ICS 67.160.10 QB 分类号：X62 备案号：60689-2017 中华人民共和国轻工行业标准 QB/T5198-2017 葡萄酒用软木塞中 2，4.6-一三氯苯甲迁移量的测定方法 Determination of releasable 2,4,6-trichloroanisole from cork stoppers for wine 2017-11-07发布 2018-04-01实施 中华人民共和国工业和信息化部 发布 QB/T5198-2017 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由中国轻工业联合会提出。 本标准由全国食品发酵标准化中心归口。 本标准起草单位：中国食品发酵工业研究院、河北百林软木制品有限公司、宜宾市产品质量监督检 验所、河北科技大学、中国长城葡萄酒有限公司。 本标准主要起草人：钟其顶、赵昕刚、李华、李艳、孙建平、高红波、李国辉。 本标准为首次发布。 I QB/T5198—2017 葡萄酒用软木塞中2.4.6-三氯苯甲迁移量的测定方法 1范围 本标准规定了葡萄酒用软木塞中2,4,6-三氯苯甲醚迁移量的测定方法 本标准适用于葡萄酒用软木塞中2,4,6-三氯苯甲醚迁移量的测定，方法的检出限为0.5ng/L。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法。 3固相微萃取-气相质谱法（第一法） 3.1原理 在葡萄酒存放过程中，软木塞中的2,4,6-三氯苯甲醚会向葡萄酒中迁移，本方法模拟该迁移过程，将 软木塞浸泡在乙醇-水溶液中一定时间达到平衡。取一定量的浸泡液于密闭容器中加入内标，采用固相 微萃取法富集待测组分，气相色谱-质谱法测定，内标法定量。 3.2试剂和材料 除另有说明外，所有试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。 3.2.1 无水乙醇：色谱纯。 3.2.2 2,4,6-三氯苯甲醚：纯度≥99%。 3.2.3 氯化钠。 3.2.4 2,4,6-三氯苯甲醚-D5：纯度≥99%。 3.2.5 乙醇溶液（12%，体积分数）：吸取12mL无水乙醇（3.2.1）至100mL容量瓶中，用水定容， 混匀。 3.2.6 2,4,6-三氯苯甲醚标准储备液（500mg/L）：称取0.050g2,4,6-三氯苯甲醚（3.2.2），用适量 无水乙醇（3.2.1）溶解，转移至100mL容量瓶中，并用无水乙醇（3.2.1）定容，混匀。 3.2.72,4,6-三氯苯甲醚-Ds内标储备液（500mg/L）：称取0.050g2,4,6-三氯苯甲醚-Ds（3.2.4），用 适量无水乙醇（3.2.1）溶解，转移至100mL容量瓶中，并用无水乙醇（3.2.1）定容，混匀。 用无水乙醇（3.2.1）逐级稀释，配制成50.0μg/L。 50mL容量瓶中，用乙醇溶液（3.2.5）定容，混匀，现用现配。 （3.2.7），用适量乙醇溶液（3.2.5）逐级稀释，配制成2.0μg/L，现用现配。 3.2.112,4,6-三氯苯甲醚系列标准工作液：吸取一定量的2,4,6-三氯苯甲醚工作液B（3.2.9），用乙醇 溶液（3.2.5）逐级稀释，配制成0ng/L、2.5ng/L、5.0ng/L、15.0ng/L、20.0ng/L系列标准工作液。 3.3仪器和设备 3.3.1气相色谱-质谱仪：配电子轰击源（EI源）。 3.3.2分析天平：感量为0.1mg。 3.3.3固相微萃取装置。 3.3.4固相萃取头：涂层厚为100μm的聚二甲硅烷氧烷纤维头（PDMS）。 QB/T5198-2017 3.3.5顶空进样瓶：20mL。 3.3.6恒温水浴锅，配有磁力搅拌功能 3.3.7玻璃广口瓶：1000mL 3.4分析步骤 3.4.1试样制备 3.4.1.1样品前处理 取20个软木塞 放入1000mL玻璃广口瓶中，加入乙醇溶液（3,2.5）至1000mlL刻度，并使软木塞 全部浸没，在室温下放置（24±2）h。 3.4.1.2样品富集 将上述乙醇浸泡液混匀， 吸取10.0mL升20mL顶空瓶中，加入30g氯化钠（3.23），100μL2,4,6- 三氯苯甲醚-Ds内标工作液 （3.2.10） 加入磁力转子，加盖密封混匀。将顶空瓶置于恒温加热磁力搅拌 器中，40℃平衡10 min, 然后将固相微萃取头插入顶空瓶， 在40℃持续搅拌下萃取30min，然后将固 相微萃取头在气相色谱进样口解析后测定。 3.4.2仪器参考条件 3.4.2.1固相微萃取解吸条件 固相微萃取解吸条件设定如下： 样品解析温度：260℃； 样品解析时间：5min。 