ICS 11.100 YY C 44 中华人民共和国医药行业标准 YY/T1524—2017 α-L-岩藻糖苷酶（AFU)测定试剂盒 (CNPF底物法） α-L-Fucosidase (AFU) assay kit(CNPF substrate method) 2017-03-28发布 2018-04-01实施 国家食品药品监督管理总局 发布 YY/T1524—2017 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由国家食品药品监督管理总局提出 本标准由全国医用临床检验实验室和体外诊断系统标准化技术委员会（SAC/TC136)归口。 本标准起草单位：北京市医疗器械检验所、上海科华生物工程股份有限公司、山东博科生物产业有 限公司、深圳康美生物科技股份有限公司、武汉市长立生物技术有限责任公司。 本标准主要起草人：毕春雷、肖禄生、谭柏清、丁亚平、杨忠、肖翔。 I YY/T1524—2017 α-L-岩藻糖苷酶（AFU）测定试剂盒 （CNPF底物法） 1范围 本标准规定了α-L-岩藻糖苷酶测定试剂盒的要求、试验方法、标签和使用说明书、包装、运输和 贮存。 本标准适用于CNPF(2-氯-4-硝基苯基-α-L-岩藻吡喃糖苷)底物法对人血清或血浆中的α-L-岩藻糖 试剂。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T29791.2体外诊断医疗器械制造商提供的信息（标示）第2部分：专业用体外诊断试剂 3要求 3.1外观 试剂盒外观应符合： a）试剂盒各组分应齐全、完整，液体无渗漏； b) 包装标签文字符号应清晰。 3.2 2装量 应不少于标示值。 3.3试剂空白 3.3.1试剂空白吸光度 用空白样本加入试剂测试时，在试剂盒说明书规定的测量波长（光径1cm)试剂空白吸光度应不大 于0.3。 3.3.2试剂空白吸光度变化率 用空白样本加人试剂测试时，试剂空白吸光度变化率（△A/min)应不超过0.002。 3.4分析灵敏度 测定30U/L样本时，吸光度变化率（△A/min)应不小于0.005。 3.5 5线性 试剂盒线性区间应覆盖[5，150］U/L，该区间内应符合： 1 YY/T1524—2017 a）线性相关系数（r）应不小于0.990； b）[5，50］U/L区间内，线性偏差应不超过±5U/L；（50，150］U/L区间内，线性偏差应不超过 ±10%。 3.6 精密度 3.6.1重复性 重复测试（45士15)U/L的样本，所得结果的变异系数（CV，%）应不大于5%。 3.6.2批间差 测试（45士15)U/L的样本，所得结果的批间相对极差（R）应不大于10%。 3.7 准确度 可选用以下方法之一进行验证： a）相对偏差：测试参考物质或有证参考物质，相对偏差应不超过土15%； b）企业参考品测试：对具有溯源性的企业参考品进行检测，其测量结果的相对偏差应不超过 ±10%; 比对试验：以制造商指定的具有溯源性的分析系统作比对，相关系数（r）不小于0.975，斜率应 c） 在[0.9，1.1]内；样本浓度≤50U/L时，偏差应不大于5U/L；样本浓度>50U/L时，相对偏差 应不大于15%；95%检测样本应符合上述要求 3.8 3稳定性 3.8.1总则 可对效期稳定性和热稳定性进行验证。 3.8.2效期稳定性 生产企业应规定产品的有效期。取到效期后一定时间内的产品检测试剂空白吸光度、分析灵敏度、 线性、重复性、准确度应符合3.3、3.4、3.5、3.6.1、3.7的要求。 3.8.3热稳定性试验 检测试剂空白吸光度、分析灵敏度、线性、重复性、准确度应符合3.3、3.4、3.5、3.6.1、3.7的要求。 注1：热稳定性不能用于推导产品有效期，除非是采用基于大量的稳定性研究数据建立的推导公式。 注2：一般地，效期为1年时选择不超过1个月的产品，效期为半年时选择不超过半个月的产品，以此类推。但如超 过规定时间，产品符合要求时也可以接受 注3：根据产品特性可选择3.8.2、3.8.3方法的任意组合，但所选用方法宜能验证产品的稳定性，以保证在效期内产 品性能符合标准要求。 4试验方法 4.11 仪器基本要求 分光光度计或生化分析仪，波长范围应满足试剂使用需要，生化分析仪应带恒温装置（温度值在设 定值的士0.3℃内，波动度不大于士0.2℃），吸光度测量分辨力在0.001以上 2 YY/T1524—2017 4.2外观 在自然光下以正常视力或矫正视力目视检查，应符合3.1的要求。 