ICS 11.100.10 YY CCS C44 中华人民共和国医药行业标准 YY/T1180—2021 代替YY/T1180—2010 人类白细胞抗原（HLA)基因分型 检测试剂盒 Typing kit for human leucocyte antigen(HLA) 2023-05-01实施 2021-12-06发布 国家药品监督管理局 发布 YY/T1180—2021 前言 本文件按照GB/T1.1一2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件代替了YY/T1180--2010《人类白细胞抗原（HLA)基因分型试剂盒SSP法》，与YY/T1180- 2010相比，除编辑性改动外，主要技术变化如下： 范围增加了本文件适用的方法学，并举例；增加了本文件的不适用内容（见第1章）； 增加了规范性引用文件（见第2章）； 增加了术语和定义（见3.3、3.4)； 技术指标主要修改内容如下： 。修改了外观要求即删除条目c)（见4.1,2010年版的3.1)； · 修改了主要的性能指标，根据预期用途分两类表述（见4.2、4.3，2010年版的3.2～3.7)； 修改了重复性要求（见4.2.2、4.3.3，2010年版的3.4)； · 修改了有效检测范围（见4.2.3，2010年版的3.5)； 删除了随机失败率要求（见2010年版的3.6）； 修改了稳定性要求（见4.2.4、4.3.5，2010年版的3.7)； 修改了试验方法，与第4章要求相适应（见第5章，2010年版的第4章）； 修改了标识、标签和使用说明书（见第6章，2010年版的第5章）； 修改了包装、运输和贮存（见第7章，2010年版的第6章）。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由国家药品监督管理局提出。 本文件由全国医用临床检验实验室和体外诊断系统标准化技术委员会（SAC/TC136)归口。 本文件起草单位：北京市医疗器械检验所、中国食品药品检定研究院、赛默飞世尔科技（中国）有限 公司、北京市红十字血液中心、山东英盛生物技术有限公司、江苏伟禾生物科技有限公司。 本文件主要起草人：王瑞霞、胡泽斌、李家豪、王东梅、景叶松、陈源。 本文件及其所代替文件的历次版本发布情况为： -2010年首次发布为YY/T1180—2010； 一本次为第一次修订。 I YY/T1180—2021 人类白细胞抗原（HLA）基因分型 检测试剂盒 1范围 本文件规定了人类白细胞抗原（HLA)基因分型检测试剂盒产品的术语和定义、要求、试验方法、标 识、标签、使用说明书、包装、运输和贮存等。 本文件适用于人类白细胞抗原（HLA)的基因分型检测试剂盒（以下简称试剂盒）的质量控制。该 试剂盒主要用于HLAI类A、B和C位点及IⅡ类DRB和DQB等多位点、单一血清学组或等位基因的 基因分型。该试剂盒方法学包含但不限于聚合酶链反应-序列特异性引物法（PCR-SSP)、聚合酶链反 应-序列特异性寡核苷酸探针法（PCR-SSO)、聚合酶链反应-基因测序分型法（PCR-SBT)、荧光PCR法、 PCR熔解曲线法等。临床用途包括移植或输血的供体与受体匹配、疾病的辅助诊断等。 本文件不适用于采用高通量测序方法检测人类白细胞抗原（HLA)的基因分型试剂盒。 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文 件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于 本文件。 GB/T191包装储运图示标志 GB/T29791.2体外诊断医疗器械 制造商提供的信息（标示）第2部分：专业用体外诊断试剂 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 人类白细胞抗原humanleucocyteantigen；HLA 在机体免疫体系中起重要作用的一组糖蛋白，由人类第6号染色体短臂上的基因组编码。 注：HLA基因具有高度遗传多态性，每个基因位点有数个到数百个序列不同的等位基因。 3.2 聚合酶链反应-序列特异性引物法polymerasechainreaction-sequencespecificprimer;PCR-SSP 利用多组等位基因特异性引物，通过PCR技术扩增特异性HLA等位基因的方法。 3.3 cleotide;PCR-SSO 用以同位素或非放射性标记的探针（序列特异性寡核苷酸)与PCR扩增的目标片段产物杂交，根据 阳性信号判断HLA等位基因的方法。 3.4 聚合酶链反应-基因测序分型法polymerasechainreaction-sequencebasedgenotyping；PCR-SBT 通过PCR扩增所要分析的基因片段，对DNA序列进行测序分析，从而判断基因型的方法。 