ICS 11.100 YY C 44 中华人民共和国医药行业标准 YY/T 1527—2017 α/β-地中海贫血基因分型检测试剂盒 a/β-Talassemia gene typing detection kit 2017-03-28 发布 2018-04-01实施 国家食品药品监督管理总局 发布 中华人民共和国医药 行业标准 α/β-地中海贫血基因分型检测试剂盒 YY/T1527—2017 * 中国标准出版社出版发行 北京市朝阳区和平里西街甲2号(100029) 北京市西城区三里河北街16号（100045) 网址www.spc.net.cn 总编室：(010)68533533 发行中心：(010)51780238 读者服务部：(010)68523946 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷 各地新华书店经销 * 开本 880X1230 1/16 印张0.5 5字数8千字 2017年10月第一版2017年10月第一次印刷 * 书号：155066·2-31915定价 16.00元 YY/T1527—2017 前 言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由国家食品药品监督管理总局提出。 本标准由全国医用临床检验实验室和体外诊断系统标准化技术委员会（SAC/TC136)归口 本标准起草单位：中国食品药品检定研究院、亚能生物技术（深圳)有限公司、中山大学达安基因股 份有限公司。 本标准主要起草人：王玉梅、刘晶晶、李尔华、刘艳、孙楠、高尚先 YY/T1527—2017 α/β-地中海贫血基因分型检测试剂盒 1范围 和组成、要求、试验方法、标识、标签和使用说明书、包装、运输和贮存。 本标准适用于检测外周全血样本及孕妇羊水样本的检测试剂盒，采用的技术方法有实时PCR荧光 法、PCR-反向点杂交法、荧光PCR熔解曲线法、基因芯片法、裂口PCR(gap-PCR)法等。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T191包装储运图示标志 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 地中海贫血talassemia 又称海洋性贫血。是一组遗传性小细胞低色素溶血性贫血，其共同特点是由于珠蛋白基因的缺陷 使血红蛋白中的珠蛋白肽链有一种或几种合成减少或不能合成，导致血红蛋白的组成成分改变，临床大 多表现为慢性进行性溶血性贫血。 4命名、分类和组成 4.1命名 α/β-地中海贫血基因分型检测试剂盒(方法学）。 4.2分类 可按如下方式分类： a）根据采用的方法学原理分为：PCR荧光探针法、PCR-反向点杂交法、荧光PCR熔解曲线法、基 因芯片法、裂口PCR(gap-PCR）法等。 b）根据类型分为：α-地中海贫血基因分型检测试剂盒、β-地中海贫血基因分型检测试剂盒。 4.3组成 提取组分，应由生产企业说明或指定提取试剂盒。 1 YY/T1527—2017 5要求 5.1外观 应符合制造商规定的外观要求。 5.2 准确性 以试剂盒检测范围内α/β-地中海贫血基因分型阳性国家参考品或标化的企业参考品检测，应均为 阳性，并符合其相应的基因型别。 5.3特异性 5.3.1以α/β-地中海贫血基因分型阴性国家参考品或标化的企业参考品检测，应均为阴性或为野 生型。 5.3.2以试剂盒检测范围内的α/β-地中海贫血基因分型阳性国家参考品或标化的企业参考品检测，型 别之间不得出现交叉；以试剂盒检测范围外α/β-地中海贫血基因分型阳性国家参考品或标化的企业参 考品检测，应均为阴性。 5.4检测限 检测不高于25ng或4000拷贝的地中海贫血基因分型国家参考品或标化的企业参考品，结果应均 为阳性，符合相应的基因型别。 5.5重复性 5.5.1荧光PCR法：应符合荧光PCR法C，值的变异系数(CV)不大于5.0%。 5.5.23 荧光PCR熔解曲线法、裂口PCR(gap-PCR)法：对同一份重复性参考品进行检测，结果应一致。 5.5.3膜杂交或基因芯片法：对同一份重复性参考品进行检测，膜条或芯片上各阵列位点均应显色，检 测结果应一致，且显色均一。 5.6核酸提取效率 对试剂盒所规定的最小量外周全血、胎儿羊水细胞或模拟液进行提取，核酸浓度应不小于10ng/μL。 注：无法测定最终核酸量的，只能用地中海贫血阳性样本进行检测，结果应均为阳性，符合相应的基因型别。 5.7稳定性 生产企业应规定产品的有效期。取到效期后一定时间内的产品检测试剂的准确性、特异性、检测 限、重复性、核酸提取效率，结果应符合5.2、5.3、5.4、5.5、5.6的要求。 6试验方法 6.1外观 在自然光下以正常视力或矫正视力目视检查，结果应符合5.1的要求。 6.2准确性 以试剂盒检测范围内阳性国家参考品或标化的企业参考品检测，结果应符合5.2的要求。 2 YY/T1527—2017 6.3特异性 6.3.1以α/β-地中海贫血基因分型阴性参考品检测，结果应符合5.3的要求。 6.3.2对于α或β地中海贫血基因，每个型别的反应液需检测该型别之外的本试剂盒范围内的阳性参 考品（尤其多管的荧光检测）；α-地中海贫血基因分型试剂盒选用常见5种β-地中海贫血基因型进行检 测；β-地中海贫血基因分型试剂盒选用常见3种α-地中海贫血基因型进行检测，结果应符合5.3的要求。 6.4检测限 检测不高于25ng或4000拷贝的α/β-地中海贫血基因分型国家参考品或标化的企业参考品，结果 应符合5.4的要求。 6.5重复性 同一批试剂盒平行检测同一份重复性参考品，每个样品测试：荧光法不少于10次；裂口PCR（gap PCR)法、膜杂交或基因芯片法不少于5次，结果应符合5.5的要求。 注：重复性样品：α-非缺失型地中海贫血基因型不少于2个;α缺失型地中海贫血基因型不少于3个；β地中海贫血 基因型不少于5个。 6.6核酸提取效率 对至少4份试剂盒所规定的最小量外周全血、胎儿羊水细胞或模拟液进行提取，每个样品进行2个 重复检测，结果应符合5.6的要求。 注：多型别的试剂盒选择常见的不同的基因型。 6.7稳定性 取到效期后一定时间内的产品进行5.2、5.3、5.4、5.5、5.6的检测，结果应符合5.7的要求。 7标识、标签和使用说明书 应符合GB/T29791.2的要求。 8包装、运输和贮存 8.1包装 包装储运图示标志应符合GB/T191的要求。包装容器应保证密封性良好、完整，无泄露，无破损。 8.2运输 试剂盒应按制造商的要求运输。在运输过程中，应防潮，应防止重物堆压，避免阳光直射和雨雪浸 淋，防止与酸碱物质接触，防止内外包装破损。 8.3贮存 试剂盒应在生产企业规定条件下保存。