ICS_11.140 YY 48 中华人民共和国医药行业标准 YY/T1497—2016 医用防护口罩材料病毒过滤效率评价测试 方法 Phi-X174噬菌体测试方法 Evaluationtest methodfortheviralfiltrationefficiency(VFE)of medical protectivefacemaskmaterialsTestmethodusingPhi-X174bacteriophage 2016-07-29发布 2017-06-01实施 发布 国家食品药品监督管理总局 YY/T14972016 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由国家食品药品监督管理总局提出。 本标准由国家食品药品监督管理局北京医疗器械质量监督检验中心归口。 本标准起草单位：北京市医疗器械检验所、青岛众瑞智能仪器有限公司。 本标准主要起草人：刘思敏、金国胜、李成志、潘四春。 I YY/T1497-2016 医用防护口罩材料病毒过滤效率评价测试 方法Phi-X174噬菌体测试方法 1范围 本标准规定了用Phi-X174噬菌体悬浮液为替代微生物，对医用防护口罩或口罩材料进行病毒过滤 效率的测试方法。 本标准适用于有病毒过滤效率评价要求的医用防护口罩或口罩材料。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682—2008 分析实验室用水规格和试验方法 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 病毒virus 无独立的代谢系统，只能在活的宿主细胞内复制的具有感染性的微小生物。 3.2 噬菌体bacteriophage 能感染细菌的一种病毒。 注：本试验方法中，噬菌体即指Phi-X174。Phi-X174对人类不是致病病毒，但可用于模拟对人类有致病性的病毒。 3.3 溶解lysis 整个细菌细胞裂解或破坏。 注：本试验方法中，大肠杆菌作为宿主细胞因Phi-X174侵人而引起溶解。 3.4 噬菌斑plaque （病毒学）理论上由单个活病毒感染、溶解宿主细胞而形成的清晰可见区域。 注：本试验方法中，噬菌斑即指琼脂层上E.coliC的菌落中的清晰可见区域，理论上是单个存活的Phi-X174感染 和溶解细菌的结果。 3.5 空斑形成单位 plaque-formingunit PFU 通过感染和溶解琼脂上层的细菌而产生噬菌斑的病毒粒子。 3.6 替代微生物 surrogatemicrobe 用于模拟致病性微生物的模式微生物。 1 YY/T1497—2016 注：本试验方法中，替代微生物即指噬菌体Phi-X174。 3.7 病毒过滤效率 viral filtration efficiency VFE 在规定流量下，测试样品对病毒悬浮粒子滤除的百分数。 4测试方法 4.1测试原理 使带有一定病毒浓度的气溶胶，以一定流速穿过样品，通过测定穿透样品前、后气溶胶中的病毒数 量，计算该样品对病毒的过滤效率。 4.2仪器和实验试剂 4.2.1采样器 AGI-30液体冲击式采样器（每通道2个采样器），能承受最大12.5L/min流量冲击。 4.2.2病毒过滤效率测试设备 病毒过滤效率测试设备（见图1）：采用芝加哥式原理的气溶胶发生器制备测试用病毒气溶胶。根 据喷雾器情况，调试气溶胶产生速率（一般6L/min～8L/min），使所产生气溶胶的平均颗粒直径 直撞击水平放置的样品，样品采样区为圆形，直径为（8.3士0.1)cm，测试医用防护口罩用拱形网支撑，测 试口罩材料用平面网支撑（见图2）。气溶胶通过样品后即进人2个AGI-30液体冲击式采样器（4.2.1）。 每个采样器用20mL无菌蛋白陈水收集穿过样品的病毒颗粒。液体冲击式采样器的出口通过单独的 管道与气体流量表相连接来控制气体流速。经过气泵抽吸，气体以25L/min的速度进入整个测试系 统。在实验开始前，所有能与病毒气溶胶接触的系统部件均应经121℃压力蒸汽灭菌20min。测试设 备可采用符合本标准规定的等效设备，采用单通道或双通道均可实施检验。 ? ? 说明： ①——气溶胶发生器； ②一样品； ③—液体冲击式采样器； ④流量表； ?气泵。 图1测试设备原理 2 YY/T1497—2016 4.2.3其他设备 4.2.3.1 气源：能提供至少50kPa的气压。 4.2.3.2 培养箱：能保持温度在（36士1)℃。 4.2.3.3 水浴锅：能获得（45士2)℃的温度。 4.2.3.4 涡流混匀器。 4.2.3.5 冰箱：能维持温度在（5士3)℃。 4.2.3.6 压力蒸汽灭菌器：能维持温度在（121土1)℃。 4.2.3.7 计时器，准确度至少为1s。 4.2.3.8 振荡器。 4.2.3.9 pH计，精度至少为0.1pH单位。 4.2.3.10 接种环。 4.2.3.11 分光光度计：能在640nm处测量吸光度。 4.2.3.12 离心机：能提供10000r/min的转速。 4.2.3.13 0.45μm过滤膜。 单位为毫米 R40 $85 图2拱形、平面形支撑网 4.2.4实验试剂 4.2.4.1 噬菌体营养肉汤（Phi-X174)配方如下： 8 g 胰蛋白陈 5 g 氯化钾 0.2 g 氯化钙 加水至1000mL 121℃压力蒸汽灭菌20min后，pH值为7.3士0.2。 4.2.4.2 下层琼脂配方如下：