中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 5309 —2021 食品接触材料 高分子材料 食品模拟物中壬基酚和辛基酚的测定 液相色谱 - 串联质谱法 Food contact materials Polymers Determination of nonylphenol and octylphenol in food simulants Liquid chromatography -mass spectrometry method 2021 -11-22发布 2022 -06-01 实施ICS 67.250 C 53 中华人民共和国海关总署 发 布SN/T 5309—2021前 言 本文件按照 GB/T 1.1— 2020《标准化工作导则 第 1 部分：标准化文件的结构和起草规则》的规 定起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由中华人民共和国海关总署提出并归口。 本标准负责起草单位：中华人民共和国广州海关。本标准主要起草人：陈燕芬、陈胜、潘静静、曾莹、贝荣华、马宁宁、黎梓城、李丹、钟怀宁、 韦晓群、钟玉清、郑建国。 I1 SN/T 5309—2021食品接触材料 高分子材料 食品模拟物中壬基酚和辛基酚的测定 液相色谱 -串联质谱法 1 范围 本标准规定了多种食品模拟物中壬基酚和辛基酚的含量测定。 本标准适用于高分子材料食品模拟物中壬基酚和辛基酚的液相色谱 -串联质谱法的测定。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文 件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适 用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规范和试验方法GB 5009.156 食品安全国家标准 食品接触材料及制品迁移试验预处理方法通则GB 31604.1 食品安全国家标准 食品接触材料及制品迁移试验通则 3 原理 食品接触材料根据 GB 31604.1 进行迁移试验后，食品模拟物中的壬基酚、辛基酚采用液相色谱 - 串联质谱法测定，其中水基、酸性、酒精类食品模拟物直接测定，异辛烷浓缩后甲醇定容后进样，外标法定量。 4 试剂和材料 除另有规定外，所用试剂均为分析纯。水为符合 GB/T 6682 规定的一级水。 4.1 溶剂和标准品 4.1.1 冰乙酸。 4.1.2 无水乙醇。 4.1.3 异辛烷。 4.1.4 甲醇，色谱纯。 4.1.5 4 -壬基酚（4 -NP，直链的壬基在苯环的对位上，CAS 号：104 -40-5） ：纯度≥ 99.6%，或经国 家认证并授予标准物质证书的标准品。 4.1.6 壬基酚（NP，壬基在苯环上异构体的混合物， CAS 号：25154 -52-3） ：纯度 100%，或经国家 认证并授予标准物质证书的标准品。4.1.7 4 -辛基酚（4 -t-OP，辛基在苯环上异构体的混合物，CAS 号：140 -66-9） ：纯度≥ 98.5%，或 经国家认证并授予标准物质证书的标准品。 4.1.8 辛基酚（4 -n-OP，直链的辛基在苯环的对位上，CAS 号：1806 -26-4） ：纯度≥ 99.5%，或经国 家认证并授予标准物质证书的标准品。2 SN/T 5309—20214.2 混合标准储备液的配制 分别准确称取 4 -壬基酚、壬基酚、4 -辛基酚和辛基酚四种标准品 0.1 g（精确到 0.1 mg）于容 量瓶中，用甲醇定容至 100 mL，标准储备液中四种目标物质的浓度均为 1000 mg/L。标准储备液在 0℃ ~5℃下避光保存，有效期为 12 个月。 4.3 混合标准中间液的配制 准确移取标准储备液（4.2）0.01 mL 于容量瓶中，甲醇定容至 10 mL，标准中间液中四种目标物 质的浓度均为 10 mg/L。标准中间液在 0℃ ~5℃下避光保存，有效期为 6 个月。