ICS 11. 100 YY C 44 中华人民共和国医药行业标准 YY/T1197—2013 丙氨酸氨基转移酶测定试剂盒 (IFCC 法) Alanine aminotransferasediagnostickit (IFCC method) 2013-10-21发布 2014-10-01实施 国家食品药品监督管理总局 发布 YY/T 1197—2013 前 言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 请注意本标准的某些内容可能涉及专利。本标准的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由国家食品药品监督管理总局提出。 本标准由全国医用临床检验实验室和体外诊断系统标准化技术委员会（SAC/TC136)归口。 本标准主要起草单位：中国食品药品检定研究院。 本标准主要起草人：王玉梅、黄杰、刘艳、高尚先。 I YY/T1197—2013 丙氨酸氨基转移酶测定试剂盒 (IFCC法) 1范围 本标准规定了丙氨酸氨基转移酶测定试剂盒（IFCC法）的测定原理、要求、试验方法、标签和使用 说明、包装、运输和贮存等。 本标准适用于丙氨酸氨基转移酶测定试剂盒（IFCC法）的质量控制，该产品用于体外定量测定人 体血清或血浆中丙氨酸氨基转移酶的活性。 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T191包装储运图示标志 3测定原理 丙氨酸氨基转移酶测定试剂盒（IFCC法）是属于国际临床化学联合会（IFCC)推荐的改良方法。本 法采用的原理是在ALT的催化下，丙氨酸的氨基转移到α-酮戊二酸，生成丙酮酸及谷氨酸。丙酮酸与 NADH在LDH的催化下反应生成乳酸和NAD+。NADH在波长340nm有特异吸收峰，其氧化的速 率与血清中ALT的活性成正比，在340nm处测定NADH吸光度下降的速率，即可计算出ALT活性。 4要求 4.1外观 符合制造商规定的正常外观要求。 4.2装量 液体试剂的装量应不少于标示量。 4.3试剂空白 4.3.1试剂空白吸光度 应不小于1.0（波长340nm，光径1cm）。 4.3.2试剂空白吸光度变化率 应不大于0.004/min（终点法不适用）。 4. 4 4线性区间 线性区间上限至少达到500U/L，在线性区间内，理论浓度与实测浓度的线性相关系数r应不小于0.9900。 1 YY/T1197—2013 4.5 准确度 4.5.1 提供参考物质或用参考方法定值的血清测定，实测值与标示值的偏差在土15.0%内。 4.5.2 以标准溶液测定，试剂盒回收率在90%～110%内。 4.5.3 无具有溯源性的标准品或标准溶液，以比对方法测定，相关系数r应不小于0.9900。 4.6分析灵敏度 4.6.1速率法 试剂（盒）测试被测物时，单位浓度吸光度差值（△A）或吸光度变化应符合制造商给定区间。 4.6.2 终点法 稀释一定浓度（n单位）的样品（检测限样品），测试吸光度。计算吸光度值能够与空白吸光度区分 的样品浓度，应符合制造商给定区间。 4.7精密度 4.7.1 批内精密度 批内精密度应不大于5.0%，瓶间差（冻干粉）应木大于5.0%。 4.7.2批间精密度 批间差应不大于10.0% 4.8稳定性 试剂在规定的贮存条件下保存至有效期末或制造商规定的加速试验条件下，产品的性能应符合 4.1、4.3、4.4.、4.5、4.6、4.7.1的要求 5试验方法 5.1外观 在明亮灯光下，以正常视力或矫正视力目测检查，应符合4.1的要求。 5.2装量 用通用量具测量，结果应符合4.2的要求。 5.3试剂空白 5.3.1试剂空白吸光度 试剂2(R2)加人立即测试剂空白吸光度，应符合4.3.1的要求。 5.3.2试剂空白吸光度变化率（终点法不适用） 用指定空白样品测试试剂（盒），在测试主波长下，记录测试启动时的吸光度（A，）和约5min（t）后 的吸光度（A2）,A2测试结果即为试剂空白吸光度测定值；计算出吸光度变化值（IA2一A，I/t)，即为试 剂空白吸光度变化率（△A/min）。应符合4.3.2的要求。 2 YY/T1197—2013 5.4线性区间 用接近线性区间上限的高浓度（活性）样品和接近线性区间下限的低浓度（活性）样品，混合成至少 5个稀释浓度（r：）。分别测试试剂（盒），每个稀释浓度测试3次，分别求出测定结果的均值（y：）。以稀 释浓度（工)为自变量，以测定结果均值（y：)为因变量求出线性回归方程。按公式（1)计算线性回归的 相关系数（r）。 ..(1) V2(a;-)"2(y:-y)2 用稀释浓度（，)代人求出线性回归方程，计算y；的估计值及y：与估计值的相对偏差或绝对偏差。 结果应符合4.4的要求。 5.5准确度 5.5.1总则 采用与要求相符合的下列方法之一测试试剂(盒)的准确度。结果应符合4.5的要求。 5.5.2 相对偏差 用参考物质或有证参考物质（CRM)和相应的参考测量程序对试剂（盒）进行测试，重复测定3次， 取测试结果均值（M)，按公 式(2)计算相对偏差(B) 或用由参考方法定值的高、低2个 浓度的 血清（可参照EP6-A的要求适当添加被测物，以获得高 浓度的样品）对试剂（盒）进行测试，每 手个浓度样品重复测定3次，分别取测试结果均值，按公式（2）计算 相对偏差， T B 100% ...(2) 式中： M 测试结果均值 T 有证参考物质标示值，或各浓度人血清定值 5.5.3 3回收试验 在人血清样品中加人一定体积标准或校准品溶液（标准溶液体积与血清体积比应不大于1：20或 其体积比不会产生基质的变化，加人标准或校准品溶液后样品总浓度应在试剂（盒）测定线性范围内，标 准品或校准品应有溯源性）或纯品，每个浓度重复测定3次，按公式（3）计算回收率。 X(V,+V)-c.X I R= ×100% (3) VXc. 式中： R 回收率； V 加入标准液体积； V. 人血清样品的体积； 人血清样品加人标准液后的测定浓度； c Co 人血清样品的测定浓度； Cs 标准液的浓度。 5.5.4比对试验 参照EP9-A2的方法，用不少于40个在测定浓度范围内不同浓度的人血清样品，以制造商指定的 3