ICS 11.020 C 50 WS 中 华 人 民 共 和 国 卫生行 业 标 准 WS/T 662—2020 临床体液检验技术要求 Technical requirements for clinical body fluids analysis 2020 - 03 - 26发布 2020 - 10 - 01实施 中华人民共和国国家卫生健康委员会 发布 WS/T 662—2020 1 前 言 本标准按照 GB/T 1.1 -2009给出的规划起草。 本标准主要起草单位： 国家卫生健康委 临床检验中心、 上海交通大学医学院附属仁济医院 、上海中 医药大学附属龙华医院、同济大学附属杨浦医院、云南省临床检验中心、 北京大学人民医院 、中山大学 附属第一医院、四川大学华西医院。 本标准主要起草人：彭明婷、熊立凡、胡晓波、周文宾、李臣宾、李智、牛华、王辉、姜傥、粟军。 WS/T 662—2020 2 临床体液检验技术要求 1 范围 本标准规定了脑脊液、浆膜腔积液、关节腔积液、粪便、精液和阴道分泌物等体液标本临床检验的 技术要求。 本标准适用于开展上述类型体液标本检 测的临床实验室。 2 脑脊液检验技术要求 2.1 标本采集、转运和贮存 2.1.1 实验室应与临床共同讨论并 制订脑脊液标本采集和处理的标准操作程序。 2.1.2 临床医生应在申请单上注明脑脊液标本采集部位（如腰椎或脑室）的相关信息 。 2.1.3 脑脊液标本采集宜使用无菌试管 （用于细胞学检查的标本不宜使用玻璃材质的容器） ，若能采 集足量标本，应将其分装至 3～4支试管，每管 宜取3 mL～5 mL，一般无需使用抗凝剂。 2.1.4 第1管用于化学和免疫学 检查（如蛋白质、葡萄糖等 ），第2管用于微生物 学检查， 第3管用 于细胞计数和分类 计数。如需要做其它检查（ 细胞病理学检查等），宜采集第 4管标本。若第 1管混有 穿刺出血，不可用于以蛋白质检查作为主要依据的疾病诊断（如多发性硬化症）。 2.1.5 若无法采集足量标本，可不进行分装，由医生决定检查项目；若需要进行微生物学检查，宜优 先进行，再尽快进行其他检查 。 2.1.6 脑脊液标本 应在室温条件下 尽快运送 ，细胞计数和分类计数宜在 1 h内完成检查，以免细胞破 损。只有用于蛋白质和核酸分析的标本，可贮存于冷冻条件下（ —20 ℃以下）。 2.1.7 脑脊液微生物学检查标本不可冷藏，在室温条件下立即送检或在患者床旁接种。 2.2 理学检查 脑脊液理学检 查主要包括颜色 、透明度和凝固性 等。实验室应规 定脑脊液理学检查指标描述 和报告 的规范用语。 2.3 化学和免疫学检查 2.3.1 脑脊液化学检查主要包括葡萄糖、蛋白质、 氯化物、酶学测定 和蛋白电泳 等，免疫学检查主要 包括免疫球蛋白、髓鞘碱性蛋白测定等 。 2.3.2 实验室应注意各项目不同原理检测方法的灵敏度和特异度差异，选择适宜的方法开展检测。 2.3.3 进行脑脊液葡萄糖、白蛋白和免疫球蛋白测定时，宜同时检测血清中的相应物质，计算脑脊液 /血清葡萄糖比值、脑脊液 /血清白蛋白商（ Qalb）、脑脊液 /血清 IgG商（ QIgG）及 IgG指数（即 QIgG与 Qalb比值）。 WS/T 662—2020 3 2.4 细胞学检查 2.4.1 手工法细胞计数 2.4.1.1 宜使用标注 容积的血细胞定量计数板进行细胞计数，包括细胞总数、红细胞 计数、有核细胞 计数和有核细胞分类计数。 2.4.1.2 外观正常的标本无需稀释，浑浊和血性标本需进行 1:10～1:200倍稀释，稀释倍数甚至更高 （需要时）。进行细胞计数时可使用等渗盐水稀释标本；进行有核细胞计数时，可使用 3%冰醋酸对标 本进行处理。 2.4.1.3 细胞计数按以下程序进行： a) 将标本充分混匀， 充液前可用旋转式搅拌 器混匀（时间不能超过 2 min～5 min）或手工颠倒混 匀10～15次，避免过度震荡造成细胞破损，也不能产生气泡 。 b) 分别吸取少量充分混匀的标本 ， 充入计数板两侧的计数池 （应确保计数板洁净 ）， 静置 5 min～ 10 min（时间长短取决于细胞沉淀的效果） 。 c) 使用低倍镜（ 10×）浏览细胞分布情况，细胞分布应均匀（每个大方格内细胞数量相差宜不超 过10个），细胞应 无重叠，否则宜重新充 液。 d) 在高倍镜（ 40×）下选择合适的区域尽快进行细胞计数。 