ICS67.160.10 QB 分类号：X62 备案号：59741-2017 中华人民共和国轻工行业标准 QB/T5164-2017 白酒中乙醇的稳定碳同位素比值（13℃/12C） 测定方法 气相色谱一燃烧一稳定同位素比 值质谱法 Determination of the stable carbon isotope ratio (13C/2c) of ethanol in Baijiu- Gas chromatography-combustion-isotope ratio mass spectrometry 2017-07-07发布 2018-01-01实施 中华人民共和国工业和信息化部 发布 QB/T 5164-2017 前 言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由中国轻工业联合会提出 本标准由全国食品发酵标准化中心归口。 本标准起草单位：中国食品发酵工业研究院、中国计量科学研究院、泸州老窖股份有限公司、四川 宜宾五粮液集团有限公司、济南趵突泉酿酒有限责任公司。 本标准主要起草人：钟其顶、王道兵、逐海、邓波、李杨华、邢介平。 本标准为首次发布。 QB/T5164-2017 白酒中乙醇的稳定碳同位素比值（13C/12C）测定方法 气相色谱-燃烧-稳定同位素比值质谱法 1范围 本标准规定了应用气相色谱-燃烧-稳定同位素比值质谱仪测定乙醇稳定碳同位素比值（13c/12C）的 方法。 本标准适用于白酒和酒精中乙醇的稳定碳同位素比值（13c/12c）的测定。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB6379.2测量方法与结果的准确度（正确度与精密度）第2部分：确定标准测量方法重复性与 再现性的基本方法。 3符号、缩略语及含义 下列符号和缩略语适用于本文件。 13c/12C：稳定碳同位素比值，是稳定碳同位素13c与12C的原子丰度之比。 a13C：样品的稳定碳同位素比值相对于参考物质的稳定碳同位素比值的千分差。 PDB：Pee-DeeBelemnite，美国南卡罗来纳州白垩纪皮狄组层位中的拟箭石化石，是稳定碳同位素 比值的国际基准物质。 IRMS：IsotopeRatioMassSpectrometry，稳定同位素比值质谱仪。 4原理 样品溶液中乙醇经气相色谱柱与其他有机组分分离，乙醇在反应管中转化成二氧化碳气体，IRMS 测定该二氧化碳的稳定碳同位素比值，再通过公式计算得出乙醇的3C。 5试剂和材料 5.1 乙醇碳同位素参考物质，或参照附录A方法建立乙醇工作标准物质。 5.2丙酮（色谱级）。 5.3氨气（He）：纯度不应小于99.999%。 5.4二氧化碳（CO2）气体：纯度不应小于99.99%。 5.5氧气（02）：纯度不应小于99.99%。 6仪器和设备 6.1气相色谱仪。 6.2燃烧装置：工作温度为1000℃，配套水分离膜。 6.3IRMS：分析内精度优于0.05%o，配套连续流进样接口。 6.4气相色谱柱：聚乙二醇毛细管柱（50m×0.25mm×0.20um）或等效色谱柱。 1 QB/T51642017 7分析步骤 7.1样品处理 采用丙酮稀释样品至乙醇含量约为8g/L，以适应仪器测定的线性范围。 7.2仪器参考参数 仪器参数设定如下： 进样口温度：180℃ 氢气流量 1.0mL/min 进样体积 1 μL; 分流比：20：1； 程序升温 起始温度40℃， 保持5min，以1K/min速率升温至50℃，保持1min，再以15K/min 速率升温至200℃，保持2min； 反应管温度：1000℃。 7.3样品测定 7.3.1分析序列 采用两点标准漂移校正模式安排分析序列，每个分析序列应同时测定参考物质（或工作标准物质）， 其比例一般为样品数量的10%~20%。 7.3.2样品测定 调整元素分析仪和RMS至工作状态，根据已设定的仪器参数（7.2）和分析序列（7.3.1）进行测定。 8计算 8.1分析结果的表述 样品中乙醇的稳定碳同位素组成以其对参考物质中相应同位素比值的千分差（记为%）表示，按公 式（1）计算： (1) (13 C/12 C)RM 式中： sl3CRM (13C/2C)sA 样品的13c/%c测定值； (13C/12C)RM 参考物质的C/12C测定值。 