ICS 65.160 YC X87 备案号：61391—2018 中华人民共和国烟草行业标准 YC/T563—2018 卷烟 总粒相物中烟碱、降烟碱、 新烟碱、麦斯明、假木贼碱、 可替宁和2，3-联吡啶的测定 气相色谱-质谱联用法 CigarettesDeterminationofnicotine,nornicotine,anatabine,myosmine anabasine,cotinineand 2,3'-bipyridine in total particulate matter- Gaschromatography/massspectrometrymethod 2018-01-18发布 2018-02-01实施 国家烟草专卖局 发布 YC/T563—2018 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由国家烟草专卖局提出。 本标准由全国烟草标准化技术委员会卷烟分技术委员会（SAC/TC144/SC1）归口。 本标准起草单位：郑州烟草研究院、河北中烟工业有限责任公司、国家烟草质量监督检验中心、河 南中烟工业有限责任公司、江苏中烟工业有限责任公司、福建中烟工业有限责任公司、吉林烟草工业有 限责任公司、甘肃烟草工业有限责任公司、贵州中烟工业有限责任公司、广西中烟工业有限责任公司。 本标准主要起草人：丁丽、秦亚琼、阎瑾、王晓瑜、蔡君兰、刘绍锋、顾亮、鲍峰伟、股延齐、田海英、 范忠、姬厚伟、苏明亮、姜兴益、黄飞、臧志鹏、王超、贾云祯、崔华鹏、王宜鹏、张晓静。 I YC/T563—2018 总粒相物中烟碱、降烟碱、 卷烟 新烟碱、麦斯明、假木贼碱、 可替宁和2，3'-联吡啶的测定 气相色谱-质谱联用法 1范围 本标准规定了卷烟主流烟气总粒相物中烟碱、降烟碱、新烟碱、麦斯明、假木贼碱、可替宁和2，3'-联 吡啶的气相色谱-质谱联用测定方法。 本标准适用于卷烟主流烟气总粒相物中烟碱、降烟碱、新烟碱、麦斯明、假木贼碱、可替宁和2，3'-联 吡啶的测定。 规范性引用文件 2 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6882分析实验室用水规格和试验方法 GB/T19609 9卷烟用常规分析用吸烟机测定总粒相物和焦油 3原理 用玻璃纤维滤片捕集卷烟主流烟气中的总粒相物，于碱性条件下用二氯甲烷萃取，萃取液除水后， 通过气相色谱-质谱联用法分析烟碱、降烟碱、新烟碱、麦斯明、假木贼碱、可替宁和2，3'-联吡啶，内标法 定量。 4 试剂和材料 4.1 水，GB/T6682，一级。 4.2 二氯甲烷，色谱纯（或分析纯经重蒸后使用）。 4.3 氢氧化钠，分析纯。 4.4 无水硫酸钠，使用前应在550℃条件下干燥至少5h。 4.5 三乙胺，纯度≥98%。 4.6 0.01%三乙胺-二氯甲烷溶液 移取100μL三乙胺（4.5）加人到1L二氯甲烷（4.2)中，超声振荡混合均匀。 4.7 剑桥滤片，直径44mm和92mm。 4.8 烟碱，纯度≥98%。 4.9 降烟碱，纯度≥98%。 4.10 新烟碱，纯度≥98%。 4.11 麦斯明，纯度≥98%。 YC/T563—2018 4.12 假木贼碱，纯度≥98%。 4.13 可替宁，纯度≥98%。 4.14 2，3'-联吡啶，纯度≥98%。 4.15 2-甲基喹啉（内标），纯度≥98%。 4.16 降烟碱-d，（内标），纯度≥98%。 4.17 2，2-联吡啶-d（内标），纯度≥98%。 4.18 5%NaOH水溶液 准确称取5gNaOH（4.3）于塑料瓶中，加入95mL水溶解并混合均匀。 50mL棕色容量瓶中，再分别准确加入200m内标溶液（4.19），用0.01%三乙胺-二氯甲烷溶液（4.6） 定容，混匀。配制6级标准工作溶液，即配即用；所配制标准工作溶液中降烟碱的浓度为0.1uμg/mL、 0.2μg/mL.0.5μg/mL、1.2μg/mL、2.4μg/mL、5μg/mL。 4.20.3新烟碱、麦斯明、假木贼碱、2，3-联吡啶和可替宁标准溶液 4.20.3.1新烟碱、麦斯明、假木贼碱、2，3'-联吡啶和可替宁储备液 混匀。 4.20.3.2 一级新烟碱、麦斯明、假木贼碱、2，3-联吡啶和可替宁标准溶液 准确移取600μL新烟碱、麦斯明、假木贼碱、2，3-联吡啶和可替宁储备液（4.20.3.1)于25mL棕色 容量瓶中，用0.01%三乙胺-二氯甲烷溶液（4.6）定容，混匀。 