ICS 71.100.40 QB 分类号：Y43 备案号：57048-2017 中华人民共和国轻工行业标准 QB/T5025-2017 口腔清洁护理用品 牙膏中长梗冬青著含量的测定方法 Oral care and cleansing products Determination of pedunculoside in toothpastes 2017-01-09发布 2017-07-01实施 中华人民共和国工业和信息化部 发布 QB/T5025-2017 前 言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由中国轻工业联合会提出。 本标准由全国口腔护理用品标准化技术委员会牙膏分技术委员会（SAC/TC492/SC1）归口。 本标准起草单位：广州市倩采化妆品有限公司。 本标准主要起草人：徐春生、杨万里。 本标准为首次发布。 QB/T5025-2017 口腔清洁护理用品牙膏中长梗冬青含量的测定 1范围 本标准规定了高效液相色谱法测定牙膏中长梗冬青苷的方法要点、试剂与标准物质、仪器、分析步 骤、结果计算、回收率、标准偏差和允许差。 本标准适用于牙膏、漱口水和牙粉等口腔清洁护理用品中长梗冬青苷含量的测定。 本标准长梗冬青苷的检测限为1.2μg/mL，定量下限为2.0μg/mL。若取10.0g样品，长梗冬青苷的最 低检出浓度为12mg/kg，最低定量浓度为20mg/kg。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682一2008分析实验室用水规格和试验方法 3方法要点 将牙膏用甲醇水溶液分散，超声波提取其中的长梗冬青苷成分，然后离心分离并过滤处理，滤液用 带紫外检测器的高效液相色谱仪分析测定，外标法通过峰面积进行定量计算。 4试剂与标准物质 4.1一般规定 除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和水为GB/T6682一2008规定的一级水。 4.2试剂 4.2.1乙腈：HPLC级。 4.2.2甲醇：HPLC级。 4.2.3长梗冬青苷对照品：经国家批准、颁布的，由计量权威机构认定的有证标准物质。 4.2.4滤膜：0.45μm。 4.3标准储备液 精密称取长梗冬青苷对照品5.0mg，置于50mL棕色容量瓶中，用甲醇稀释定容至刻度，摇匀，作 为含长梗冬青苷100.0μg/mL标准储备液。储备液于棕色瓶中，在0℃～4℃避光条件下，可保存48h。 4.4标准工作液 将标准储备液用甲醇逐级稀释，配制成浓度为2.5μg/mL、5.0μg/mL、10.0μg/mL、25.0μg/mL、 50.0μg/mL的标准工作液。 5仪器 5.1高效液相色谱仪，配紫外检测器。 5.2SymmetryC18柱（4.6mm×250mm，5μm），或相当的色谱柱。 5.3磁力搅拌器。 5.4超声波清洗器。 5.5离心机。 5.6分析天平，精度0.1mg。 1 QB/T50252017 6分析步骤 6.1样品处理 在100mL棕色容量瓶中加入10mL水，牙膏样品先挤去大约20mm，再精密称入10g（精确至 0.0001g），磁力搅拌至牙膏分散均匀，将磁子取出，用甲醇混匀并定容。继续磁力搅拌15min，超声 处理20min后，将样品溶液装入10mL离心管中，4000r/min以上离心分离30min。冷却至室温后，上清 液经0.45um滤膜过滤，备用。 6.2测定 6.2.1液相色谱参考条件 按照表1设定液相色谱条件。 表1 液相色谱条件 仪器参数 设定值 紫外检测波长/nm 210 进样量/μL 10 流量/（mL/min） 10 运行时/min 35 柱温℃ 30 流动相 水-乙腈-甲醇（梯度按表2） 按照表2设定液相色谱流动相洗脱条件。 表2流动相洗脱条件 A:水(%) B:乙睛(%) 时间/min C：甲醇(%) 流量/（mL/min） 0.00 1.00 60.0 30.0 10 1.00 60.0 30.0 13.00 1:00 30.0 15.00 60.0 10 24.00 1.00 30.0 60.0 10 27.00 1.00 60.0 30.0 10 35.00 1.00 60.0 30.0 10 6.2.2标准曲线 准确吸取4.7制备的标准工作液10μL，分别注入液相色谱仪，按照6.2.1的色谱条件进行测定。以长 梗冬青苷的含量为X轴，其相应的峰面积为Y轴，绘制标准曲线 长梗冬青苷标准溶液的液相色谱图，参照附录A中图A1。 6.2.3测定 准确吸取10uL经6.1处理的样品溶液，注入液相色谱仪测定长梗冬青苷峰面积，由标准曲线查找出 试样溶液中长梗冬青苷的浓度。 样品溶液的液相色谱图，参照附录A中图A.2。 7结果计算 试样中长梗冬青苷的含量X（mg/kg），按公式（1）计算： 2 QB/T5025-2017 (1) m 式中： 试样中长梗冬青苷的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）： X- 试样溶液中长梗冬青苷的浓度，单位为微克每毫升（μg/mL） 一试样定容体积，单位为毫升（mL）； N 稀释倍数； 标准对照品中长梗冬青替的纯度； K 试样质量，单位为克（g） m 计算结果保留至整数位 8回收率 长梗冬青苷在添加浓度5.0μg/mL25.0ug/mL范围内，本标准方法的回收率为98.6%~102.1%。 9标准偏差 本标准方法的相对标准偏差小于5%（n-6） 10允许差 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不应超过算数平均值的10% QB/T5025-2017 附录A （资料性附录） 液相色谱参考谱图 kwo 0.01 Coc 0.09 0.04 0.02 001 cmo 100- 10 60c 1C00 1100 14.00 15. g;t) · min: 图A.1 长梗冬青苷标准液相色谱图 0.035 0.030- 0.025 0.020. 0.015 0.010- 500'0 0.000. 200 3.00 4.00 图A.2 牙膏样品液相色谱谱图