ICS 11.100 YY C 44 中华人民共和国医药行业标准 YY/T0588—2017 代替YY/T0588—2005 流式细胞仪 Flow cytometer 2017-12-05发布 2018-12-01实施 国家食品药品监督管理总局 发布 YY/T0588—2017 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准在YY/T0588一2005《流式细胞仪》的基研上修订而成，与YY 性修改外主要技术变化如下： 修改了规范性引用文件； 修改了“倍体”定义； 修改了“荧光灵敏度”名称及要求，改为“荧光检出限”，增加了其他激光对应通道荧光系的荧 光检出限要求； 修改了“前向角散射光灵敏度”各称.改为“前向角散射光检出限”： 修改了“仪器分辨率”要求，去掉半峰宽要求，并规定FSC、FITC、PE的要求.其他荧光素符合 制造商要求（见4.5仪器分辨率要求）； 修改了"表面标志物检测准确性”要求，增加了CDi/CDs和CD1g的要求； 修改了"表面标记物检测的重复性"要求，将CI)、CI)、CI)：阳性百分比结果的变异系数进行 分段要求，并增加测量CD16/CD%及CD1。的要求（见4.9表面标记物检测的重复性要求）； 修改了"携带污染率”要求，改为不大于0.5%； 删除了“仪器功能”； 增加了GB4793.9、YY0648安全要求内容（见4.14安全）； 增加了GB/T18268.1、GB/T18268.26电磁兼容要求内容（见4.15电磁兼容）； 修改了"荧光检出限”试验方法（见5.2炭光检出限）； 修改了“荧光线性”试验方法（见5.3荧光线性）； 修改了“前向角散射光检山限”试验方法（见5.4前向角散射光检山限）； 修改了"仪器分辨率"试验方法（见5.5仪器分辨率）； 修改了携带污染率试验方法（见5.10携带污染率）。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由国家食品药品监督管理总局提出。 本标准由全国医用临床检验实验室和体外诊断系统标准化技术委员会（SAC/TC136)归口。 （上海）有限公司、深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司、艾森生物（杭州)有限公司。 本标准主要起草人：宋伟、刘秋月、李为公、吴煦、昊坚。 本标准代替了YY/T0588—2005。 1 YY/T0588—2017 流式细胞仪 1范围 本标准规定了流式细胞仪(llowcytomctcr，FCM)的术语和定义、产品分类、技术要求、试验方法、 标志、标签和使用说明、包装、运输和存。 本标准适用于临床使用的对单细胞或其他非生物颗粒膜表面以及内部的生物化学及生物物理特性 成分进行定量分析和分选（只限于有分选功能的流式细胞仪）的流式细胞仪。 规范性引用文件 2 下列文件对于本文件的应用足必不可少的。凡足注日期的引用义件.仪注日期的版本适用于本义 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件 GB/T191 包装储运图示标志 GB4793.1测量、控制和实验室用电气设备的安全要求 交第1部分：通用要求 GB1793.9测量、控制和实验室用电气设备的安全要求第9部分：实验室用分析和其他目的自 动和半自动设备的特殊要求 GB/T14710E 医川电气设备环境要求及试验方法 GB/T18268.1 测量、控制和实验室用的电设备电磁兼容性要求第1部分：通用要求 GB/T18268.26 测量、控制和实验室的电设备电磁兼容性要求第26部分：持殊要求 体 外诊断(IVI))医疗设备 GB/T29791.3 体外诊断医疗器械 制造商提供的信息（标示） 第3部分：专业用体外诊断仪器 YY0618 测量、控制和试验室用电气设备的安全要求 第2-101部分：体外诊断(IVD)医用设备 的专用要求 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 分辨率 resolution 流式细胞仪在测量时所能达到的最大精度 3.2 荧光检出限 sensitivityof flnorcsccnce 流式细胞仪能检测到的最少荧光分子数。流式细胞仪荧光检出限用MESF（moleculesofequiva lcntsalublclluorochromc）表示，即等量可溶性荧光分子。 3.3 散射光 scatter 3.4 前向角散射光 forwardscatter.FSC 在人射光正前方检测到的散射光称为前向角敬射光.前向角散射光的强弱与细胞的大小有关。 YY/T0588—2017 3.5 侧向角散射光 side scatter.SSC 也称90°散射光。