4.20.3.3 3新烟碱、麦斯明、假木贼碱、2，3-联吡啶和可替宁标准工作溶液 2 YC/T563—2018 分别准确移取100μL、200μL、500μL、1.2mL、2.4mL、5mL的混合标准溶液（4.20.3.2）于6个 50mL棕色容量瓶中，再分别准确加人200μL内标溶液（4.19），用0.01%三乙胺-二氯甲烷溶液（4.6） 定容，混匀。配制6级标准工作溶液，即配即用；所配制标准工作溶液中新烟碱、麦斯明、假木贼碱和 2，3-联吡啶的浓度相同，分别为0.048μg/mL、0.096μg/mL、0.240μg/mL、0.576μg/mL、1.152μg/ mL、2.40μg/mL，可替宁的浓度为0.096μg/mL、0.192μg/mL、0.480μg/mL、1.152μg/mL、2.304μg/ mL.4.80μg/mL。 4.20.4标准溶液的存放 标准储备液在一20℃条件下避光保存，有效期为6个月。系列标准工作溶液为即配即用。 C 仪器设备 常用实验仪器以及下述各项。 5.1分析天平，感量0.1mg。 (SIM)功能。 5.3直线或转盘吸烟机。 5.4 机械振荡仪。 5.5离心机，使用转速不低于5000r/min。 5.6 离心管，50mL。 5.7 一次性无菌注射器，5mL。 6 分析步骤 6.1 卷烟的抽吸 按照GB/T19609的规定收集卷烟的总粒相物。使用直线吸烟机（5.3）时采用44mm滤片，每张滤 片抽吸5支卷烟；使用转盘吸烟机（5.3）时采用92mm滤片，每张滤片抽吸10支卷烟。 6.2测定次数 每个样品应平行测定两次。 6.3样品处理 直径为44mm的滤片放人50mL锥形瓶中，加人5mL5%NaOH水溶液（4.18），静置30min，加 人20mL0.01%三乙胺-二氯甲烷溶液（4.6），准确加入80μL内标溶液（4.19），置于振荡仪（5.4）上于 160r/min条件下振荡萃取40min，静置待用。 直径为92mm的滤片放人250mL锥形瓶中，加人10mL5%Na0H水溶液（4.18），静置30min， 加入40mL0.01%三乙胺-二氯甲烷溶液（4.6），准确加入160μL内标溶液（4.19），置于振荡仪（5.4）上 于160r/min条件下振荡萃取40min，静置待用。 层。将一次性无菌注射器（5.7）的活塞推杆拔出，称取4g无水硫酸钠（4.4）加人其空腔中，轻轻敲打注 射器外壁，使无水硫酸钠装实。取下注射器（5.7）的针头保护套，取2mL下层二氯甲烷相溶液于注射 器（5.7）中，收集过滤液于色谱分析瓶中待进样分析。 3 YC/T563—2018 6.4 气相色谱-质谱分析条件 以下分析条件可供参考，采用其他条件应验证其适用性。 6.4.1气相色谱条件为： 色谱柱：毛细管色谱柱，固定相为（30%苯基）-甲基聚硅氧烷，规格为[30m（长度）×0.25mm （内径）×0.25μm（膜厚）]。 进样口温度：230℃。 程序升温：初始温度100℃，保持3min，8℃/min升至160℃，2℃/min到175℃，10℃/min 流 6.4.2 序 2,3'-联吡啶 9 16.76 156 155 100 : 69 10 可替宁 22.08 98 176 100: 46 注：各保留时间是在DB-35MS色谱柱条件下的典型值。 6.5 5标准工作曲线制作 按照气相色谱-质谱分析条件（6.4）对系列标准工作溶液（4.20.1.2，4.20.2.3和4.20.3.3）分别进行 测定。以标准工作溶液7种生物碱的定量离子峰面积与内标物定量离子峰面积的比值为纵坐标，各生 物碱的浓度与内标浓度的比值为横坐标，绘制标准工作曲线，线性相关系数R?不小于0.99。烟碱的定 量以2-甲基喹啉为内标，标准工作曲线可不过原点；降烟碱以降烟碱-d，为内标，其他生物碱以2，2-联 吡啶-ds为内标，标准工作曲线强制过原点。 4 YC/T563—2018 每次试验均应制作标准工作曲线。每20次样品测定后应加人一个中等浓度的标准工作溶液，如果 测得值与原值相差超过10%，则应重新进行标准工作曲线的制作。 6.6样品测试 按照气相色谱-质谱分析条件（6.4）测定样品溶液（6.3），每个样品平行测定两次，样品中烟碱与其他 生物碱的检测分两次进样来完成。 6.7 定性确认 两次平行测定结果的相对平均偏差应小于10%。 检出限、定量限、精密度和回收率 8 本方法的检出限、定量限、精密度和回收率结果参见附录B。 检验报告 9 检验报告应包含以下内容： 检测环境大气条件； 卷烟的名称、规格、类型、盒标焦油量、盒标烟气烟碱量： 5