每个计数池细胞计数区域的确定原则 是：若初步估计 9个大方格中细胞数少于 200个， 则计数 9个大方格（计数区域相当于 9mm2）； 若估计 9个大方格中细胞数大于 200个，则计数 4个角的大方格（计数区域相当于 4mm2）； 若估计 1个大方格中细胞数大于 200个，则计数中央大方格内 4个角和中央 1个中方格 （计数 区域相当于 0.2mm2）。计数压线细胞时，应遵循 “数上不数下，数左不数右 ”的原则。 2.4.1.4 红细胞计数和有核细胞计数宜在同一计数池中完成， 取两个计数池计数结果的均值进行报告。 2.4.2 仪器法细胞计数 仪器法细胞计数的要求见附录 A。 2.4.3 细胞形态学检查 2.4.3.1 应在标本采集后 4 h内完成细胞涂片，若超过 4 h，结果报告时宜标注“细胞分类计数结果可 能不可靠”。 2.4.3.2宜使用细胞离心 涂片机（细胞 甩片机）制备涂片 进行细胞 形态学检查， 滴加标本前先向甩片机 的标本室中加入 1滴22%白蛋白溶液（无菌）， 可增强细胞对 载玻片的粘附性。 2.4.3.3 涂片制备 后应置于室温 条件自然晾干， 宜进行改良瑞氏染色 。 2.4.3.4 进行细胞形态检查时，应能 正确识别：成熟红细胞 、有核红细胞 ；中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、 嗜碱性粒细胞、 肥大细胞；淋巴细胞 、反应性淋巴细胞、 浆细胞； 单核细胞 、巨噬细胞 ；脑室内衬细胞、 柔脑膜细胞； 恶性肿瘤细胞 （原始细胞、淋巴瘤细胞、 非造血系统肿瘤细胞等 ）；细菌、真菌和寄生虫 等。 2.4.3.5 应对有核细胞 （包括各类造血细胞、内衬细胞、肿瘤细胞和非典 型细胞） 进行分类计数，计数 结果以百分比报告。细胞类型 无法确定时， 可将其归入 “非典型细胞 ”，并在报告 中加以描述。 2.4.3.6 怀疑恶性肿瘤时，应全片 查找肿瘤细胞 ，发现疑似肿瘤 细胞时应及时通知临床 进一步做 细胞病 理学检查。 2.5 病原学检查 WS/T 662—2020 4 2.5.1 涂片检查 对混浊或脓性脑脊液可直接涂片，染色镜检。对无色透明或无明显混浊的脑脊液，应使用细胞离心 涂片机（细胞甩片机）离心。将 脑脊液标本离心取沉淀物进行涂片 ，经革兰染色查找 肺炎链球菌 、葡萄 球菌和链球菌等，亚甲蓝 染色查找脑膜炎奈瑟菌，抗酸染色 查找结核分枝 杆菌，墨汁染色查找隐球 菌。 对于疑似寄生虫感染的患者，应注意查找吸虫卵、阿米巴滋养体和绦虫囊尾蚴等。 2.5.2 病原体培养 选择合适的培养基、培养条件进行普通细菌、苛养菌、结核分枝杆菌或真菌培养，临床怀疑脑脓肿 时宜进行厌氧菌培养。所有进行培养的脑脊液宜同时进行病原菌的涂片检查。 2.5.3 抗原检测 可检测脑膜炎奈瑟菌、肺炎链球菌、 隐球菌等病原菌 抗原，检测结果宜与涂片检查和病原培养结果 一起解释， 脑脊液隐球菌抗原阳性有确诊意义；其他抗原阳性是重要诊断提示，宜结合病史、临床表现、 脑脊液其他检查（细胞学、涂片和培养、化学等）综合判断。 2.5.4 核酸检测 必要时，实验 室可采用 PCR等分子生物学 方法检测结核分枝杆菌、脑膜炎奈瑟菌等病原菌核酸。 3 浆膜腔积液检验技术要求 3.1 标本采集、转运和贮存 3.1.1 浆膜腔积液包括胸水、腹水、心 包腔积液等，实验室应与临床共同制订标本采集和处理的标准 操作程序，并向临床提供正确的标本采集容器和抗凝剂（必要时）。不同检查项目的标本采集要求见表 1。 表1 浆膜腔积液标本采集要求 检查项目 抗凝剂的选用 推荐采集 标本量 （mL） 细胞计数和分类计数 乙二胺四乙酸（ EDTA） 5～8 总蛋白、乳酸脱氢酶、葡萄糖、淀 粉酶 肝素或不使用抗凝剂 8～10 革兰染色涂片检 查、细菌培养 多聚茴香脑磺酸钠（ SPS）、不使用抗凝剂、 无灭菌或抑菌作用的抗凝剂 8～10 抗酸杆菌培养 多聚茴香脑磺酸钠（ SPS）、不使用抗凝剂、 无灭菌或抑菌作用的抗凝剂 15～50 细胞病理学检查 不使用抗凝剂、肝素、乙二胺四乙酸（ EDTA） 5～50 WS/T 662—2020 5 3.1.2 标本应在室温条件下尽快送检 ；细胞计数和分类计数的标本 应尽快检测， 若无法及时检测， 染 色后的标本置于 2 ℃～8 ℃条件下保存，宜48 h内完成检测 。 3.2 理学检查 浆膜腔积液理学检 查主要包括 颜色、透明度和凝固性等。实验室应规定浆膜腔积液理学 检查指标描 述和报告的规范用语。 3.3 化学和免疫学检查 3.3.1 浆膜腔积液化学检查主要包括蛋白质、乳酸、葡萄糖和酶学测定等；免疫学检查主要包括肿瘤 标志物、免疫球蛋白测定等。 3.3.2 葡萄糖测定应在 标本采集后 1 h内完成，无法及时检测的