ICS 11.040.01 YY 30 中华人民共和国医药行业标准 YY/T1292.4—2017 医疗器械生殖和发育毒性试验 第4部分：两代生殖毒性试验 Test for reproductive and developmental toxicity of medical devices- Part 4:Two-generation reproductive toxicity test 2017-02-28发布 2018-01-01实施 国家食品药品监督管理总局 发布 YY/T1292.4—2017 前言 YY/T1292《医疗器械生殖和发育毒性试验》分为四个部分： 一第1部分：筛选试验； 第2部分：胚胎发育毒性试验； 一第3部分：一代生殖毒性试验； 一第4部分：两代生殖毒性试验。 本部分为YY/T1292的第4部分。 有关其他方面的医疗器械生殖和发育毒性试验将有其他部分的标准。 本部分按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 YY/T1292本部分是在参考了OECD416一2001《两代生殖毒性试验》并结合医疗器械/材料自身 特点的基础上制定的。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任 本部分由国家食品药品监督管理总局提出 本部分由全国医疗器械生物学评价标准化技术委员会（SAC/TC248)归口。 本部分起草单位：山东省医疗器械产品质量检验中心、深圳市医疗器械检测中心。 本部分起草人：乔春霞、朱福余、曹苹、徐炜区。 I YY/T1292.4—2017 引言 GB/T16886.3中给出的检测潜在生殖和发育毒性物质的试验方法均为经济合作与发展组织 (OECD)《化学品测试指南》中规定的方法，但这些方法是针对化学品的特性制定而成，同时未给出详细 法的基本原则，并根据医疗器械/材料的特性对试验方法进行了适当的修改，规定了详细的试验步骤，可 作为GB/T16886.3中生殖和发育毒性试验中的一项方法标准。 医疗器械/材料的生殖和发育毒性潜能对人类健康有十分重要的影响。特别是针对可吸收性医疗 器械或含可沥滤物的医疗器械。GB/T16886.3中推荐下列医疗器械/材料，在缺乏排除生殖和发育毒 性风险证据的情况下，需考虑进行生殖和发育毒性试验。 胶乳房植人物）； b）储能医疗器械。 如性腺功能、发情周期、交配行为、受孕、妊娠、分娩、哺乳、断奶以及子代的生长发育情况等，也可提供新 生仔疾病、死亡、出生前后发育毒性等方面的初步资料，为下一步的毒性试验提供参考。除研究F1子 代的生长发育外，本部分也可对F2子代的生长发育以及F2子代的雌性和雄性生殖系统进行系统评 价。为进一步全面获得发育毒性和功能缺陷方面的资料，有时可能需要附加进行一些发育毒性和/或发 育神经毒性试验或在其他试验中研究这些终点。 由于受到试验样品制备以及试验方法确认等方面局限性的影响，在确定进行本部分试验之前，应充 分考虑GB/T16886.1和GB/T16886.18的要求。应在评价医疗器械使用中引发两代生殖毒性风险的 基础上，对进行试验的决定予以论证 者医疗器械浸提液中鉴别出的所有成分均无两代生殖毒性时，对医疗器械进行可接受的生物学风险评 估后，如两代生殖毒性的风险已被排除，则无需再进行试验， YY/T1292.4—2017 医疗器械生殖和发育毒性试验 第4部分：两代生殖毒性试验 1范围 YY/T1292的本部分给出了医疗器械/材料两代生殖毒性试验方法。 本部分适用于医疗器械/材料两代生殖和发育毒性评价。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 2011,ISO10993-1:2009,IDT) GB/T16886.2 医疗器械生物学评价第2部分：动物福利要求（GB/T16886.2一2011， ISO10993-2:2006,IDT) 2008,ISO10993-3:2003,IDT) GB/T16886.12 医疗器械生物学评价 第12部分：样品制备与参照样品（GB/T16886.12- 2005,ISO10993-12:2002,IDT) 3术语和定义 4主要设备 实验室常用设备、生物显微镜、体视显微镜、游标卡尺、动物精子分析仪（可选）、病理检查仪器。 5试验原理 将不同组的试验动物给予特定剂量的试验样品。如器械预期应用于男性，为了得出该试验样品对 精子形成的副作用，雄性宜在生长期给予试验样品并至少包括一个完整的精子形成周期（小鼠大约 56d，大鼠大约70d)。为了得出该试验样品对发情周期的副作用，亲代雌性给予试验样品时间宜至少 包括几个完整的发情周期，然后将动物合笼。