ICS 11.100 YY C 44 中华人民共和国医药行业标准 YY/T1677—2019 维生素B12测定试剂盒（标记免疫分析法） Vitamin B2 testing kit(labelling immunoassay) 2019-10-23发布 2020-10-01实施 国家药品监督管理局 发布 YY/T1677—2019 前 言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由国家药品监督管理局提出。 本标准由全国医用临床检验实验室和体外诊断系统标准化技术委员会（SAC/TC136)归口。 本标准起草单位：北京市医疗器械检验所、奥森多医疗器械贸易（中国）有限公司。 本标准主要起草人：邹迎曙、施为红。 I YY/T1677—2019 维生素B12测定试剂盒（标记免疫分析法） 1范围 本标准规定了人维生素B12定量标记免疫分析试剂盒的要求、试验方法、标识、标签、使用说明书 包装、运输和贮存。 本标准适用于体外定量检测人血清或血浆中维生素B2的含量的免疫分析试剂盒。 本标准不适用于： a）用胶体金或其他方法标记的定性或半定量测定人维生素B12的试剂（如：试纸条、生物芯片等）； b）拟用于单独销售的维生素B12校准品和维生素B12质控品。 2规范性引用文件 2 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T191包装储运图示标志 GB/T21415体外诊断医疗器械 生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯 源性 GB/T29791.2 体外诊断医疗器械 制造商提供的信息（标示）第2部分：专业用体外诊断试剂 3要求 3.1外观 外观应符合如下要求： a）试剂盒各组分应齐全、完整，液体无渗漏； b）标识应清晰，易识别。 3.2 2溯源性 生产企业应根据GB/T21415及有关规定提供所用校准品的来源、赋值过程以及不确定度等内容。 3.3 3准确度 可选用以下方法之一进行验证（如适用，优先采用相对偏差的方法）： a） 相对偏差：使用可用于评价常规方法的有证参考物质（CRM)或其他公认的参考物质进行测 定，实测值与标示值的相对偏差应在土15%范围内； b）回收试验：回收率应在85%～115%范围内。 3.4检出限 检出限应≤145pg/mL。 3.5 5线性 线性范围应覆盖150pg/mL～1000pg/mL，在制造商所规定的线性范围内，相关系数r应≥0.990。 1 YY/T 1677—2019 3.6 重复性 利用同一批试剂盒对浓度≤250Pg/mL和400pg/mL～700pg/mL的样本各重复检测10次，其 变异系数应不大于10%。 3.7批间差 用3个批号试剂盒检测同一份样本，则3个批号试剂盒之间的批间变异系数CV≤15%。 3.8 3稳定性 可对效期稳定性和热稳定性进行验证： a） 效期稳定性：生产企业应规定试剂盒的有效期。取效期未的试剂盒检测其试剂准确度、检出 限、线性和重复性等，应符合3.33.6的要求 b) 热稳定性试验：取有效期内的试剂盒根据生产企业所声称的热稳定性条件，检测其试剂准确 度、检出限、线性和重复性等，应符合3.3～3.6的要求。 注1：热稳定性试验不能用于推导产品有效期，除非是采用基于大量的稳定性研究数据建立的推导公式。 注2：一般地，效期为1年时选择不超过1个月的产品，效期为半年时选择不超过半个月的产品，以此类推。但如超 过规定时间，产品符合要求时也可以接受 注3：根据产品特性可选择3.8a)、3.8b)方法的任意组合，但所选用方法宜能验证产品的稳定性，以保证在效期内产 品性能符合标准要求。 4试验方法 4.1外观 在自然光下以正常视力或矫正视力目视检查，应符合3.1的要求。 4.2 2溯源性 生产企业提供的溯源性资料应符合3.2的要求。 4.3 准确度 4.3.1总则 可采用相对偏差和回收试验之一测试试剂盒的准确度，应符合3.3的要求。 4.3.2相对偏差 根据生产企业提供的试剂盒线性区间，将能用于评价常规方法的有证参考物质作为样本，按照待测 试剂盒说明书的步骤进行检测，每个样品重复测定3次，测试结果记为（X，），按式（1）分别计算相对偏 差（B，），如果3次结果都符合3.3a)要求，即判为合格。