ICS13.310 GA A 92 中华人民共和国公共安全行业标准 GA/T13322016 法庭科学血液中甲草胺等五种酰胺类 除草剂气相色谱-质谱检验方法 GC-MS examination methods for five actamide herbicides including alachlor in blood in forensic science 2016-09-14实施 2016-09-14发布 中华人民共和国公安部 发布 GA/T 1332—2016 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由全国刑事技术标准化技术委员会毒物分析分技术委员会（SAC/TC179/SC1）提出并 归口。 本标准起草单位：北京市公安局刑侦总队、公安部物证鉴定中心。 本标准主要起草人：杨士云、乔静、袁增平、张文芳、何毅、于忠山、王芳琳。 GA/T1332—2016 法庭科学血液中甲草胺等五种酰胺类 除草剂气相色谱-质谱检验方法 1范围 本标准规定了法庭科学血液中五种酰胺类除草剂甲草胺、乙草胺、异丙甲草胺、丁草胺、丙草胺的气 相色谱-质谱（GC-MS)检验方法。 本标准适用于法庭科学血液中甲草胺、乙草胺、异丙甲草胺、丁草胺、丙草胺的定性定量分析。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682-2008分析实验室用水规格和试验方法 GA/T122毒物分析名词术语 3术语和定义 GA/T122界定的术语和定义适用于本文件。 4原理 以空白样品和添加样品作对照，按平行操作的要求，对血液进行提取、净化及浓缩后，采用气相色 谱-质谱法检测，以保留时间（t?）、质谱特征离子碎片峰和相对丰度作为定性判断依据；与平行操作的添 加标准物质响应值比较，根据峰面积之比，用外标法进行定量分析。 5试剂和材料 除另有说明外，本标准所用试剂均为分析纯，试验用水为三级水（见GB/T6682一2008规定）： a）环已烷； b）乙醇； c）标准溶液： 1）1.0mg/mL标准物质溶液：分别称取甲草胺、乙草胺、异丙甲草胺、丁草胺、丙草胺标准物 质50.0mg于50mL容量瓶中，加一定量乙醇溶解并稀释至刻度，混匀。分别配制成 1.0mg/mL的甲草胺、乙草胺、异丙甲草胺、丁草胺、丙草胺标准物质溶液。密封，置于冰 箱中冷冻保存。保存时间12个月； 10mL容量瓶中，加人乙醇稀释至刻度，混匀。分别配制成0.1mg/mL的甲草胺、乙草 胺、异丙甲草胺、丁草胺、丙草胺标准工作溶液。密封，置于冰箱中冷藏保存。保存时间 6个月。 1 GA/T1332—2016 6仪器和设备 仪器和设备包括： a）气相色谱-质谱联用仪：配电子轰击离子源（EI），离子阱或四级杆检测器； b）电子天平：分度值为0.1mg； c）离心机； d）涡旋振荡器； e） 硅胶柱：500mg/3mL； f）微量注射器：10μL； g）移液器； h）具盖离心管； i) 浓缩器。 7 操作方法 7.1定性分析 7.1.1 样品萃取 7.1.1.1样品制备 移取血液1.0mL～2.0mL于具盖离心管中。移取等量空白血液3份于具盖离心管中，一份作为 空白样品，另两份添加酰胺类除草剂标准物质1.0ug，作为添加样品，混匀，待检。 7.1.1.2液液萃取 取7.1.1.1待检样品，分别加人环已烷8mL，振荡5min，8000r/min离心10min，提取有机相；重 复提取-一次，合并两次提取的有机相，过硅胶柱（使用前分别用甲醇2mL、环已烷2mL活化），收集流 出液在浓缩器上50℃下浓缩至干或自然挥干，残渣加人乙醇100μL定容，转移至进样瓶内，供仪器 分析。 7.1.2仪器检测（气相色谱-质谱仪条件） 以下为参考条件，可根据不同品牌仪器和不同样品等实际情况进行调整： a)1 色谱柱：DB-5MS毛细色谱柱（或其他5%二苯基-95%二甲基聚硅氧烷等效柱），30mX0.25mmX 0.25 μm; 注：DB-5MS毛细色谱柱为Agilent公司产品的商品名称，给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不是表示对 该产品的认可。如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效产品。 b) c) 进样口温度：280℃； d) 传输线温度：260℃； e) 载气：氮气，纯度大于99.999%； 电子轰击能量：70eV； g) 离子源温度：200℃； h) 倍增器电压：自动调谐值； 溶剂延迟：3min； 2 GA/T1332—2016 j）柱流量：1mL/min； k）分流比：10：1； 1）质量范围：40amu~400amu; m）扫描方式：全扫描（SCAN）。 7.1.3记录和计算 记录各样品及标准物质平行进样2次～3次中目标物的tr及蜂面积值，按式（1)计算回收率： R= ....(1 ) AXMs 式中： R 回收率； A一 -添加样品中标准物质峰面积平均值； W纯- 标准物质浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）； -添加样品的定容体积，单位为毫升（mL）； A纯 标准物质的峰面积平均值； Me一 一添加样品中标准物质添加量，单位为微克（ug）。 7.2 定量分析 7.2.1 样品萃取 移取血液2.0mL两份，另取相应的空白血液两份，分别添加标准酰胺类除草剂（添加量应与案件 样品的粗测值相近），混匀。按7.1.1进行操作。 7.2.2仪器检测 按7.1.2进行检测。 7.2.3记录与计算 7.2.3.1 计算药物含量 记录各样品平行进样2次～3次中目标物的峰面积值，按式（2)分别计算各酰胺类除草剂的含量： A样×MXV样 W: ....(2) AXM¥XVs 式中： W 单位质量案件样品中目标物质的含量，单位为微克每毫升（μg/mL）； A样 案件样品中目标物特征离子的峰面积平均值； M 添加样品中标准物质添加量，单位为微克（μg）； V# 案件样品的定容体积，单位为毫升（mL）； A歌 添加样品中目标物特征离子峰面积平均值； M群 案件样品的取样量，单位为毫升（mL）； Vs 添加样品的定容体积，单位为毫升（mL）。 7.2.3.2计算相对相差 记录2份平行操作的案件样品含量，按式（3)计算相对相差： IX, -X21 RD= ×100% (3) x 3