SN-T 4653-2016 出口中药材中氨基甲酸酯类农药残留量的检测方法液相色谱-质谱-质谱法

书书书　中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛犖／犜４６５３—２０１６出口中药材中氨基甲酸酯类农药残留量的检测方法　液相色谱 质谱／质谱法犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳犮犪狉犫犪犿犪狋犲狉犲狊犻犱狌犲狊犻狀犆犺犻狀犲狊犲犺犲狉犫犪犾犿犲犱犻犮犻狀犲犳狅狉犲狓狆狅狉狋—犔犆  犕犛／犕犛犿犲狋犺狅犱２０１６０８２３发布２０１７０３０１实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布 rHgCb@g · ykbûR60u5[PO 0SÑU.书书书前　　言　　本标准按照为ＧＢ／Ｔ１．１—２００９给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国上海出入境检验检疫局。本标准主要起草人：杨惠琴、时逸吟、盛永刚、樊彦莉、伊雄海、邓晓军、朱坚。 Ⅰ犛犖／犜４６５３—２０１６ rHgCb@g · ykbûR60u5[PO 0SÑU.出口中药材中氨基甲酸酯类农药残留量的检测方法　液相色谱 质谱／质谱法１　范围本标准规定了中药材中灭多威、异丙威、西维因、仲丁威、猛杀威、残杀威、克百威、恶虫威、灭蚜威、灭虫威、３ 羟基克百威和抗蚜威残留量的液相色谱 质谱／质谱测定方法。本标准适用于出口济银花、苏叶、杭菊、甘草、山楂、白芷、黄连、枸杞、人参、红花中灭多威、异丙威、西维因、仲丁威、猛杀威、残杀威、克百威、恶虫威、灭蚜威、灭虫威、３ 羟基克百威和抗蚜威残留量的确证和定量测定。２　规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。ＧＢ／Ｔ６６８２　分析实验室用水规格和试验方法３　方法提要采用乙腈提取，ＡＳＥ萃取试样中残留的氨基甲酸酯类农药，提取液经石墨化炭黑／氨基固相萃取柱净化，液相色谱 质谱／质谱测定和确证，外标法定量。４　试剂材料除非另有说明，所用试剂均为分析纯，水为符合ＧＢ／Ｔ６６８２规定的一级水。４．１　乙腈：色谱纯。４．２　甲苯：色谱纯。４．３　甲酸：色谱纯。４．４　乙酸铵：优级纯。４．５　海砂。４．６　５ｍｍｏｌ／Ｌ乙酸铵水溶液（含０．１％甲酸）：准确称取０．３８５ｇ乙酸铵，加入１ｍＬ甲酸，用水溶解并转移至１０００ｍＬ容量瓶中，定容至刻度。４．７　乙腈溶液（含０．１％甲酸）：１ｍＬ甲酸溶解于乙腈中，转移至１０００ｍＬ容量瓶，定容至刻度。４．８　乙腈甲苯混合液（３＋１，体积比）：量取１００ｍＬ甲苯，加入３００ｍＬ乙腈，混匀备用。４．９　农药标准物质：灭多威ｍｅｔｈｏｍｙｌ，ＣＡＳ号：１６７５２  ７７  ５；异丙威ｉｓｏｐｒｏｃａｒｂ，ＣＡＳ号：２６３１  ４０  ５；西维因ｃａｒｂａｒｙｌ，ＣＡＳ号：６３  ２５  ２；仲丁威ｆｅｎｏｂｕｃａｒｂ，ＣＡＳ号：３７６６  ８１  ２；猛杀威ｐｒｏｍｅｃａｒｂ，ＣＡＳ号：２６３１  ３７  ０；残杀威Ｐｒｏｐｏｘｕｒ，ＣＡＳ号：１１４  ２６  １；克百威ｃａｒｂｏｆｕｒａｎ，ＣＡＳ号：１５６３  ６６  ２；恶虫威ｂｅｎｄｉｏ ｃａｒｂ，ＣＡＳ号：２２７８１  ２３  ３；灭蚜威ｅｔｈｉｏｎｆｅｎｃａｒｂ，ＣＡＳ号：２９９７３  １３  ５；灭虫威ｍｅｔｈｉｏｃａｒｂ，ＣＡＳ号：２０３２  ６５  ７；３ 羟基克百威ｃａｒｂｏｆｕｒａｎ  ３  ｈｙｄｒｏｘｙ，ＣＡＳ号：１６６５５  ８２  ６；抗蚜威ｐｉｒｉｍｉｃａｒｂ，ＣＡＳ号：２３１０３  ９８  ２纯度均大于９８％。１犛犖／犜４６５３—２０１６ rHgCb@g · ykbûR60u5[PO 0SÑU.４．１０　标准储备液的配制：分别准确称取适量的标准物质（４．９），用乙腈配制成浓度为１．０ｍｇ／ｍＬ的标准储备溶液。该溶液在－１８℃冰箱中保存，有效期为１个月。４．