1 YY/T1180—2021 4要求 4.1外观 外观要求包含但不限于以下内容： a）试剂盒各组分应齐全、完整，液体无渗漏； b）包装标签应清晰，无磨损。 4.2与移植或输血的供体与受体匹配相关试剂盒的性能要求 4.2.1参考品符合率 对人类白细胞抗原（HLA）基因分型国家参考品或者企业参考品进行检测，应符合：对试剂盒检测 范围内，已知基因分型的参考品进行检测，在制造商宣称的分辨率水平上，与参考品已知基因分型结果 相符合。 4.2.2重复性 对试剂盒检测范围内的参考品（1份～3份）平行进行检测，每份参考品多次检测的结果应一致，且 在制造商宣称的分辨率水平上与已知基因分型结果相符合。 4.2.3有效检测范围 制造商应规定试剂盒的有效检测范围，有效检测范围应符合制造商的要求。 4.2.4稳定性 可选用以下方法进行验证： 效期稳定性：制造商应规定产品的有效期。取到效期后的样品检测参考品符合率，有效检测范 a) 围，结果应符合4.2.1、4.2.3的要求。 b）热稳定性：依据制造商规定的稳定性条件，检测参考品符合率，有效检测范围，结果应符合 4.2.1、4.2.3的要求。 注1：一般情况下，效期为1年时选择不超过1个月的产品，效期为半年时选择不超过半个月的产品，以此类推。但 如超过规定时间，产品符合要求时也可以采纳， 注2：热稳定性不能用于推导产品有效期，除非是采用基于大量的稳定性研究数据建立的推导公式。 注3：根据产品特性可选择a）、b)方法的任意组合，但所选用方法宜能验证产品的稳定性，以保证在效期内产品性能 符合标准要求。 4.3疾病辅助诊断相关试剂盒的性能要求 4.3.1阳性参考品符合率（准确性） 对试剂盒检测范围内，已知基因分型的国家或企业阳性参考品进行检测，检测结果应为阳性或相应 基因型；企业阳性参考品应包含试剂盒检测范围内可检测的基因型。 4.3.2阴性参考品符合率（特异性） 对试剂盒检测范围外的国家或企业阴性参考品进行检测，检测结果应为阴性或未检出；阴性参考品 应包含一定数量的不含被测基因型别的样本。 2 YY/T1180—2021 4.3.3 3重复性 对试剂盒检测范围内的参考品（1份～3份）平行进行检测，每份参考品多次检测的结果应均为阳 性，或相应基因型。对试剂盒检测范围外的参考品（1份～3份）平行进行检测，每份参考品多次检测的 结果应均为阴性或未检出。 4.3.4检出限 制造商应规定试剂盒的检出限，检出限应符合制造商的要求。 4.3.5 5稳定性 可选用以下方法进行验证： a）效期稳定性：制造商应规定产品的有效期。取到效期后的样品检测阳性参考品符合率、阴性参 考品符合率、检出限，结果应符合4.3.1、4.3.2、4.3.4的要求。 b) 热稳定性：依据制造商规定的稳定性条件，检测阳性参考品符合率、阴性参考品符合率、检出 限，结果应符合4.3.1、4.3.2、4.3.4的要求 注1：一般情况下，效期为1年时选择不超过1个月的产品，效期为半年时选择不超过半个月的产品，以此类推。但 如超过规定时间，产品符合要求时也可以采纳。 注2：热稳定性不能用于推导产品有效期，除非是采用基于大量的稳定性研究数据建立的推导公式。 注3：根据产品特性可选择a)、b)方法的任意组合，但所选用方法宜能验证产品的稳定性，以保证在效期内产品性能 符合标准要求。 5试验方法 5.1外观 目测，判定结果是否符合4.1的要求。 5.2与移植或输血的供体与受体匹配相关试剂盒的试验方法 5.2.1参考品符合率 按照说明书进行操作，对国家参考品或企业参考品进行检测，判定检测结果是否符合4.2.1的要求。 5.2.2重复性 将1份～3份已知基因分型的具有代表性的脱氧核糖核酸（DNA）样品作为重复性参考品，按照说 明书操作，进行检测，每份样品平行检测3次～5次，判定检测结果是否符合4.2.2的要求。 5.2.3有效检测范围 用试剂盒检测范围内的已知基因分型的阳性参考品，按照制造商规定的最高浓度和最低浓度，分别配 制出两份不同浓度的样品，作为验证有效检测范围的参考品，按照说明书进行操作，两份不同浓度的参考 品均应在试剂盒制造商宣称的分辨率水平上与已知基因型别相符合，判定检测结果是否符合4.2.3的 要求。 5.2.4稳定性 可选用以下方法进行验证： a）效期稳定性：取到效期后的样品按照5.2.1、5.2.3方法进行检测，判定结果是否符合4.2.4a）的 要求； 3 YY/T1180—2021 b） 热稳定性：依据制造商规定的稳定性条件保存样品，按照5.2.1、5.2.3方法进行检测，判定结果 是否符合4.2.4b)的要求。 5.3疾病辅助诊断相关试剂盒的试验方法 5.3.1阳性参考品符合率（准确性） 按照说明书操作要求，对已知基因分型