4.3装量 用通用量具测量，应符合3.2的要求。 4.4i 试剂空白 4.4.1试剂空白吸光度 用试剂盒测试空白样本，记录试剂盒参数规定读数点主波长下的吸光度值（A），应符合3.3.1的 要求。 4.4.2试剂空白吸光度变化率 用试剂盒测试空白样本，记录试剂盒参数规定读数点的吸光度值（A），计算吸光度变化率（△A/ min），应符合3.3.2的要求。 注：空白样本可以是纯水样本、生理盐水、零校准液等， 4.5 5分析灵敏度 用试剂盒测试α-L-岩藻糖苷酶已知浓度在（30士10)U/L的样品，记录在试剂盒参数规定读数点下 的吸光度值（A），换算为30U/L样品的吸光度变化率（△A/min），应符合3.4的要求。 4.6线性 4.6.1用接近线性区间下限的低浓度样本稀释接近线性区间上限的高浓度样本，混合成至少5个稀释 浓度（3：）。用试剂盒分别测试以上样本，每个稀释浓度测试3次，分别求出每个稀释浓度检测结果的均 值（y：）。以稀释浓度（{；)为自变量，以检测结果均值（y:)为因变量求出线性回归方程。计算线性回归 的相关系数（r），应符合3.5a)的要求 4.6.2用4.6.1方法中稀释浓度（：）代人线性回归方程，计算3：测试均值与相应估计值的相对偏差或 绝对偏差，应符合3.5b)的要求。 4.7精密度 4.7.1重复性 在重复性条件下，用试剂盒测试浓度在（45土15)U/L范围内的人血清或控制物质，重复测试10次，计 算测量值的平均值（r）和标准差（s）。按式（1)计算变异系数（CV)应符合3.6.1的要求。 CV==×100% (1) x 式中： CV——变异系数; 标准差； r ——测量值的平均值。 4.7.2批间差 分别用3个不同批号的试剂盒测试浓度在（45土15)U/L范围内的人血清或控制物质，每个批号测 3 YY/T1524—2017 试3次，分别计算每批3次检测的均值α；（i=1,2,3），按式（2）、式（3)计算相对极差（R）应符合3.6.2的 要求。 +2+3 .(2) 3 ×100% .(3) rT 式中： X max r：中的最大值； Xmin t：中的最小值。 4.8准确度 4.8.1总则 可采用相对偏差、企业参考品测试或比对试验三种方法之一测试试剂盒的准确度，应符合3.7的要 求；如适用，优先采用相对偏差的方法。 4.8.2相对偏差 试剂盒测试可用于评价常规方法的有证参考物质（CRM)或其他公认的参考物质3次，测试结果记 为（X，），按式（4)分别计算相对偏差（B），如果3次结果都符合3.7a)要求，即判为合格。如果大于或等 于2次的结果不符合，即判为不合格。如果有1次结果不符合要求，则应重新连续测试20次，并分别按 式（4)计算相对偏差，如果大于或等于19次测试的结果符合3.7a)的要求，则准确度符合3.7a)的要求。 X, -T ×100% ....(4) T 式中： B; 相对偏差； X：—测量浓度； T一一参考物质标定浓度。 4.8.3企业参考品测试 由制造商提供企业参考品，按照常规样本进行检测，每份样本测定3次，计算测试结果均值，应符合 3.7b)的要求。 4.8.4比对试验 用不少于40个覆盖检测浓度范围内不同浓度的人源样品，以生产企业指定具有溯源性的分析系统 进行比对试验。每份样本按待测试剂盒及选定分析系统的要求分别进行检测，每个样本测定1遍，用线 性回归方法对两组结果分别进行线性拟合，得到线性回归方程的相关系数（r）和斜率，计算各个样本的 待测试剂盒测定值与对照系统测定值的绝对偏差或相对偏差，应符合3.7c)的要求。 4.9稳定性 4.9.1效期稳定性 取到效期后的样品按照4.4、4.5、4.6、4.7.1、4.8的方法进行检测，应符合3.8.2的要求。 4.9.2热稳定性试验 取有效期内样品根据生产企业声称的热稳定性条件，按照4.4、4.5、4.6、4.7.1、4.8的方法进行检测， 4 YY/T1524—2017 应符合3.8.3的要求。 标签和使用说明书 5 应符合GB/T29791.2的要求。 6 包装、运输和贮存 6.1 包装 包装应符合以下要求： a) 试剂盒的包装应能保证免受自然和机械性损坏； b） 如适用，包装内应附有使用说明书及产品检验合格证。 6.2 运输 按照合同规定的条件进行运输。 6.3 3贮存 按照规定的条件进行贮存。 L59