ICS 65.020 B 16 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T 1248.9—2016 玉米抗病虫性鉴定技术规范 第9部分：纹枯病 Technical specification on evaluation of maize resistance to pests- Part 9 :Banded leaf and sheath blight 2016-10-26 发布 2017-04-01实施 中华人民共和国农业部发布 NY/T1248.9—2016 前言 NY/T1248《玉米抗病虫性鉴定技术规范》拟分为13个部分： 第1部分：大斑病； 第2部分：小斑病； 第3部分：丝黑穗病； 第4部分：矮花叶病； 第5部分：玉米； 第6部分：腐霉茎腐病； 第7部分：镰孢茎腐病； 第8部分：镰孢穗腐病； 第9部分：纹枯病； 第10部分：弯孢叶斑病； 第11部分：灰斑病； 第12部分：瘤黑粉病； 第13部分：粗缩病。 本部分为NY/T1248的第9部分。 本部分按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本部分由农业部种子管理局提出并归口。 本部分起草单位：四川省农业科学院植物保护研究所、全国农业技术推广服务中心、中国农业科学 院作物科学研究所、河北省农林科学院植物保护研究所、吉林省农业科学院植物保护研究所。 本部分主要起草人：李晓、孙世贤、王晓鸣、石洁、晋齐鸣。 I NY/T1248.9—2016 玉米抗病虫性鉴定技术规范 第9部分：纹枯病 1范围 本部分规定了玉米抗纹枯病鉴定技术方法和抗性评价标准。 缘种对玉米纹枯病抗性的田间鉴定和评价。 2术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 2. 1 纹枯病banded leafand sheathblight 由丝核菌(Rhizoctonia spp.）所引起的以叶鞘、叶片、雌穗苞叶产生云纹状病斑为特征的玉米病害。 该病害表现为玉米植株叶鞘腐烂、叶片枯死、雌穗干缩霉变、籽粒灌浆不足。 3纹枯菌接种体制备 3.1病原菌分离 以常规组织分离法从纹枯病植株的发病叶鞘分离丝核菌或采集病原菌菌核分离丝核菌。病原菌经 形态学鉴定确认为丝核菌（Rhizoctoniaspp.）（参见附录A）后，对分离物进行纯化培养和致病性测定。 3.2致病种鉴定 对用于抗病性鉴定接种的病原菌应进行种的鉴定。种的鉴定主要采用形态学及细胞核染色的 方法。 3.3病原菌繁殖 采用麦粒对病原菌进行扩大繁殖（参见附录A)。在25℃下黑暗培养，5d～7d.后，病原菌菌丝布满 麦粒即可用于接种。可采用不同地点来源的多个纹枯菌菌株分别繁殖后混合接种。 4抗病性鉴定圃 4.1鉴定圃设置 鉴定圃应具备良好的自然发病环境，能够进行自主灌溉。 4.2鉴定设计 鉴定材料随机排列或顺序排列。在进行选育品种抗病性鉴定时，每30行鉴定材料设1组已知抗病 和感病对照材料（参见附录B)。在进行种质资源抗病性鉴定时，每50行鉴定材料设1组已知抗病和感 病对照材料。 4.3种植要求 鉴定材料播种时间与大田生产播种时间相同，以使植株发病期能够与适宜的气候条件（降雨与温 度)相遇。 鉴定小区行长5.00m，行距0.60m或0.65m，条播或穴播，每行留苗25株～30株，低于25株时视 为该品种/材料鉴定无效。鉴定种质资源时，每份鉴定材料种植1行；鉴定选育品种时，每份材料种植2 NY/T1248.9—2016 行。土壤肥力水平和耕作管理与大田生产相同。 5接种 5.1接种时期 接种时间为玉米大喇叭口期（V10），接种可全天进行。 5.2接种方法 将麦粒培养物以每株2粒的用量接种在玉米植株基部由下向上第三叶叶鞘内侧。 5.3接种前后的田间管理 接种前应先进行田间浇灌或在雨后土壤湿润而不黏时进行接种。接种后若遇干旱，应及时进行田 间浇灌，保持土壤相对湿度不低于25%。 6病情调查 6.1调查时间 在玉米进入乳熟后期(R4)进行调查。 6.2调查方法 逐株调查记载发病症状，调查部位为雌穗以下茎节，记载病情级别。 6.3个体植株病情分级 病情分级及相对应的植株症状描述见表1。 表1玉米抗纹枯病鉴定个体植株病情级别划分 病情级别 症状描述 1 无症状，最下方的果穗下第4叶鞘及以下叶鞘发病 3 最下方的果穗下第3叶鞘及以下叶鞘发病 5 最下方的果穗下第2叶鞘及以下叶鞘发病 7 最下方的果穗下第1叶鞘及以下叶鞘发病 9 最下方的果穗及其以上叶鞘发病 6.4群体植株病情指数计算 通过对鉴定材料群体中个体植株发病程度进行综合评价，确定各鉴定材料的病情指数。病情指数 计算方法见式（1)。 Z(S; ×j) X : × 100 ......