3.4.2.2气相色谱-质谱仪分析条件 气相色谱-质谱仪参数设定如下： 色谱柱：5%-二苯基聚硅氧烷共聚物毛细管柱（30mx0.25mm×0.25um）或等效色谱柱； 柱温：初温50℃，保持2min，以9.0K/min升到150℃，保持1min，以20K/min升到260℃， 保持3min； 进样口温度：260℃ 载气流量：1.0mL/min； 进样方式：不分流进样： 电离模式：电子轰击源（EI），能量为70eV； 离子源温度：230°℃C； 四级杆温度：150℃； 传输线温度：250℃C； 检测方式：选择离子监测SIM）； 2,4,6-三氯苯甲醚选择监测离子（m/z）：195、210、212：定量离子195； -2，4,6-三氯苯甲醚-D，选择监测离子（7mlz）199、215、217：定量离子215。 3.4.3定性测定 按照3.4.2仪器参考条件测定2,4,6-三氯苯甲醚系列标准工作液和试样，试样的色谱峰保留时间与标 准品保留时间的允许偏差±25%；定性离子对的相对丰度与浓度相当标准工作溶液的相对丰度允许偏 差不超过表1的规定，标准品选择离子监测色谱图及质谱图见附录A。 表1定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差 单位为% 相对离子丰度 >50 >20~50 >10~20 ≤10 允许的最大偏差 ±20 ±25 ±30 ± 50 2 QB/T5198-2017 3.4.4标准曲线绘制 分别准确吸取10mL2,4,6-三氯苯甲醚系列标准工作液（3.2.11）于20mL顶空瓶中，按照3.4.1.2进 行样品富集，按照3.4.2仪器参考条件进行测定，以2:4.6-一氯苯甲醚浓度为横坐标，以相应浓度的峰面 积与内标峰面积比为纵坐标，绘制标准曲线。 3.4.5样品测定 取3.4.1制备的试样溶液，按照3.4.2仪器参考条件测定， 根据2,4,6-三氯苯甲醚和内标的峰面积之比， 计算待测液中2,4,6-三氯苯甲醚的含量。 3.4.6空白试验 除不加入试样外，按上述步骤同时完成空白试验 3.5结果计算 3.5.1试样浸泡溶液中2,4.6-三氯苯甲醚含量的计算 试样浸泡溶液中2.4.6-三氯苯甲醚的含量按公式（1）计算： X . (1) C 式中： 试样浸泡溶液中2.4.6-三氯苯甲醚的含量，单位为纳克每升（ng/L)； X 从标准曲线求得待测液中24.6-三氯苯甲醚的含量，单位为纳克每升（ng/L）； c 从标准曲线求得试剂空白中2,4,6-三氯苯甲醚的含量，单位为纳克每升（ng/L）。 Co 计算结果保留1位有效数字。 3.5.2试样中2,4,6-三氯苯甲迁移量的表述 由3.5.1得到的试样浸泡溶液中2,4,6-三氯苯甲醚的含量，即为试样中2.4,6-三氯苯甲醚的迁移量，计 算结果保留1位有效数字，同时迁移量的表述应包括迁移试验条件（温度、时间、模拟物、软木塞数量、 浸泡容器体积等）的相关信息。 3.6精密度 在重复性测定条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不超过其算术平均值的20%。 4固相微萃取-气相色谱电子捕获检测器法（第二法） 4.1原理 在葡萄酒存在过程中，车 软木塞中的2,4,6-三氯苯甲醚会向葡萄酒中迁移，本方法模拟该迁移过程， 将软木塞浸泡在乙醇-水溶液一定时间达到平衡。取一定量的浸泡液于密闭容器中加入内标，采用固相 微萃取法富集待测组分，气相色谱-电子捕获检测器测定，内标法定量 4.2试剂和溶液 除另有说明外， 所有试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水 4.2.1无水乙醇：色谱纯 4.2.2氯化钠。 4.2.32,4,6-三氯苯甲醚：纯度≥99% 4.2.42,6-二氯苯甲醚：纯度≥99%。 4.2.5乙醇溶液（12%，体积分数）：同3.2.5。 4.2.62,4,6-三氯苯甲醚储备液（500mg/L）：同3.2.6。 4.2.72,6-二氯苯甲醚内标储备液（500mg/L）：称取0.050g2,6,二氯苯甲醚（4.2.4），用适量无水 乙醇溶解（4.2.1），转移至100mL容量瓶中，并用无水乙醇（4.2.1）定容，混匀。 4.2.82,4,6-三氯苯甲醚工作液A（50.0μg/L）：同3.2.8。 3 QB/T51982017 4.2.92,4,6-三氯苯甲醚工作液B（1.0μg/L）：同3.2.9。 4.2.102,6-二氯苯甲醚内标工作液（2.0μg/L）：将2,6-二氯苯甲醚内标储备液（4.2.7），用适量乙醇 溶液（4.2.5）逐级稀释，配制成浓度为2.0μg/L的内标工作液。 4.2.112,4,6-三氯苯甲醚系列标准工作液：同3.2.11。 4.3仪器和材料 4.3.1气相色谱仪：配电子捕获检测器（ECD）。 4.3.2分析天平：同3.3.2。 4.3.3固相微萃取设备：同3.3.3。 4.3.4固相萃取头：同3