4.4 食品模拟物的标准工作溶液配制 准确移取混合标准中间液（4.3）0 mL、0.01 mL、0.05 mL、0.1 mL、0.5 mL、1.0 mL、2.0 mL 于 100 mL 的容量瓶中，用对应的食品模拟物定容至刻度。食品模拟物标准工作溶液中浓度分别为 0.00 mg/L、 0.001 mg/L、0.005 mg/L、0.01 mg/L、0.05 mg/L、0.10 mg/L、0.20mg/L。标准工作液在 0℃ ~5℃下避光保存， 有效期为 3 个月。 5 仪器和设备 5.1 液相色谱 -串联质谱仪：配电喷雾离子源（ESI） 。 5.2 分析天平：感量 0.1mg。 5.3 涡旋振荡器。 5.4 有机微孔滤膜：0.22 μm。 5.5 氮气浓缩工作站。 6 分析步骤 6.1 样液制备 6.1.1 浸泡液 按照 GB 5009.156— 2016 的要求，配制 4% 乙酸、10% 乙醇、20% 乙醇、50% 乙醇溶液和 95% 乙醇，按照 GB 31604.1— 2015 的要求对样品进行浸泡，获取浸泡液。 6.1.2 水基、酸性、酒精类食品模拟试物 移取迁移试验后得到的浸泡液约 1 mL，通过 0.22 μm 微孔滤膜过滤后，为待测溶液。 6.1.3 化学替代溶剂（异辛烷） 准确移取迁移试验后得到的浸泡液 1mL 于试管中，在 60℃下氮气吹干，准确加入 1mL 甲醇，涡 旋振荡 0.5min，溶液经过 0.22 μm 微孔滤膜过滤后，为待测溶液。 6.2 空白试验 取未与食品接触材料及制品接触的水基、酸性、酒精类食品模拟物按 6.1.2 处理，异辛烷按照 6.1.3 处理，过滤后所得为空白待测溶液。3 SN/T 5309—20216.3 测定 6.3.1 LC 分析条件 LC 分析条件如下： a）色谱柱：C18 柱，柱长 150 mm，柱内径 2.1 mm，粒径 2.7 μm，或同等性能的色谱柱。 b）流动相：甲醇 -水（90+10，体积比） c）流速：0.2 mL/mind）柱温：40 ℃ e）进样量：5 μL f）时间：6min 6.3.2 质谱条件 质谱条件如下：a）离子化模式：电喷雾电离负离子模式（ESI -）。 b）质谱扫描模式：多反应检测（MRM） 。 c）鞘气：250℃。d）鞘气流速：11L/min。 e）喷雾电压： -4000 V。 f）辅助气温度：350 ℃。g）雾化气：20 psi。 h）其他质谱参数参见附录 A。 6.3.3 定性定量分析和标准工作曲线的绘制 按 6.3 所述条件，对试样溶液（见 6.1.2、6.1.3） 、空白溶液（见 6.2）依次进行测定，得到目标物 峰面积，扣除空白值。根据样液中目标物的浓度，选定浓度相近的标准工作溶液进行测定，以标准系列工作液中的目标物浓度为横坐标，以定量离子峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，得到线性方程，对试样进行定量分析。混合标准溶液的色谱图参见附录 B。 在相同的测试条件下，样品中待测物与标准物质的保留时间相同，且样品图谱中各组分定性离 子的相对丰度与浓度接近的混合标准标准溶液的相对丰度偏差不超过表 1 的规定，则可判断样品中存在相应的待测物。 表 1 定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差 相对离子丰度 /% ＞50 20~50 10~20 ＜10 允许的相对偏差 /% ±20 ±25 ±30 ±50 注：如果试样的浓度超过标准工作曲线，也可对试样进行适当地稀释后再测定。 6.4 结果计算和表示 由标准曲线得到的试液中目标物的浓度，计算得到食品接触材料中模拟物的壬基酚和辛基酚的 含量，计算结果保留两位有效数字。 7 检出限和定量限 本方法对水基、酸性、酒精类、油基食品模拟物中 4 -壬基酚、壬基酚的检出限均为 0.001 mg/kg，4 SN/T 5309—2021定量限均为 0.005 mg/kg ；4 -辛基酚和辛基酚检出限均为 0.0005 mg/kg，定量限均为 0.001 mg/kg。 8 精密度 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过其算术平均值的 20%。