SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T4532.4—2017 商品化试剂盒检测方法 β-内酰胺类 方法四 Commercial kit test methodBeta-lactams-Test methodV 2017-07-21发布 2018-03-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 刮途层查真伪 SN/T 4532.4—2017 前言 本部分是SN/T4532≤商品化试剂盒检测方法 长β-内酰胺类》的第4部分。 本部分按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本部分主要起草单位：中华人民共和国吉林出人境检验检疫局、中华人民共和国福建出人境检验检 疫局、中国检验检疫科学研究院、北京柏奥泰科技有限公司。 本部分主要起草人：刘金华、聂丹丹、刘韬、王玮琳、罗雁非、郑晶、刘阳、芦春梅、曲辉、彭勃、牟峻、 邹明强。 SN/T4532.4—2017 商品化试剂盒检测方法 β-内酰胺类方法四 1范围 SN/T4532的本部分规定了牛奶样品中β-内酰胺类药物的胶体金免疫层析检测方法。 本部分适用于采用胶体金免疫层析试纸条对纯牛奶中β-内酰胺类药物残留定性检测。 2规范性引用文件 2 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 SN/T2775 商品化食品检测试剂盒评价方法 3原理 应用胶体金竞争抑制免疫层析法的原理，样品中残留的待测物与检测线上的待测物抗原共同竞争 胶体金标记的特异性抗体，通过检测线与控制线颜色深浅比较，对样品中待测物的含量定性判定。 4试剂与材料 4.1β-内酰胺类检测试剂盒1) 4.1.1本试剂盒参考SN/T2775由国家认监委商品化食品检测试剂盒评价专家委员会进行了评价，评 价结果参见附录A。 4.1.2商品化试纸条、反应杯及反应试剂在2℃～8℃、干燥、避光条件下保存，产品有效斯不得少于 12个月。 4.1.3试剂盒组成如下： a）β-内酰胺类测试纸条； b) 微孔试剂（胶体金标记的β-内酰胺类抗体）。 4.2 2对照品 β-内酰胺类阳性及阴性对照品。 5仪器设备 5.1计时器。 5.2移液器：200μ。 1）北京柏奥泰科技有限公司产品，给出这一信息是为了方使本标准的使用者，并不表示对该产品的认可。如果其 他产品能有相同的效果，则可使用这些等效的产品。 SN/T 4532.4—2017 6样品制备 检测前样品需回室温（22.5土2.5）℃，并充分混匀。 7分析步骤 7.1 取出所需数量的板孔和测试条，回温至室温（22.5士2.5）℃。 7.2用一次性吸头吸取200μL牛奶样品于反应孔中，混匀，在室温下孵育3min。 7.3将试纸条垂直插人到牛奶样品中保持4min，从反应孔中取出测试条，进行结果判定。 结果判定 通过目测检测线（T线）和控制线（C线）的颜色深浅来进行结果判定。 目视结果判定依据： 无效：控制线（C线）不显色； b) 阴性：检测线（T线）颜色明显比控制线（C线）颜色深； c) 弱阳性：检测线（T线）颜色与控制线（C线）颜色相当： d) 强阳性：检测线（T线）颜色明显弱于控制线（C线）。 方法性能指标 9.1 检出限 青霉素G：4μg/kg；氨苄青霉素：5μg/kg；阿莫西林：5μg/kg；邻氯青霉素：8μg/kg；苯甲异唑青 霉素：8μg/kg；双氯青霉素：8μg/kg；蔡夫西林：30μg/kg；头孢噻呋：100uμg/kg；头孢匹林：15μg/kg； 头孢唑林：50μg/kg；头孢喹：20μg/kg；头孢哌酮：20.μg/kg；头孢洛宁：10μg/kg。 9.2特异性 当浓度≤25μg/kg时，去甲基金霉素、甲烯土霉素、四环素、土霉素、金霉素、强力霉素、林可霉素、 氟苯尼考、丹诺沙星、恩诺环丙沙星、头孢呋、头孢乙腈、头孢氨苄均无交叉反应。 2 SN/T4532.4—2017 附录A （资料性附录） 牛奶中β内酰胺类检测试纸条评价结果2) A.1 灵敏度 灵敏度见表A.1。 表A.1 灵敏度 药物名称 检测限范围/（μg/kg） 验证浓度水平/(μg/kg) 青霉素GpenicillinG 3~4 4 氨芋青霉素Ampicillin 4~5 5 阿莫西林Amoxicillin 4~5 5 邻氮青霉素Cloxacillin 4~8 8 苯甲异嗯唑青霖素Oxacillin 4~8 8 双氮青霉素Dicloxacillin 5~8 8 蔡夫西林Nafcillin 15~30 30 头孢噻呋Ceftiofur 75~100 100 头孢匹林Cephapirin 6~15 15 头孢唑咻Cefazolin 35~50 50 头孢喔Cefquinome 15~20 20 头孢哌酮Cefoperazone 10~20 20 头孢洛宁Cefalonium 3~10 10 A.2 特异性 当浓度≤25μg/kg时，去甲基金霉素、甲烯土霉素、四环素、土霉素、金霉素、强力霉素、林可霉素、 氟苯尼考、丹诺沙星、恩诺环丙沙星、头孢呋、头孢乙腈、头孢氨苄均无交叉反应。 2) 本试剂盒评价结果仅适用于北京柏奥泰科技有限公司的β-内酰胺类药物检测试纸条。