合笼期间两种性别的动物都给予试验样品，在妊娠期和哺 乳期只给予雌性动物。子代F1断乳后继续给予试验样品，并从子代F1的生长期、成熟期、交配后、子 代F2出生至F2断乳。 6实验动物 6.1总则 所有的动物试验应在经国家认可机构批准并符合实验室动物福利全部适用法规的实验室内进行， 1 YY/T1292.4—2017 并且还应符合GB/T16886.2的要求。 6.2动物选择 6.2.1种属的选择 本部分推荐使用健康、性成熟大鼠。如果使用了其他种属，宜进行适当的论证。不宜使用低繁育率 或众所周知的发育缺陷率高的种属。宜使用未经试验的健康动物并记录下试验动物的种属、品系、性 别、体重和周龄。试验开始前，应尽可能降低试验动物间的体重差异使之不超过相同性别平均体重 的20%。 6.2.2数量和性别 每一试验组和对照组宜包含足够数量的动物以得到大约20只左右的妊娠动物。对于高剂量组毒 性过大或导致不育的物质，这种要求可能不适用。只有足够数量孕鼠才能对生育力、受孕、母鼠的行为、 哺乳以及子代F1从胎儿至成熟期的生长发育、子代F2出生到断乳可能产生的潜在影响作出有价值的 评价。 6.2.3饲养条件 试验动物的饲养环境温度宜为20℃～26℃，相对湿度为40%～70%。当采用人工照明时，宜按照 12h照明和12h黑暗进行循环。动物可使用适宜的饲料饲养，不限制饮水。妊娠雌性宜单笼饲养并提 供舒适的垫料。 6.2.4动物准备 试验前宜适应环境至少5d。试验之前应明确所用动物的亲属关系以避免发生同胞交配。宜将动 物随机分为对照组和试验组（推荐按体重进行随机分组）。每个动物应有单独唯一的标记。亲代（P)动 物应在开始试验前标记，子代F1则在动物断乳并选择用于交配前标记。所有被选的子代F1动物，要 记录和保存其窝别来源的信息。当仔鼠需要称重或进行某项检查时，出生后应尽可能早地标记， 7样品制备 7.1 根据GB/T16886.12的原则，制备试验样品。只要可能，医疗器械都应在“备用”状态下进行试验 7.2对于储能医疗器械，应以动物全身接触为宜，使用剂量应为与人体生殖器官接触所预期剂量的 倍数。 8试验步骤 8.1总则 宜参考现有的毒理数据以及关于试验样品或相关物质的毒代动力学方面的所有信息来选择相应的 剂量范围以免造成过度的母体毒性反应。这些信息也可有助于确定剂量的频次。 8.2最大剂量的确定 以最大耐受剂量或动物模型的生理限量作为动物接触的最大剂量，该剂量应为估计的人体最大接 触剂量（以克每干克或平方厘来每干克表示)的倍数。 注：与典型的化学物生殖和发育毒性试验不同，多数材料可能得不出明显的剂量-效应关系，对于这些材料，可以考 虑采用接触的最大剂量试验来判定是否存在毒性危害，但宜对试验所采用的剂量范围提供相应的支持性数据。 2 YY/T1292.4—2017 8.3剂量水平的选择 若认为试验样品可能对试验动物产生两代生殖毒性时，宜使用至少三个试验组和一个对照组。除 非受到理化特性和生物效应的限制，所选的最高剂量应引起毒性但不导致亲代动物死亡和承受严重痛 苦。试验中，如果出现死亡，亲代（P)动物的死亡率应控制在10%以下。另两组应设计递减的剂量水 平，能显示出任何与样品处理有关的作用和无可观察到不良反应水平（NOAEL）。递减组间距通常选 择2倍～4倍，如果要设置第4个剂量组，该剂量组的组距则可以很大（如超过10倍）。如试验样品使 用了介质，需设介质对照组。对照组除不给予试验样品外，应与试验组动物处理方式相同。 8.4试验进程 亲代雄性、雌性应从5周龄～9周龄时开始每日给予试验样品。子代F1雌、雄鼠则从断乳后开始 每日给予试验样品。对于亲代和子代F1的雌、雄鼠，样品给予应至少包括交配前10周和交配期2周。 怀孕期直到子代F1断乳。宜根据每只动物的体重来确定各自的剂量，但对妊娠后三分之一时间的剂 量调整宜谨慎。 亲代和子代F1雌、雄鼠应给予试验样品至试验结束。当不再需 子代子鼠。 其全部人道处死。人道处死断乳后没有用来交配的F1子代和所有 8.5 动物交配 8.5.1亲代交配 每次交配时，雌鼠应始终与同剂量组但不是同窝的 大只雄鼠合笼直至受孕或最长2周。每日早晨 组的已经证明交配成功的其他雄鼠与雌冒 亲交配。 8.5.2子代F1交配 子代F1交配时，在断乳时从同 一窝里至少挑出雌、雄鼠各1只并和同剂量但不同窝的其他动物进 行交配以繁殖出子代F2。如各窝间的动物在体重和外表上没有显著性差异，则按随机原则从每窝里选 出动物进行交配。如有显著性差异，则从每窝里选出最具其代表性的动物。F1代只有性成熟后，才能开 始进行交配。未受孕的动物宜明确未受孕的原因。包括可分别与已证实有生育能力的动物再进行一次 交配、对生殖器官的组织病理学检查、发情周期和生精机能的检查 8.5.3二次交配 当首