侧向角散射光对细胞膜、胞质、核膜的折射率更为缴感，对胞质内较大的颗粒也 会有反应，可获得有关细胞内部精细结构和颗粒性质的信息。 3.6 前向角散射光检出限 FSCsensitivity 流式细胞仪能够检测到的最小颗粒大小，以前向角散射光最小能检测到的颗粒直径表示。 3.7 倍体polity 生物体细胞（包括动物细胞、植物细胞、微生物）的遗传物质含量。 3.8 携带污染率 carry-over 分析物被仪器由一个检测样品到下一个样品的携带量，从而错误地引起第二个被测样品分析物浓 度的增加。 3.9 标准微球 standard particle 大小一致和（或）标有强度一致、恒定不变荧光素的微球，用于流式细胞仪的校准。 4技术要求 4.1 正常工作条件 流式细胞仪的正常工作条件应符合如下要求 a) 环境温度：按照流式细胞仪说明书的规定； b） 相对湿度：按照流式细胞仪说明书的规定； c) 电源电压：交流220V±22V.50Hz±1Hz； d) 大气压力：按照流式细胞仪说明书的规定； e) 防止阳光直射，避免热源。 4.2 荧光检出限 流式细胞仪的荧光检出限应符合下列要求： a) 流式细胞仪对异硫氰酸荧光素（FITC)的荧光检山限应不大于200MESF； b) 流式细胞仪对藻红蛋白（PE) ( 流式细胞仪对其他激光需（例如红激光、紫激光、紫外激光、绿激光）所对应通道荧光素（每种激 光器至少选择一种荧光素的荧光检山限应符合制造商声称的要求。 4.3 荧光线性 流式细胞仪荧光强度线性相关系数(r）应不低于0.98。 4.4 前向角散射光检出限 流式细胞仪前间角散射光检出限应不大于1μm。 4.5 仪器分辨率 流式细胞仪前向角散射光和荧光信号的荧光通道全峰宽应满足表1要求。 2 YY/T0588—2017 表1 仪器分辨率要求 荧光素 婴求(CV) FSC ≤3.0% FITC ≤3.0% PE ≤3.0% 其他荧光素 符合制造商要求 4.6 前向角散射光和侧向角散射光分辨率 4.6.1 应可以将外周血中红细胞和血小板分开。 4.6.2 应可以将外周血白细胞三群（淋巴细胞、单核细胞、粒细胞）分开。 4.7 倍体分析线性 流式细胞仪进行二倍体细胞周期分析时，G/M与G/G，的平均荧光强度比值应在1.95～2.05范 围内。 4.8 表面标志物检测准确性 流式细胞仪检测质控血时淋巴细胞表而表达的CDCD：、CDs、CD1s/CDs6和CD1*阳性百分比结 果应在给定范围内。 4.9 表面标志物检测的重复性 重复检测样品CDa、CI)、CI)、CI)1%/CI)sG和CD，阳性百分比结果的变异系数(CV）应符合： a) 阳性百分比大于等于30%时.CV值应不大于8%；或 阳性百分比小于30%时，CV值应不大于15%。 4.10 携带污染率 流式细胞仪的携带污染率应不大于0.5%。 4.11 仪器稳定性 环境温度变化不超过设定温度的5%时，在8h内检测前向角散射光（FSC)及所有炎光通道峰值炎 光道数的波动范围应不超过士10%。 4.12 外观 外观应符合下列要求： 仪器外观应整洁.无划痕，文字和标识清晰； b) 紧固件连接应牢固可靠，不得有松动。 4.13 环境试验 应符合GIB/T14710中气候坏境I组，机械环境I组的要求。 4.14安全 应符合GI34793.1.GB4793.9、YY0648中适用条款的要求， 3 YY/T0588—2017 4.15电磁兼容 应符合G1/T18268.1、G13/T18268.26中适用条款的规定。 5试验方法 5.1i 试验条件 按照4.1的试验条件进行，使用与流式细胞仪适配的试剂、质控品及标准微球，并在试验之前按照 制造商的使用说明对流式细胞仪进行正确的操作和校准。 5.2 荧光检出限 将标准微球充分混匀后上机进行试验.收集不少于10000个标准微球，对试验结果进行直方图分 各个峰的平均荧光强度，取常用对数（ILg值）做线性回归.空白微球处的平均荧光强度值对应的MESF 数的反对数即为荧光检山限。 5.3 荧光线性 将标准微球充分混匀后上机进行试验，收集不少于10000个微球，流式细胞仪运川直方图对试验 结果分析，得到各个峰的平均炎光强度；根据标准微球说明书提供的各个峰的等量MESF数.以及分析 得到的各个峰的平均荧光强度.以MESF数（y）和平均荧光强度（）的线性回归.计筑相关系数（r）。 5.41 前向角散射光检出限 将标准微球充分混匀后上机进行检测，检直方图上显示的峰值信号，及显示峰值信号的标准微球 直径。 5.5仪器分辨率 将标准微球充分混匀后上机进行试验，计算出各荧光通道标准微球全峰宽的（V值，结果应符合 1.5的要求。 5.6前向角散射光和侧向角散射光分辨率 5.6.1在装有1mL鞘液的试管中加入5μL枸橡酸钠抗凝全血.混匀后.上机检测，检查前向角散射光 利侧向角散射光点图是否可以将而小板和红细胞分开 否可以将白细胞三群(淋巴细胞、单核细胞、粒细