ICS 11. 100 YY C 44 中华人民共和国医药行业标准 YY/T1201—2013 尿素测定试剂盒（酶偶联监测法） Urea assay kit (Enzyme coupling kinetic method) 2013-10-21发布 2014-10-01实施 国家食品药品监督管理总局 发布 B YY/T1201—2013 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 请注意本标准的某些内容可能涉及专利。本标准的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由国家食品药品监督管理总局提出。 本标准由全国医用临床检验实验室和体外诊断系统标准化技术委员会（SAC/TC136)归口。 本标准主要起草单位：中国食品药品检定研究院。 本标准主要起草人：王玉梅、黄宝斌、刘艳、高尚先。 YY/T1201—2013 尿素测定试剂盒（酶偶联监测法） 1范围 本标准规定了尿素测定试剂盒（酶偶联监测法）的测定原理、要求、试验方法、标识、标签和使用说明 书、包装、运输和贮存。 本标准适用于尿素测定试剂盒（酶偶联监测法）的质量控制。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T191包装储运图示标志 3测定原理 尿素在尿素酶作用下水解为NH,+和CO2，NH,+、NADH和α-酮戊二酸在谷氨酸脱氢酶作用下 生成CO2、谷氨酸和NAD+。由于NADH被氧化成NAD+，在340nm吸光度降低，其吸光度降低值与 尿素浓度成正比。 4要求 4.1外观 符合制造商规定的正常外观要求。 4.2装量 液体试剂的净含量应不少于标示量。 4.3试剂空白 4.3.1i 试剂空白吸光度 应不小于1.0（波长340nm、光径1.0cm）。 4.3.2 2试剂空白吸光度变化率 应不大于0.04/min。 4.4 线性范围 在0.9mmol/L～35.7mmol/L范围内，理论浓度与实测浓度的线性相关系数r应不小于 0.9900. YY/T1201—2013 4.5准确度 4.5.1 提供参考物质或用参考方法定值的血清测定，实测值与标示值的偏差在土15.0%范围内。 4.5.2以标准溶液测定，试剂盒回收率在90%～110%范围内。 4.5.3 无具有溯源性的标准品或标准溶液，以比对方法测定，相关系数r应不小于0.9900。 4.6 分析灵敏度 试剂（盒）测试被测物时，单位浓度吸光度变化应符合制造商给定区间。 4.7 精密度 4.7.1 批内精密度 批内差应不大于5.0%，瓶间差（冻干粉）应不大于5.0% 4.7.2 批间精密度 批间相对极差应不大于10.0%。 4.8稳定性 试剂在规定的贮存条件下保存至有效期末或制造商规定的加速试验条件下，产品的性能应符合 4.1、4.3、4.4、4.5、4.6、4.7.1的要求 5试验方法 5.1外观 目测检查，结果应符合4.1的要求 5.2装量 用通用量具测量，结果应符合4.2的要求 5.3试剂空白 5.3.1 试剂空白吸光度 用指定空白样品测试试剂盒，加人试剂2后立刻测定试剂空白吸光度，405nm波长，1cm光径， 37℃，测定吸光度值，重复试验一次，求出均值即为空白吸光度。结果应符合4.3.1的要求。 5.3.2试剂空白吸光度变化率 用指定空白样品测试试剂（盒），在测试主波长下，记录测试启动时的吸光度（A，），扣除反应的非线 性段或约5min(t)后的吸光度（A2），A²测试结果即为试剂空白吸光度测定值；计算出吸光度变化值 A2-A,/) )，即为试剂空白吸光度变化率（△A/min）。结果应符合5.3.2的要求。 t 5.4线性范围 用接近线性范围上限的高浓度（活性）样品和接近线性范围下限的低浓度（活性）样品或蒸馏水混合 成至少5个稀释浓度（α，）。分别测试试剂（盒），每个稀释浓度建议测试13次，分别求出测定结果的 2 YY/T1201—2013 均值（y,）。以稀释浓度（r,)为自变量，以测定结果均值（y)为因变量求出线性回归方程。按公式（1)计 算线性回归的相关系数(r)。结果应符合4.4的要求。 Z[( -)(-) ...(1) /(;-)"(y:-)2 用稀释浓度（r)代人求出线性回归方程，计算y：的估计值及y：与估计值的相对偏差或绝对偏差。 5.5准确度 5.5.1总则 采用与要求相符合的下列方法之一测试试剂（盒）的准确度。结果应符合4.5的要求。 5.5.2相对偏差 用参考物质或有证参考物质(CRM)和相应的参考测量程序对试剂（盒）进行测试，重复测定3次， 取测试结果均值(M),按公式(2)计算相对偏差（B)； 或用由参考方法定值的高、低3个浓度的人血清（分为正常范围和病理范围)（可参照EP6-A的要 求适当添加被测物，以获得高浓度的样品）对试剂（盒）进行测试，每个浓度样品重复测定3次，分别取测 试结果均值，按公式(2)计算相对偏差 MTT X100% ..(2) 式中 M 测试结果均值 T 有证参考物质标示值或各浓度人血清定值 5.5.3 回收试验 在人血清样品中加入- 定体积标准或校准品溶液（标准溶液体积与血清体积比应不大于1：20或 其体积比不会产 生基质的变化，加人标准或校准品溶液后样品总浓度应在试剂（盒）测定线性范围内，标 准品或校准品应有溯源性）或纯品，每个浓度重复测定3次，按公式（3）计算回收率。 ..(3) VXc. 式中： R 回收率； V 加人标准液体积 V. 人血清样品的体积； c 人血清样品加人标准液后的测定浓度 人血清样品的测定浓度； Co Cs 标准液的浓度。 5.5.4比对试验 参照EP9-A2的方法，用不少于40个在测定浓度范围内不同浓度的人血清样品，以制造商指定的 分析系统作为比对方法，每份样品按待测试剂（盒）操作方法及比对方法分别测定。用线性回归方法计 算两组结果的相关系数(r)及每个浓度点的相对偏差。 5.6分析灵敏度 用已知浓度或活性的样品测试试剂（盒），记录在试剂（盒）规定参数下产生的吸光度改变。换算为 3