ICS 11. 100 YY C 44 中华人民共和国医药行业标准 YY/T1183—2010 酶联免疫吸附法检测试剂（盒） Detection reagent (kit)for enzyme-linked immunoabsorbent assay (ELISA) 2010-12-27发布 2012-06-01实施 30 国家食品药品监督管理局 发布 数码防伪 YY/T1183—2010 前 言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由全国医用临床检验实验室和体外诊断系统标准化技术委员会（SAC/TC136)提出。 本标准由全国医用临床检验实验室和体外诊断系统标准化技术委员会（SAC/TC136)归口。 本标准起草单位：北京市医疗器械检验所、北京金伟凯医学生物技术有限公司、上海复星长征医学 科学有限公司、贝克曼库尔特商贸（中国）有限公司。 本标准主要起草人：张新梅、贺学英、朱望、吴杰、张晋文 YY/T1183—2010 酶联免疫吸附法检测试剂（盒） 1范围 本标准规定了酶联免疫吸附法检测试剂（盒）的通用技术要求，包括术语与定义、分类、要求、试验方 法、标识和使用说明书、包装、运输和贮存。 本标准适用于在医学实验室以酶联免疫吸附法为原理进行检验的定量/定性检测试剂（盒）（以下简 称“试剂盒”）。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T21415一2008体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学 溯源性 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3. 1 酶联免疫吸附法 去enzyme-linkedimmunoabsorbentassay，ELISA 以酶作为标记指示物，以抗原抗体反应为基础，通过色原呈色程度进行结果判断的固相吸附测试方 法。呈色程度用吸光度（A)值表示，所测A值与待测抗原或抗体的水平呈相关关系。 注：固相载体包括微孔板、管、磁颗粒、微珠、塑料珠等载体 3.2 酶联免疫吸附法检测试剂盒detectionkitforELISA 旨在用于以酶联免疫吸附法为原理完成特定体外诊断检验的一组组分，可包含有包被的固相载体、 抗体/抗原、酶结合物、缓冲液、显色系统、稀释液、校准品、质控品等。 3.3 内包装immediatecontainer，primarycontainer 防止内容物受污染和外部环境其他影响的包装。 示例：密封瓶、安或瓶、锡箔袋、密封塑料袋。 [ISO/FDIS18113-1，定义3.24] 3.4 外包装（销售包装） outercontainer(salespackaging) 用于包装试剂（盒）内包装的材料。 注：改写ISO/FDIS18113-1，定义3.49。 3.5 标识 尺label 在体外诊断产品或其包装上的印刷、书写或图形信息。 1 YY/T1183—2010 3. 6 批batch(lot) 由一个过程或一系列过程生产的具有一致特性的规定量的材料。 注：可以是起始材料、中间材料及终产品。 [ISO/FDIS18113-1，定义3.5] 3.7 批号batchcode，lotnumber 能特异性识别一个批次并使其制造、包装、标识、运输过程具有可追溯性的特定数字和（或）字母的 组合。 [ISO/FDIS18113-1，定义3.6] 3. 8 计量学溯源性 metrological traceability 准，通常是与国家标准或国际标准联系起来的特性， 注1：通过校准传递方案确定的（参考）测量程序实现每 步比较。 注2：溯源性有几种 本标准使用术语“计量学溯源性” ［GB/T21415 定义3.211 3. 9 准确度accuracy 一个测量值与 注1：此处引用 534-1，在JJF1001 -1998中，使用“真值而不是“可接受的参考值”的概念。 注2：当“准确度 PRE 术语应用于 批检测结果时，包括了随机误差部分和 个共有的系统误差或偏差部分。 [ISO3534-1 定义3.11] 3.10 回收 recover 已存在于或加 检测物质中的分析物所占的量值比例 注：一般以所加入3 量值的百分比报告。 3. 11 检测 限 detection limitmit of detection 注1：也被描述为最低检测限"minimumdetectableconcentration)（或剂量或值）。 注2：有时被不正确地指作分析灵敏度。 注3：本标准中的最低检测限为区别于零的不低于95%可信区间的最低浓度。 