结果保留至小数点后两位。 8.2结果计算 所测的稳定碳同位素组成结果应校准至国际基准PDB值，按公式（2）计算： ·(2) 3M-PDB×1000. 式中： S13CPDB 一样品的13c/2C测定值相对于PDB的13C/2e测定值的千分差； l3CRM -- 一样品的13c/2C测定值相对于参考物质的13c/12C测定值的千分差； 313CRM-PDB 结果保留至小数点后两位。 2 QB/T5164-2017 9精密度 本部分的精密度数据按照GB/T6379.2的规定确定，重复性和再现性的值以95%的可信度计算。 9.1重复性限 在重复性条件下，获得的两次独立测试结果的绝对差值不超过重复性限（： r=0.20%0。如果差值 超过重复性限（r），应舍弃试验结果并重新完成两次单个试验的测定。 9.2再现性限 在再现性条件下，获得的两次独立测试结果的绝对差值不超过再现性限（R）：R=0.45%o。 QB/T5164-2017 附录A (资料性附录） 建立实验室中乙醇13c标准工作物质的参考方法 A.1原理 使用元素分析仪-稳定同位素比值质谱仪（EA-IRMS）分别测定乙醇和参考物质的13C/12C比值，以 参考物质为基准对纯乙醇样品的s13C进行校正处理，得出该乙醇样品的碳同位素组成（s13CpDB）。当连 续3次测定的标准偏差<0.15%0、连续10天测定结果的波动性<0.20%时，可将该乙醇用作实验室工作标 准物质。 A.2试剂和材料 除非另有说明，所用试剂均为分析纯。 A.2.1乙醇：纯度不应小于99.8%。 A.2.2氧气（O2）：纯度不应小于99.99%。 A.2.3氨气（He）：纯度不应小于99.999%。 A.2.4参考物质 可选择国际原子能机构（IAEA）或全国标准物质管理委员会等权威机构认可的参考物质，根据实 际工作需要选择其中一种或几种（见表A.1）。 表A.1参考物质示例 编号 名称 13CpDB/%0 机构 IAEA-CH-6 燕糖 10.40±0.20 国际原子能机构 USGS40 L-谷氨酸 26.39±0.09 美国国家标准与技术研究院 GBW04407 炭黑 22.43±0.07 全国标准物质管理委员会 GBW04408 炭黑 36.91±0.10 A.3仪器和设备 A.3.1 元素分析仪。 A.3.2IRMS：分析内精度优于0.05%o，配套连续流进样接口。 A.3.3电子天平：感量0.01mg。 A.3.4 锡舟：适宜于液体样品分析。 A.4分析步骤 A.4.1试样的制备 A.4.1.1纯乙醇样品 取0.10mg~0.20mg纯乙醇样品于锡舟中，密封备用。 A.4.1.2参考物质及控制样品 取0.10mg~0.20mg参考物质于锡舟中，密封备用。 A.4.2测定 A.4.2.1仪器准备 调整元素分析仪和IRMS仪器至工作状态。 4 QB/T5164-2017 A.4.2.2分析序列 采用两点标准漂移校正模式安排分析序列，每个分析序列应同时测定参考物质，其比例一般为样品 数量的10%～20%。原则上，新的分析序列开始时应检查仪器的稳定性（三次测量的分析双差不大于0.2% 为合格）。 A.4.2.3样品碳同位素测定 根据已设定分析序列进行测定。 A.5计算 A.5.1分析结果的表述 样品中乙醇的稳定碳同位素比值以其对参考物质中相应同位素比值的千分差（记为%）表示，按公 式（A.1）计算： S13CRM: (A.1) (3 C/12 C)RM 式中： S13CRM — ("C/2C)sA——样品的13c/12C测定值; (13C/12C)RM— 一参考物质的13C/12C测定值。 结果保留至小数点后两位。 A.5.2结果计算 所测的稳定碳同位素组成结果应校准至国际基准PDB值，按公式（A.2）计算： S13CpDB =SCRM +$lCRM-PDB +8lCRM ×913CRM-PDB ×1000... (A.2) 式中： 13CpDB s13CRM s13CRM-PDB 参考物质的13C/12C测定值相对PDB的13c/12c测定值的千分差。 结果保留至小数点后两位。 L0