ICS 71.100.40 QB 分类号：Y43 备案号：62763-2018 中华人民共和国轻工行业标准 QB/T5221-2018 牙膏中胡椒碱含量的测定方法 高效液相色谱法 Determination of Piperine in toothpaste- High performance liquid chromatography 2018-02-24发布 2018-07-01实施 中华人民共和国工业和信息化部 发布 QB/T52212018 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由中国轻工业联合会提出。 本标准由全国口腔护理用品标准化技术委员会牙膏分技术委员会（SAC/TC492/SC1）归口。 本标准起草单位：重庆登康口腔护理用品股份有限公司。 本标准主要起草人：黄毅、楼渝蓉、张环、李利伟。 本标准为首次发布。 QB/T52212018 牙膏中胡椒碱含量的测定方法高效液相色谱法 1范围 本标准规定了检测牙膏中胡椒碱含量方法的方法原理、试验方法、精密度、准确度和检出限。 本标准适用于添加功效原料成分胡椒碱的牙膏产品测定。 本标准胡椒碱检出限74ng/mL。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件 GB/T6682一2008分析实验室用水规格和试验方法 3方法原理 取牙膏以乙醇溶解，采用涡旋振荡超声波提取其中的胡椒碱，经离心处理过滤，取上清液用带紫外 检测器或二极管阵列检测器的高效液相色谱仪分析测定，通过峰面积外标法定量计算。 4试验方法 4.1一般规定 除非另有说明，在分析中仅适用确认为分析纯的试剂和水为GB/T6682一2008规定的一级水。 4.2仪器和设备 4.2.1高效液相色谱仪：配紫外检测器或二极管阵列检测器。 4.2.20.45um有机相过滤膜。 4.2.3电子分析天平：精度0.0001g。 4.2.4超声波仪。 4.2.5多联漩涡振荡器。 4.2.6高速离心机≥10000r/min。 4.3试剂 4.3.1 胡椒碱对照品≥98%，CAS号：94-62-2。 4.3.2乙腈（色谱纯）。 4.3.3乙醇（色谱纯） 4.4测定步骤 4.4.1色谱条件 按照表1设定液相色谱条件。 表1液相色谱条件 仪器参数 设定值 紫外检测器 343 nm 二极管阵列检测器 343nm，参比波长450nm 进样量 10 μL 流量 1 mL/min 1 QB/T5221-2018 表1(续) 仪器参数 设定值 流动相（体积比） 乙腈：水=60：40 /色谱柱 Cis4.6mm×250mm，5μm 柱温 35℃ 4.4.2标准购备液 称取胡椒碱对照品10mg，精确至0.0001g，置于10mL容量瓶中， 以无水乙醇定容至刻度，摇均并 使之溶解。此溶液浓度为1000mg/mL，直 置于2℃~4℃保存 4.4.3标准工作溶液 移取上述标准贮备液适量以无水乙醇稀释配制标准工作系列溶液，浓度分别为1mg/L、2mg/L、 5mg/L、10mg/L、20 mg/L 4.4.4样品溶液的制备 称取牙膏1g（精确至0.0001g）于50mL尖嘴平底离心管中，加磁力转子1枚，再以移液管加8mL 无水乙醇，以多联漩涡混匀器1500r/min振荡5min， ，再超声提取30min，在8000r/min离心10min，将上 清液过0.45um有机膜。 4.4.5标准溶液的测定 准确吸取上述标准工作溶液各10μL，分别注入液相色谱仪，按照表1色谱条件进行测定，谱图参照 （图A.1）。以胡椒碱的浓度为X轴，以其相应的峰面积为Y轴，绘制标准曲线。 4.4.6样品溶液的测定 准确吸取10μL样品溶液，注入液相色谱仪测定其峰面积，谱图参照（图A.2），由标准曲线计算试 样溶液中胡椒碱的浓度。 4.4.7结果计算 按式（1）计算样品中胡椒碱的含量（X）： ,1000 (1) 1000 m 式中： 牙膏中胡椒碱含量， 单位为毫克每千克（mg/kg） 大 由标准曲线查出试样溶液中胡椒碱的浓度，单位微克每亳升（ug/mL） 样品最终定容体积，单位为毫升（mL）； V 一试样质量，单位为克（g）； m- N稀释倍数： K一胡椒碱对照品的纯度 4.4.8 精密度、准确度和检出限 测定相对标准偏差应小于5%（n=6）。在添加浓度5mg/kg～15mg/kg范围内，回收率范围应在 98.04%~105.47%。方法检出限74ng/mL。 2 QB/T5221-2018 附录A （资料性附录） 液相色谱参考谱图 IAU 70 - C9 50 - 花 40 - 33 - 20 10 - 图A.1 胡椒碱对照品色谱图 mAUJ 500- 胡 400 309 I 200- 100 图A.2牙膏样品中胡椒碱色谱图 3