3.12 测量系统的线性linearityofameasuringsystem 给出的测量结果与样品中被测量的值直接成比例的能力 注1：对与体外诊断医疗器械，线性相关于测量结果在一给定测量范围经校正或线性化以后的测量示值。 注2：线性通过测量包含被测量已知配方或其间相对关系（不必绝对知道)的样本来评估。当测量结果相对被测量 绝对或相对数值作图时，所划曲线对直线的符合程度即线性度的量度。 [ISO/FDIS18113-1,定义A.3.21] 3.13 重复性repeatability 在相同测量条件下，对同一被测量进行连续多次测量所得结果之间的一致性。 ［JJF1001—1998，定义5.6]］ 2 .YY/T1183—2010 3.14 失效期expirydate 在规定的条件下贮存可以保证试剂（盒）的性能特征的时间区间上限。 注：改写ISO/FDIS18113-1，定义3.17。 3.15 稳定性 stability 试剂（盒）在生产企业规定界限内保持其特性的能力。 注1：稳定性适用于：当体外诊断试剂、校准物或质控物储存、运输和在生产企业规定的条件下使用时；复溶后冻干 材料和（或）制备的工作液；打开密封容器的材料；校准后的仪器或测量系统。 注2：体外诊断试剂或测量系统的稳定性通常用时间量化。稳定性可以计量学性能特征发生一定量的变化的时间 或一定的时间内特征的变化量来量化。 注3：改写ISO/FDIS18113-1，定义3.68。 3.16 临界值 cutoffvalue 在定性检测中，作为阳性和阴性分界点的测量值，也称阴性/阳性判断值。 4分类 可按如下方式分类： a) 根据方法原理和步骤不同可分为夹心法，间接法，竞争法，捕获法和生物素-亲和素ELISA 法等。 b) 依据操作方式的不同可分为手工操作法和仪器自动操作法。 根据对试验结果的判定方式不同可分为定量检测试剂盒和定性检测试剂盒。定量是用抗原或 c) 抗体的校准品制备标准曲线，最终以浓度值进行报告。定性是参比阴性对照、阳性对照（或称 阴性、阳性质控品）等的吸光度，以P/N或S/CO比值等结果进行报告。 5要求 5.1对酶联免疫吸附法定量检测试剂（盒）的要求 5.1.1外观 外观应符合如下要求： a) 试剂（盒）各组份应齐全、完整，液体无渗漏； b）# 标识应清晰，易识别。 5.1.2 溯源性 生产企业应根据GB/T21415一2008及有关规定提供所用校准品的来源、赋值过程以及不确定度 等内容。 5.1.3准确度 准确度应符合如下要求之一： a) 用参考物质作为样本进行检测，其测量结果的相对偏差应在规定范围内； b） 回收：将已知浓度的待测物加入到血液基质或其他体液成分中，其回收率应在规定范围内； c) 比对：用已上市试剂盒或参考方法进行比对试验，结果应满足相应的要求。 3 YY/T11832010 5.1.4检测限 应符合相应规定的要求。 5.1.5测量系统的线性 在生产企业规定的线性范围内，试剂盒的相关系数r应不小于0.9900。 5.1.6重复性 用至少2个浓度水平的样本各重复检测10次，手工操作法或仪器自动操作法的变异系数（CV)应 符合相应规定的要求。 5.1.7批间差 CHIN 用3个批号试剂盒检测 样本，则3个批号试剂盒之间的批间变异系数（CV)应符合相应规定 的要求。 5.1.8 稳定性 a) 效期稳定性：生产企业应规定试剂（盒）的失效期。取失效期的试剂盒检测准确度、最低检测 限、测量系统 统的线性和重复性，应符合5.1.3~5.1.6的要求； 试在规定的加热条件（如37℃)下放置规定时间，检测准确度、最低检测限、测量 b） 热稳定性话 系统的线性和重复性，应符合5.1.35.1.6的要求。 注1：热稳定性试验不能用于推导产品有效期，除非是采用基于大量的稳定性研究数据建立的推导公式。 符合标准要求 5.2.1 外观 外观应符合如下要 a) 试剂(盒)各组份应 、完整，液体无渗漏 b) 5.2.2 阴性参考品符合率 S 对阴性国家参考品或生产企业提供的阴性参考品进行检测，其阴性参考品符合率应符合相应规定 的要求。 5.2.3阳性参考品符合率 的要求。 5.2.4检测限 对检测限国家参考品或生产企业提供的检测限参考品进行检测，结果应符合相应规定的要求。 5.2.5重复性 用重复性参考品重复检测10次，其变异系数（CV)应符合相应规定的要求。 YY/T1183—2010 5.2.6批间差 用3个批号试剂盒检测同一份样本，则3个批号试剂盒之间的批间变异系数（CV)应符合相应规定 的要求。 5.2.7稳定性 可选用以下方法进行验证： a) 效期稳定性：生产企业应规定试剂（盒）的失效期。取失效期的试剂盒检测阴性参考品符合率、 阳性参考品符合率、检测限和重复性，应符合5.2.2~5.