１１　混合标准中间溶液的配制：分别准确移取一定体积的标准储备液（４．１０），用乙腈稀释成１０．０μｇ／ｍＬ的混合标准中间工作液，现配现用。４．１２　混合标准工作溶液的配制：分别移取适量混合标准中间工作溶液（４．１１），用空白样品基质溶液配成适当浓度的混合标准工作溶液，现用现配。４．１３　石墨化炭黑／氨基固相萃取柱：６ｍＬ，５００ｍｇ或相当者。４．１４　微孔滤膜：０．４５μｍ，有机滤膜。５　仪器与设备５．１　液相色谱 质谱／质谱仪：配有电喷雾离子（ＥＳＩ）。５．２　加速溶剂萃取仪：配有３３ｍＬ萃取池，或相当者。５．３　电子天平：感量分别为０．０１ｇ，０．００１ｇ。５．４　固相萃取装置。５．５　氮吹仪。５．６　涡漩混匀器。５．７　旋转蒸发仪。５．８　研钵。５．９　圆底烧瓶：２５０ｍＬ。５．１０　聚四氟乙烯试管：５０ｍＬ。５．１１　刻度玻璃试管：１５ｍＬ。６　试样的制备与保存６．１　试样制备取代表性样品５００ｇ，全部粉碎后混匀，均分成两份试样，装人洁净的容器内，密封并标明标记。６．２　试样保存试样于常温状态下保存。注：在抽样及制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。７　分析步骤７．１　提取称取约２．０ｇ样品（精确至０．０１ｇ）于聚四氟乙烯试管中，加入适量的海砂后转移入研钵拌匀后，装入３３ｍＬ加速溶剂萃取池，用乙腈作为提取溶剂，按设定的提取程序运行：温度８０℃，压强１５００ｐｓｉ，加热５ｍｉｎ，静态萃取５ｍｉｎ，循环１次。然后用池体积６０％的乙腈冲洗萃取池，并用氮气吹扫６０ｓ。提取完成后，将提取液收集于圆底烧瓶中，３５℃水浴中旋转蒸发至１ｍＬ。注：上述所列加速溶剂萃取仪参数是在ＡＳＥ２００上完成的，仅供参考。７．２　净化用１０ｍＬ乙腈甲苯混合溶液（４．８）活化石墨化碳黑／氨基小柱，弃去淋洗液。将上述的提取液２犛犖／犜４６５３—２０１６ rHgCb@g · ykbûR60u5[PO 0SÑU.（７．１）转移至小柱中过柱，并用１０ｍＬ乙腈甲苯混合溶液（４．８）洗脱（在整个活化、上样和洗脱过程中应避免ＳＰＥ柱干涸）。收集洗脱液于１５ｍＬ刻度试管中并于４０℃下氮吹浓缩至近干，准确加入５．０ｍＬ５ｍｍｏｌ／Ｌ乙酸铵水溶液（含０．１％甲酸）（４．６）溶解残渣，过０．４５μｍ有机滤膜，供液相色谱 质谱／质谱仪检测。７．３　测定７．３．１　液相色谱条件液相色谱条件如下：ａ）　色谱柱：Ｃ１８色谱柱，长５０ｍｍ，内径４．６ｍｍ，粒径１．８μｍ，或相当者；ｂ）　柱温：３０℃；ｃ）　流速：０．４ｍＬ／ｍｉｎ；ｄ）　进样量：２０μＬ；ｅ）　流动相：Ａ：乙腈（含０．１％甲酸），Ｂ：５ｍｍｏｌ／Ｌ乙酸铵水溶液（含０．１％甲酸）；梯度洗脱程序见表１。表１　流动相、流速及梯度洗脱条件时间ｍｉｎ流速ｍＬ／ｍｉｎ流动相Ａ％流动相Ｂ％００．４０５９５２０．４０５９５７０．４０９５５１２．００．４０９５５１２．１０．４０５９５７．３．２　质谱条件质谱条件如下：ａ）　电离方式：电喷雾电离（ＥＳＩ）；ｂ）　扫描方式：正离子模式；ｃ）　质谱扫描方式：多反应监测（ＭＲＭ）；其他参考质谱条件见附录Ａ。７．３．３　液相色谱 质谱／质谱测定７．３．３．１　定性测定在相同实验条件下，样品中待测物质的保留时间，与基质标准溶液的保留时间偏差在 ±２．５％之内；每种化合物的质谱定性离子至少应包括一个母离子和两个子离子，且样品中各组分定性离子的相对丰度与浓度接近的基质混合标准工作溶液中对应的定性离子的相对丰度进行比较，偏差不超过表２规定的范围，则可判定为样品中存在对应的待测物。表２　定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差相对离子丰度＞５０％＞２０％～５０％＞１０％～２０％ ≤１０％允许的最大偏差 ±２０％ ±２５％ ±３０％ ±５０％３犛犖／犜４６５３—２０１６ rHgCb@g · ykbûR60u5[PO 0SÑU.７．３．３．２　定量测定在仪

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