如果大于或等于2次的结果不符合，即判为不合 格。如果有1次结果不符合要求，则应重新连续测试20次，并分别按照式（1)计算相对偏差，如果大于 或等于19次测试的结果符合3.3a)的要求，即判为合格，准确度符合3.3a)要求。 B,=(X,-T)/TX100% (1) 式中： B；一一相对偏差； X：测量浓度； 2 YY/T1677—2019 T—标定浓度。 4.3.3回收试验 将已知浓度的高水平待测物（A)加入到低浓度的血清（或其他体液成分)B中，所加待测物A与血 清（或其他体液成分)B之间的体积比为不大于1：9，各重复检测3次，取平均值，根据式（2）计算出回 收率，结果应符合3.3b)要求。 ×100% .*( 2) V.Xc. 式中： R 回收率； c 向B液中加人A液后的检测浓度的平均值； B液体积； V。—--A液体积； B液浓度的平均值； C s A液浓度。 4.4检出限 制造商应提供维生素B12试剂盒的空白限、检出限及参考区间等相关信息。根据制造商提供的信 息，对5份浓度近似检出限的低值样本进行检测，每份样本检测5次，对检测结果按大小进行排序，符合 如下条件，即可认为制造商提供的空白限和检出限的设置基本合理，结果应符合3.4要求 a）低于制造商提供的空白限数值的检测结果的数量应小于或等于3个； b）无高于制造商提供的参考区间下限的检测结果的数值。 4.5线性 用接近分析范围上限的高浓度样本，以一定比例稀释至分析范围下限附近，至少为5个浓度（X，） 样本。分别用维生素B12试剂盒测试，每个浓度至少重复测试3次，计算平均值。将结果平均值和稀释 比例用最小二乘法进行线性拟合，并计算线性相关系数r，结果应符合3.5的要求。 4.6重复性 利用同一批试剂盒对浓度≤250pg/mL和400pg/mL～700pg/mL的样本各重复检测10次，计 算10次测量浓度结果的平均值M和标准差SD，根据式（3)得出变异系数CV，结果应符合3.6的要求。 CV =SD/M × 100% .·(3) 式中： CV---变异系数; SD10次测量结果的标准差； M10次测量结果的平均值。 4.7批间差 用3个批号的试剂盒分别检测同一份浓度为400Pg/mL～700pg/mL样本，各重复10次，计算 30次测量浓度值结果的平均值M和标准差SD，根据式（4)得出变异系数CV，结果应符合3.7的要求。 CV =SD/M × 100% .·(4) 式中： CV 变异系数； 3 YY/T1677—2019 SD 30次测量结果的标准差； M 一一30次测量结果的平均值。 4.8 稳定性 4.8.1 效期稳定性 取失效期的试剂盒按照3.3～3.6的方法进行检测，应符合3.8a)的要求； 4.8.2热稳定性试验 取有效期内试剂盒根据生产企业所声称的热稳定性条件，按照3.3～3.6的方法进行检测，应符合 3.8b)的要求。 标识、标签和使用说明书 5 应符合GB/T29791.2的相关规定。 6 包装、运输和贮存 6.1 包装 包装储运图示标志应符合GB/T191的规定。包装容器应保证密封性良好，完整，无泄露，无破损。 6.2 2运输 试剂盒应按生产企业的要求运输。在运输过程中，应防潮，应防止重物堆压，避免阳光直射和雨雪 浸淋，防止与酸碱物质接触，防止内外包装破损， 6.3 3购存 试剂盒应在生产企业规定条件下保存。 4 YY/T1677—2019 参考文献 [1]GB/T 29791.1 体外诊断医疗器械制造商提供的信息（标示）第1部分：术语、定义和通 用要求（ISO18113-1) [2] GB/T3358.1—2009 统计学词汇及符号第1部分：一般统计术语与用于概率的术语 [3] YY/T0316—2016医疗器械 风险管理对医疗器械的应用 [4] YY0466.1—2009 医疗器械 用于医疗器械标签、标记和提供信息的符号 第1部分：通 用要求 [5] CLSIEP17-A,Protocols for Determination of Limits of Detection and Limits of Quantita tion; Approved Guideline L59