ICS 11.080.01 YY C 47 中华人民共和国医药行业标准 YY/T1623—2018 可重复使用医疗器械灭菌过程有效性的 试验方法 Test method of effectiveness of sterilization processes for reusable medical devices 2018-09-21发布 2019-09-26实施 国家药品监督管理局 发布 YY/T1623—2018 目 次 前言 II 引言 TV 1 范围 2 规范性引用文件 术语和定义 3 4 概述 5 试验器材 6 试剂 少骤 7 YY/T1623—2018 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起节 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的贡任。 本标准由国家药品监督管理局提山。 本标准山全国消毒技术与设备标准化技术委员会（SΛC/TC200）归： 本标准起草单位：广东省医疗器械质长监督检验所、杭州德诺科技有限公司、威海威高海盛医用设 备有限公司。 本标准主要起草人：黄鸿新、林受婷、周志龙、江为、梁泽鑫。 YY/T1623—2018 引言 本标准介绍了确定可重复使用医疗器械灭闲过程有效性的试验方法，该方法是·种实际操作的试 验方法。本标准适用丁按照器械制造商的说明进行清洗利火菌的可重复使用医疗器械。 本标准设定可重复使川医疗器械经清洗后无可见污垢，但仍可能有一定残留的生物负载。可使川 闲悬液模拟最难灭菌的牛物负载：市售的闲悬液可用于器械染闲。 相对丁可重复使用医疗器械上的白然菌，由丁细菌牙孢对测试火菌剂具有更强的抗力，因此作为试 验微生物。应确定所川细菌芽孢满足所要评价的特定灭菌过程和灭菌剂和应的抗力（D值)要求。 基十器械的复杂性、尺寸大小和相容性（用于长期培养）或长期浸泡所造成的不利因素，采用直接接 种法用丁无菌试验是不可行的。囚此，应使用洗脱、冲洗和棉拭子擦拭等技术回收已染菌器械的试验微 生物。 本试验方法的细菌芽孢染菌技术仪仪是器械尤菌试验方法中的 为·种川行方法。细菌芽孢条（牛 物指示物）是用丁火菌过程监测的一种传统工具，也适用丁医疗器械的火菌评价。 本标准的意义足证明已清洗的可重复使川医疗器械经特定灭菌过程后，其所有可接触表面和内部 管腔均可达到无菌水平。 N YY/T1623—2018 可重复使用医疗器械灭菌过程有效性的 试验方法 1范围 本标准规定了用于确定可重复使用医疗器械灭菌过程有效性的试验方法，本标准适用于对已建立 灭菌过程有效性的试验，不适川于灭菌过程的验证。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不川少的。凡是注几期的川用文件，仪注口期的版木适用于本文 件凡是不注口期的引川义件，其最新版本（包括所有的修改单)适川于本义件 GB/T6682分析实验室川水规格和试验方法 GB18281.2 医疗保健产品灭菌生物指示物 第2部分：环氧乙烧灭菌川生物指示物 GB18281.3 3医疗保健产品火菌 牛物指示物 第3部分：泥热火菌用牛物指示物 GB18281.4医疗保健产品灭菌 牛物指示物 第4部分：1热灭菌用牛物指示物 中华人民共和国药典（2015版）四部 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 生物负载 bioburden 一件产品和/或包装上或其中存活的微生物总数 3.2 菌落形成单位 colony forming unit;CFU 微牛物在固体培养基上牛长繁殖所形成的肉眼川见的集落 3.3 复inoculum 菌悬液 川丁染菌受试样品或器械的一定数量（通常川（FU来表示）和类型（基因和种群）的存活微生物 3.4 灭菌剂 sterilant 川杀灭 ·切微牛物（包括细菌细菌芽孢）使其达到灭菌要求的制剂， 3.5 无菌 Tsterile 无存活微生物。 3.6 回收菌量对照 recovery control 染菌和十燥术经灭菌处理的器械，对其每件的内部或表面进行回收得到的菌落形成单位（CFU) 1 YY/T 1623—2018 3.7 过程测试周期processtestcycle 使用制造商规定范围内的火菌参数的一个完整火菌周期。 3.8 可重复使用医疗器械 reusable medical devices 制造商声明处理后可次使川的医疗器械。 