。对两种试剂的检测结果做配对样本t检验，结果应符合4.3b)的要求； 取阳性细胞和阴性细胞按照一定比例进行混合，制备好的样本在流式细胞仪上进行检测，重复 3次，每次检测结果应符合4.3c)的要求。 5.5稀释线性 取高浓度的细胞样本，按比例稀释为5个不同细胞浓度（每个浓度重复4次）。通过分析相对浓度 的阳性细胞百分率来评估线性。按照公式(1)、（2)计算稀释线性[L或L（%)]。应符合4.4要求。 3 YY/T1184—2010 L=I M; -Mr I ·(1) 式中： L 稀释线性； M, 任一稀释度重复测试的中位数； Mr 所有稀释度重复测试的中位数。 L%=| M; - M 1 /M × 100% (2) 式中： L%- 稀释线性； M, 任一稀释度重复测试的中位数； MT 所有稀释度重复测试的中位数。 5.6批内精密度 试剂对同一样本进行标记，制备好的样本在流式细胞仪上检测10次，根据公式（3)、（4)计算标准差 (s）和变异系数（CV)。结果应符合4.5要求。 n?-()? n(n-1) 式中： 标准差； s 任一次测定值； 重复测定次数。 n CV=s/±×100% ·(4) 式中： CV- 变异系数； 标准差； s 测量结果的算术平均值。 5.7批间精密度 使用3个批号的试剂，分别对同一样本进行标记，制备好的样本在流式细胞仪上进行检测，各重复 3次，根据公式（3)、公式（4)计算9个测定值的标准差（s)和变异系数（CV)。应符合4.6要求。 5.8染色稳定性 使用流式细胞仪配套用试剂进行样本染色处理后，重复检测3次，计算均值（A），放置制造商规定 的时间后，再重复检测3次，计算均值(B)，根据公式(5)计算差值(D)。应符合4.7要求。 ...(5) A 式中： D- 相对偏差，%； A——放置前检测结果均值； 放置后检测结果均值。 5.9稳定性 取到效期后的样品按照5.4、5.6方法进行检测，应符合4.8的要求。 4 YY/T1184—2010 6标识、标签和使用说明书 6.1 流式细胞仪用单克隆抗体试剂的标识、标签 流式细胞仪用单克隆抗体试剂的标识、标签应符合YY/T0466.1一2009的要求，至少应包括以下 内容： a) 产品名称； b) 生产企业名称、地址； 生产地址； c) d) 产品注册证编号； 产品标准编号； e) f) 产品规格； g) 产品批号； h) 贮存条件； i) 失效期。 使用说明书 6.2 流式细胞仪用单克隆抗体试剂的使用说明应包括以下内容： 产品名称； a) b) 包装规格； c) 预期用途； d) 检验原理； e) 主要组成成分（包括单克隆抗体的细胞来源）； f) 贮存条件； g) 适用仪器； h) 样本要求； i) 检验方法； i) 参考范围； k) 检验结果的解释【抗原在细胞上表达的类型（检测图)； 1) 产品性能指标（至少包括但不限于准确度、线性、精密度等）； m) 染色稳定性； n) 注意事项（检验方法的局限性）； 参考文献； o) p) 生产企业名称； (b 医疗器械注册证编号； r) 产品标准编号； s) 说明书批准及修改日期。 7 包装、运输和贮存 7.1包装 a) 试剂的包装应能保证免受自然和机械性损坏； 5