SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 2557—2010 畜肉食品中牛成分定性检测方法 实时荧光PCR法 Detection of qualitation of bovine ingredient in meat product- Real timePCRmethod 行业标准信息服务平台 2010-05-27发布 2010-12-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T2557—2010 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中国检验检疫科学研究院。 本标准主要起草人：吴亚君、陈颖、王斌、袁飞、杨海荣、黄文胜、赵贵明 行业标准信息服务平台 SN/T2557—2010 畜肉食品中牛成分定性检测方法 买时荧光PCR法 1范围 本标准规定了畜肉食品中牛成分检测方法。 本标准适用于新鲜、冰冻畜肉和肉干、肉酱、酱肉、火腿、肉松等畜肉加工食品中牛成分定性检测。 2天 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件，凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB/T15481检测和校准实验室能力的通用要求 GB/T27403实验室质量控制规范食品分子生物学检测 3定义、术语和缩略语 下列定义、术语和缩略语适用于本文件。 行业标 3.1定义和术语 3.1. 1 实时荧光PCR realtimePCR 在PCR反应体系中加入特异性的荧光探针。该探针为一寡核苷酸，与靶序列互补，两端分别标记 一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。PCR扩增时，Taq酶的5’→3'外切酶活性将探针酶切降解， 使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号。利用荧光信号的积累实 服务平台 时监控整个PCR扩增过程。 3. 1.2 Ct值cyclethresholdvalue 每个实时荧光PCR反应管内的荧光信号达到设定的國值时所经历的循环数。 3.2缩略语 3.2. 1 CTABhexadecyltrimethylammoniumbromide 十六烷基三甲基漠化铵。 3.2. 2 DNAdeoxyribonuleicacid 脱氧核糖核酸。 1 SN/T 2557—2010 3.2.3 dATPdeoxyadenosinetriphosphate 脱氧腺苷三磷酸。 3.2. 4 dCTPdeoxycytidine triphosphate 脱氧胞苷三磷酸。 3.2.5 dGTPdeoxyguanosine triphosphate 脱氧鸟苷三磷酸。 3.2. 6 dTTPdeoxythymidine triphosphate 脱氧胸苷三磷酸。 3.2.7 dUTP deoxyuridine triphosphate 脱氧尿苷三磷酸。 3.2.8 EDTAethylenediaminetetraacetic acid 乙二胺四乙酸。 3.2.9 ROXcarboxy-X-rhodamine 羧基-X-罗丹明。 3.2. 10 Taq Thermus aquaticu 水生栖热菌。 3.2. 11 TAMRA carboxy-tetramethyl-rhodamine 标准信息服务平台 羧基四甲基罗丹明。 3.2.12 Tristris (hydroxymethyl)aminomethane 三（羟甲基）氨基甲烷。 3.2.13 UNG酶uracil-N-glycosylase 尿嘧啶DNA-糖基化酶。 4 防止污染措施 防止污染措施应符合GB/T27403的规定。 5试样制备与保存 5.1试样制备 从原始样品中取出部分有代表性样品，将可食部分用绞碎机绞碎，充分混匀，用四分法缩分出不少 于500g作为试样。装入清洁容器中，加封后，标明标记。 2