4概述 4.1本标准通过分析回收菌量对照利过程测试周期结果米确定火菌过程的效性。回收菌量对照应 大于或等于10°CFU/件。 4.2残留细菌芽孢通过洗脱液冲洗、擦拭或灌洗的方式进行回收。可迈过机械震荡、超声和洗脱液重 复冲洗等方法米提高回收率。 4.3样品经过·个完整的火菌过程处理后，应采用特定的洗脱技术收器械上的所有残留细菌芽孢。 4.4最少川5件器械进行一次过程测试周期，或一件器械最少进行连续5次过程测试周期，均通过， 则证明该火菌过程有效。 4.5从事该标准检测人员应备微牛物学或相关专业知识的教育背景。 4.6 5试验器材 应至少包括以下器材： a） 无菌棉拭子； b) 压力蒸汽火菌器； c) （48土2)℃的杭温水浴箱； d）（35±2)℃和（55±2)℃的细菌培养箱； e）0.45um孔径的一次性或叫重复使用的尤菌膜过滤器； 灭菌剂、医疗器械或灭菌器制造商指定的其他装臀或设备。 6试剂 6.1讠 试剂的纯度 所有试验应使川化学纯试剂：除非另有说明，应保证试验中所有的试剂符合和应现行国家标准的 规定。如使川其他纯度试剂，应确定试剂具有更高的纯度，保证使川时没有降低要求的准确度。 6.2 水的纯度 除非另有说明，试验用水都应符合GB/T6682中规定的三级水。 6.3培养基 6.3.1制备培养基和洗脱液.应使川GB/T6682中规定的一级水或者更高级别的水： 6.3.2无菌洗脱液。见《中华人民共和围药典》（2015版）四部中冲洗液的制备方法。 6.3.3胰酪大豆陈液体培养基。根据每个试验选择常用浓度或者双倍浓度，加入中和剂火菌（若需 要），并选择合适的体积。见《中华人民共和国药典》（2015版）四部中液体培养基的制备方法 2 YY/T1623—2018 6.3.4胰酪大豆陈琼培养基：根据每个试验选择常用浓度或者双倍浓度，加人中和剂灭；在（48工 2)℃的温度下使用。见《中华人民共利国药典》（2015版）四部中琼脂培养基的制备方法。 6.4试验微生物/菌悬液 汽灭菌抗力标准， 6.4.2环氧乙烷或T热火菌用标准菌悬液为：包含10°CFU/ml.的草细菌芽孢杆菌，达到GB18281.2 的环氧乙烷抗力标准或GB18281.1的十热灭菌抗力标准。 6.4.3若以上微生物对灭菌剂不适用，或以上灭菌方法不适用，需用其他微牛物，应提供证据和实验数 据证明该微生物的适用性。 6.4.4应确认细菌芽孢菌株的来源、生产、储存和保质期，符衍合国家的相关规定。 6.5中和剂 若使川中和剂，见《中华人民共和国药典》（2015版）四部1105非无菌产品微生物限度检查：微生物 计数法中中和剂的说明。 7 步骤 7.1选取所需评估器械。 7.2阅读每个所需评估器械的清洗说明，保证所有需要的配件齐全并可用。按照制造商的说明对器械 进行消洗、下燥。 7.3对器械进行染菌，染菌部位应包括器械最雄灭菌部位。染菌部位的数量应根据器械复杂程度而 用于识别和证明器最难灭菌部位的理山应形成文件。 7.4用于染菌、洗脱、对照试验、巾利、促生长（灵敏度检查）和过程测试周期的操作步骤，实验室应当进 行验证.制定标准操作规范。 7.5回收菌量对照的确定 7.5.1表而部位染菌 7.5.1.1微量移液器法 采用微量移液器直接将包含大于等于10°CFU菌忍液滴染到表面部位。花制造商规定了器械在 无菌过程前的干燥要求，则干燥染菌液。将器械浸泡在洗脱液巾或立即冲洗或用棉拭子擦拭染菌部位 后转至无菌试管或其他无菌容器中。振荡使其彻底混匀。做梯度稀释，吸取1mL适梯度的稀释液 至培养.而，将冷却至不超过45℃的熔化琼脂培养基，倾注于已川样液的平Ⅲ中，每平.Ⅲ15mL～20mlL： 待琼脂凝固后置适宜温度培养。培养181后进行菌落计数，并每大重复计数H到7d。通过选择适合 的培养血进行计数，确定每个稀释级别的平均微生物数量，然后使川稀释因了计算出染菌器械上的微生 物总数。得出所有重复试验数据的平均值： 7.5.1.2棉拭子法 将包含大于等于10CFU菌恐液菌恐液湿润一个尤菌棉拭了，擦拭选择的部位，芥制造商规定了 器械在无菌过程前的下燥要求，则下燥染菌液。应立即洗脱利擦染菌器械表而来进行微生物计数。 如7.5.1.1所述进行梯度稀释和倒平板进行微生物计数。得山所有重复试验数据的平均值。 7.5.2内部部位染菌 适当连接医疗器械制造商推存的消洗或冲洗的配件，将包含大于或等于10°CF菌悬液菌悬液灌 洗内腔或回障处进行染菌。若制造商规定了器械在无菌过程前的干燥要求，则干燥染菌液。用一个无 菌灌洗器械（如注射器、泵等），采川无菌操作技术，川一定量的洗脱液灌洗内腔或壁处洗脱器械上的