(1) 9XN 式中： X-—病情指数； 一病情级别(当i为1、3、5、7、9时，S;分别为1、3、5、7、9)； i-对应S;的该级别植株数，单位为株； N—调查总株数，单位为株。 6.5群体植株病情分级 鉴定材料群体的病情级别划分依据该品种/种质群体的病情指数进行确定，划分标准见表2。 表2玉米抗纹枯病鉴定群体植株病情级别划分 描述 病情级别 1 成株期病情指数0~20.0 3 成株期病情指数20.1~40.0 2 NY/T1248.9—2016 表1 (续) 病情级别 描述 5 成株期病情指数40.1~60.0 7 成株期病情指数60.1~80.0 9 成株期病情指数80.1~100 抗性评价 7. 1 鉴定有效性判别 当设置的高感对照材料病情指数大于80.0时，该批次鉴定视为有效。 7. 2 2抗性评价标准 依据鉴定材料发病程度（病情级别)确定其抗性水平，划分标准见表3。 表3玉米对纹枯病抗性的评价标准 病情级别 抗 性 1 高度抗病Highlyresistant(高抗HR) 3 抗病Resistant(抗R) 5 中度抗病Moderatelyresistant（中抗MR） 7 感病Susceptible(感S) 9 高度感病Highlysusceptible(高感HS) 7.3重复鉴定 若鉴定材料初次鉴定时表现为高抗、抗、中抗，应在翌年进行重复鉴定。 7.4抗性评价 对初次鉴定结果和重复鉴定结果进行比较，以记载的最高病情级别为最终鉴定结果，并依此结果对 鉴定材料进行抗性评价。 鉴定结果汇总表格 玉米抗纹枯病鉴定结果整理后填入鉴定结果表格，见表4。 表 4 年玉米抗纹枯病鉴定结果表 编号 品种/种质名称 来 源 病情级别 病情指数 抗性评价 注1：鉴定地点 注2：接种病原菌菌株编号及来源 注3：接种日期 调查日期 鉴定技术负责人(签字)： NY/T 1248.9—2016 附录A （资料性附录） 玉米纹枯病病原菌 A.1病菌学名和形态描述 A.1.1.立枯丝核菌(无性态)/瓜亡革菌(有性态) 无性态学名：RhizoctoniasolaniKinh 异名：Rhizoctoniagrisea（J.A.Stev.）Matz Rhizoctonia napaeaeWestend.&Wallays 有性态学名：Thanatephoruscucumeris（Frank）Donk 异名：Hypochnus cucumerisA.B.Frank Thanatephorus sasakii (Shirai) C.C. Tu &Kimbr 立枯丝核菌无性态特征：菌丝幼嫩时细小无色，老熟后呈褐色，直径12μum14μm；菌核不定形，大 小差异明显，褐色至棕红色，表面粗糙。 A.1.2玉蜀黍丝核菌（无性态)/(有性态目前无对应中文名称） 无性态学名：RhizoctoniazeaeVoorhees 异名:Chrysorhiza zeae(Voorhees)T.F.Andersen &Stalpers Rhizoctonia oryzae Ryker &Gooch 有性态学名：WaiteacircinataWarcupetTalbot 异名：WaiteanudaClémencon 玉蜀黍丝核菌无性态特征：老熟菌丝红褐色；菌核小而多，红色，直径0.1mm~0.5mm。 A.1.3禾谷丝核菌（无性态)/禾谷角担菌（有性态） 无性态学名：RhizoctoniacerealisVanderHoeven 有性态学名：CeratobasidiumcerealeMurrayetBurpee 异名：Ceratorhizacerealis(E.P.Hoeven)R.T.Moore 禾谷丝核菌无性态特征：菌丝褐色，直径3μm～6um；菌核不规则形，浅褐色至深褐色，直径 0.2mm~3mm A.2丝核菌培养 A.2.1马铃薯葡萄糖琼脂培养基(Potatodextroseagarmedium,PDA) 马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂18g～20g，蒸馏水1000mL。分装在三角瓶中后121℃高压灭菌 20min后备用。PDA培养基用于丝核菌生长培养及菌种保存，培养温度为25℃，保存温度为4℃。 A.2.2麦粒培养基 麦粒(或其他谷物籽粒)浸泡至籽粒略涨，装入三角瓶中于121℃下灭菌1h，冷却后将在PDA上培 养的病菌接入瓶中，25℃下培养。 NY/T1248.9—2016 附录B (资料性附录） 玉米纹枯病抗性鉴定对照材料 B.1抗病鉴定对照材料 昌7-2，对纹枯病表现中抗（Moderatelyresistant，MR），选自昌单七号杂交种并改良。 B. 2 感病对照自交系 代，适宜在北方地区做感病对照材料。 南60-1，对纹枯病表现高感（Highlysusceptible，HS)，适宜在南方地区做感病对照材料。 5