SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 2101—2016 代替SN/T2101—2008 出口乳及乳制品中结核分枝杆菌检测方法 荧光定量PCR法 Determination of Mycobacterium tuberculosis in milk and dairy products for exportReal-time PCR method 行业标准信息服务平台 2016-03-09发布 2016-10-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 中华人民共和国出人境检验检疫 行业标准 出口乳及乳制品中结核分枝杆菌检测方法 V荧光定量PCR法 SN/T 2101-2016 中国标准出版社出版 北京市朝阳区和平里西街甲2号（100029） 务平台 北京市西城区三里河北街16号（100045） 总编室：（010)68533533 网址www.spc.net.cn 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷 * 开本880×1230 01/16 印张0.75字数16千字 2016年9月第一版2016年9月第一次印刷 印数1-1100 * 书号：155066：2-30484 定价16.00元 SN/T 2101—2016 前言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 本标准代替SN/T2101—2008《乳及乳制品中结核分枝杆菌检测方法 荧光定量PCR法》。 本标准与SN/T2101—2008相比，主要变化如下： 修改了乳及乳制品中提取结核分枝杆菌的乳液处理办法； ——增加了确证实验； 修改了附录B。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国辽宁出人境检验检疫局。 本标准主要起草人：吴斌、王刚、徐凤敏、刘钊、于畅、贾赞。 本标准所代替标准的历次版本发布情况为： -SN/T2101—2008。 行业标准信息服务平台 1 SN/T 2101—2016 出口乳及乳制品中结核分枝杆菌检测方法 荧光定量PCR法 1范围 本标准规定了乳及乳制品中牛型结核分枝杆菌和人型结核分枝杆菌荧光PCR检测的操作方法。 本标准适用于鲜乳、乳粉中结核分枝杆菌的检测，其他乳制品可参照执行。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T18645动物结核病诊断技术 GB19489实验室生物安全通用要求 GB/T19495.2—2004转基因产品检测 J实验室技术要求 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 实时荧光PCRreal-timefluorescentPCR 在普通聚合酶链反应的基础上，加人一条特异性的荧光探针。该探针为一寡核苷酸，两端分别标记 一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收，PCR 扩增时，Taq酶的5'3'外切酶活性将探针酶切降解，使报告基团和淬灭基团分离，从而荧光监测系统可 接收到荧光信号，即每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与PCR产物 形成完全同步。 3.2 Ct 值cycle threshold 服务平台 每个反应管内的荧光信号达到设定的阈值时所经历的循环数 3.3 Triton X-100 一种非离子型去垢剂。 4材料和试剂 4.1 仪器和器材 4.1.1荧光PCR检测仪。 4.1.2 高速台式冷冻离心机：0~20000r/min。 4.1.3 普通台式离心机。 1