ICS 11.100 YY C 44 中华人民共和国医药行业标准 YY/T 1459—2016 人类基因原位杂交检测试剂盒 Human gene in situ hybridization detection kit 2016-01-26发布 2017-01-01实施 国家食品药品监督管理总局 发布 YY/T1459—2016 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由国家食品药品监督管理总局提出。 本标准由全国医用临床检验实验室和体外诊断系统标准化技术委员会（SAC/TC136)归口。 本标准由中国食品药品检定研究院负责起草。 本标准主要起草人：刘艳、王玉梅、黄杰、孙楠、高尚先 YY/T1459—2016 人类基因原位杂交检测试剂盒 1范围 本标准规定了人类基因原位杂交检测试剂盒标准的要求、检验方法、使用说明、标志、标签以及包 装、运输、贮存。 本标准适用于进行人类基因扩增、重组、缺失等检测的原位杂交检测试剂盒，一般包括荧光原位杂 交试剂盒和显色原位杂交试剂盒。 本标准不适用于： a）进行非人类基因（如病毒、细菌等）检测的原位杂交检测试剂盒； b）与其他检测方法（如PCR、流式细胞术等)结合使用杂交检测试剂盒。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T191包装储运图示标志 YY/T0466.1医疗器械用于医疗器械标签、标记和提供信息的符号第1部分：通用要求 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 原位杂交法insituhybridization，ISH 根据碱基互补配对的原则，在与目标DNA配对的核酸片断（探针）上标记染料，该探针与待检材料 中相应的核酸片断在一定条件下特异结合（杂交），形成双链核酸，借助于显微镜观察并记录形成杂交双 链的类型、数量，从而判断待检样本中目标DNA正常与否的检测方法。 4要求 4.1外观 生产企业应根据自已产品的包装特点规定适当的外观要求。一般应有试剂盒各组分组成、性状；内 外包装、标签等的要求。 4.2信号强度 探针在与外周血（或其培养液)淋巴细胞制成的对照片或阳性组织切片杂交后，在显微镜下，均应发 出可被肉眼识别的信号。 4.3探针质量判断 荧光原位杂交试剂盒在外周血（或其培养液）淋巴细胞制成的对照片处于中期分裂相的细胞上进 1 YY/T1459—2016 行；显色原位杂交试剂盒在细胞质控片上进行。 4.3.1荧光原位杂交试剂盒探针敏感性 4.3.2荧光原位杂交试剂盒探针特异性 分析50个处于中期分裂相的细胞的100条染色体，至少有95条染色体只在相应的区域显示特定 的目的信号。 4.3.3显色原位杂交试剂盒探针质量判断 注：当存在分级时，应在有分级的细胞质控片上进行。 4.4探针有效性判断 在临床样本制片上进行，阳性参考片应至少满足基因异常的普遍情况。 4.4.1阳性符合率 注：制造商可根据各自产品特点，建立合理、有效的异常结果判断标准。 4.4.2阴性符合率 检测至少5例阴性临床样本制片，其结果应符合正常结果（阴性)判断标准，应均为阴性。 注：制造商可根据各自产品特点，建立合理、有效的正常结果判断标准。 4.5稳定性 4.5.1总则 可对效期稳定性和热稳定性进行验证。 4.5.2效期稳定性 生产企业应规定产品的有效期。取到效期后一定时间内的产品，检测外观、信号强度、探针质量判 断、探针有效性判断，检验结果应符合4.1、4.2、4.3和4.4的要求。 4.5.3热稳定性 试剂盒置37℃条件下放置一定时间，检测外观、信号强度、探针质量判断、探针有效性判断，检验结 果应符合4.1、4.2、4.3和4.4规定。 注1：热稳定性不能用于推导产品有效期，除非是采用基于大量的稳定性研究数据建立的推导公式。 注2：一般地，效期为1年时选择不超过1个月的产品，效期为半年时选择不超过半个月的产品，以此类推。但如超 过规定时间，产品符合要求时也可以接受。 注3：根据产品特性可选择4.5.2、4.5.3方法的任意组合，但所选用方法宜能验证产品的稳定性，以保证在效期内产 品性能符合标准要求。 2 YY/T1459--2016 5试验方法 5.1外观 在自然光下以正常视力或矫正视力目视检查，应符合4.1的要求。 5.2荧光信号强度 探针在与外周血（或其培养液）淋巴细胞制成的对照片或阳性组织切片杂交后，在显微镜下观察，应 符合4.2的要求。 5.3探针质量判断 5.3.1荧光原位杂交试剂盒探针敏感性 相细胞，结果应符合4.3.1的要求。 5.3.2荧光原位杂交试剂盒探针特异性 相细胞，结果应符合4.3.2的要求。 5.3.3显色原位杂交试剂盒探针质量判断 探针与不同的细胞质控片杂交并显色，在显微镜下观察，结果应符合4.3.3的要求。 5.4探针有效性判断 5.4.1阳性符合率 探针与阳性临床样本制片杂交后，镜下观察，应符合4.4.1的要求。 5.4.2阴性符合率 探针与阴性临床样本制片杂交后，镜下观察，应符合4.4.2的要求。 5.5 5稳定性 试剂盒按照4.5规定的条件保存后，检验4.1、4.2、4.3和4.4项，结果应符合4.5的相应要求。 6标识、标签、使用说明书 6.1试剂（盒）外包装标识、标签 所使用的符号应满足YY/T0466.1的要求，至少应包含如下内容： a）产品名称及包装规格； b）生产企业或售后服务单位的名称、地址、联系方式； c) 医疗器械注册证书编号； d）产品标准编号； 3