SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 4851—2017 出口水产品中甲基汞和乙基汞的测定 液相色谱-电感耦合等离子体质谱法 Determination of methyl mercury and ethyl mercury in aquatic products for export-HPLC-ICP/MS method 2017-07-21发布 2018-03-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T 4851—2017 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国辽宁出人境检验检疫局。 本标准主要起草人：庞艳华、金雁、董振霖、肖珊珊、王玉萍、高鹭、孙瑶、王楠。 I SN/T 4851—2017 出口水产品中甲基汞和乙基汞的测定 液相色谱-电感耦合等离子体质谱法 1范围 本标准规定了水产品中甲基汞和乙基汞的液相色谱-电感耦合等离子体质谱法。 本标准适用于出口鱼类、贝类、甲壳类等水产品中甲基汞和乙基汞的测定。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3方法提要 样品中的甲基汞和乙基汞经过提取液萃取、离心过滤后，用液相色谱仪对汞的各种形态进行分离， 并直接导入电感耦合等离子体质谱仪测定，外标法定量。 4试剂和材料 除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水为符合GB/T6682规定的一级水。 4.1 盐酸（p=1.19g/mL），优级纯。 4.2浓氨水。 4.3甲醇，色谱纯。 4.4L-半胱氨酸盐酸盐，生化试剂。 4.5乙酸铵。 4.6氨水溶液（体积分数50%）：准确量取50-mL氨水（4.2），缓慢倒入50mlL中，混匀。 4.7L-半胱氨酸溶液（10g/L）：准确称取1.0gL-半胱氨酸盐酸盐（4.4），用水溶解稀释定容至100mL。 4.8 提取溶液（5mol/L盐酸，0.1%半胱氨酸盐酸盐）：称取0.1gL-半胱氨酸盐酸盐（4.4），用水溶解，缓 慢加人41.66mL盐酸（4.1），用水稀释定容至100mL。 4.9流动相（10mmol/1.乙酸铵，0.1%L-半胱氨酸盐酸盐，5%甲醇，pH=7.0）：称取0.771g乙酸铵 （4.5）和1.0gL-半胱氨酸盐酸盐（4.4），用900mL水溶解，加人50mL甲醇（4.3）.用氨水溶液（4.6）调 节pH至7.0.加水稀释定容至1000mL。 4.10氯化甲基汞标准品：CH；CIHg，CAS号115-09-3，纯度大于98%。 4.11氯化乙基汞标准品：C,H,CIHg，CAS号107-27-7，纯度大于98%。 4.12甲基汞标准储备液（100μg/mL，以Hg计）：准确称取0.0125g氯化甲基汞（4.10）加少量甲醇 （4.3)溶解，稀释定容至100ml，于0℃～4℃冰箱中可保存六个月。或使用有证标准溶液。 4.13乙基汞标准储备液（100μg/ml，以Hg计）：准确称取0.0135g氟化乙基汞（4.11），加少量甲醇 （4.3)溶解，稀释定容至100mL，于0℃～4℃冰箱中可保存六个月。或使用有证标准溶液。 1 SN/T4851—2017 4.14 混合标准使用液（500ng/mL，以Hg计）：准确移取甲基汞标准储备液（4.12）和乙基汞标准储备 液（4.13）各0.50mL，用水稀释定容至100mL。使用时现配。 4.15 5针头过滤器：0.45μm，尼龙滤膜。 51 仪器和设备 5.1 高效液相色谱仪。 5.2电感耦合等离子体质谱仪（ICP-MS)。 电子天平：感量分别为0.001g和0.0001g。 5.4 超声波清洗器。 5.5 离心机。 5.6 水浴振荡器。 5.7 高速冷冻离心机。 5.8 组织捣碎机。 6 5样品制备与保存 取可食部分，用捣碎机打成匀浆，均分成两份作为试样，分别装人洁净的容器内，密封并标明标记。 试样应于一18℃以下保存。 7 7分析步骤 7.1提取 称取样品1.0g～2.0g（精确到0.001g），置于15mL离心管中，加人10mL提取溶液（4.8），涡旋混 匀，在室温下超声萃取1h～2h，期间振摇数次。于4℃下以8000r/min转速离心15min，准确移取 2mL上清液至15mL离心管中，缓慢逐滴加人约1.5mL的50%氨水溶液（4.6），调节pH至6～7，用 谱-电感耦合等离子体质谱仪进行分析。 7.2测定 7.2.1液相色谱参考条件 液相色谱参考条件如下： a） 色谱柱：Cls柱，长150mm，内径4.6mm，粒度5μm，或相当者； b) 流动相：10mmol/L乙酸铵+0.1%L-半胱氨酸盐酸盐+5%甲醇（4.9）； c) 柱温：30℃； (P 流速：1.0mL/min； e) 进样量：50μL。 7.2.2 电感耦合等离子体质谱仪条件 仪器参考工作条件及参数：参见附录A.1。 7.2.3工作曲线 分别移取混合标准使用液0mL、0.1mL、0.2mL、0.5ml、1.0ml、2.0mL、5.0mL于一组50mL 2 SN/T4851—2017 容量瓶中，各加人2.0mLL-半胱氨酸盐酸盐溶液（4.7），用水定容至刻度，得到甲基汞和乙基汞的浓度 （以Hg计）分别0.0μg/L、1.0μg/L、2.0μg/L、5.0μg/L、10.0μg/L、20.0μg/L、50.0μg/L的混合标准 工作液。以标准工作液中目标化合物的浓度为横坐标，以色谱峰面积为纵坐标，绘制标准工作曲线。 7.3定量测定 依次对混合标准溶液系列、空白溶液和试样溶液进行测定，以其标准溶液峰的保留时间定性，用标 准工作曲线对试样进行定量。甲基汞、乙基汞标准样品色谱图参见图B.1。 7.4平行试验 按上述步骤，对同一试样进行平行试验测定。 7.5 空白试验 除不加试样外，均按上述操作步骤进行。 8结果计算和表述 试样中甲基汞（或乙基汞）的含量（mg/kg）的计算见式（1)： (c-Co)×V X, = (1 ) m×1000 式中： 试样中甲基汞（或乙基汞）的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）； -试样溶液中甲基汞（或乙基汞)的浓度，单位为微克每升（μg/L）； Cil 空白溶液中甲基汞（或乙基汞)的浓度，单位为微克每升（ug/L)； C io V 样液最终定容体积，单位为毫升（mL）； 最终样品溶液所代表试样的质量，单位为克（g）。 计算结果保留两位有效数字。 9测定低限、回收率和精密度 9.1测定低限 本方法对甲基汞和乙基汞的测定低限分别为0.02mg/kg、0.05mg/kg。 9.2 2回收率 在三种不同基质样品中各添加三个水平的甲基汞、乙基汞，回收率结果见表1。 表1方法回收率数据表 甲基汞 乙基汞 样品名称 添加水平 回收率范用 添加水平 回收率范围 mg/kg % mg/kg % 0.02 79.4~94.6 0.05 71.7~90.5 鱼类 0.25 87.5~98.6 0.25 82.3~91.5 0.50 90.5~100.2 0.50 82.9~94.2 3