书书书　 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 犛 犖／犜４ ５ ９ １—２ ０ １ ６ 出口水果蔬菜中脱落酸等 ６ ０种农药残留量的测定 　液相色谱 质谱／质谱法 犇 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳 ６ ０狆犲 狊 狋 犻 犮 犻 犱 犲狉 犲 狊 犻 犱 狌 犲 狊 犻 狀 犮 犾 狌 犱 犻 狀 犵犪 犫 狊 犮 犻 狊 犻 犮犪 犮 犻 犱犻 狀犳 狉 狌 犻 狋 狊犪 狀 犱狏 犲 犵犲 狋 犪 犫 犾 犲 狊犳 狅 狉犲 狓 狆狅 狉 狋—犔 犆  犕 犛／犕 犛犿 犲 狋 犺 狅 犱 ２ ０ １ ６０ ８２ ３发布 ２ ０ １ ７０ ３０ １实施 中 华 人 民 共 和 国 国家质量监督检验检疫总局发 布 rHgCb@g · ykbûR60
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SÑU.书书书前　　言 　　本标准按照 Ｇ Ｂ／Ｔ１． １—２ ０ ０ ９给出的规则起草 。请注意本文件的某些内容可能涉及专利 。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任 。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口 。本标准起草单位 ：中华人民共和国漳州出入境检验检疫局 、中华人民共和国厦门出入境检验检疫局。本标准主要起草人 ：王连珠、陈泳、王瑞龙、王登飞、徐敦明、周昱。 Ⅰ犛 犖／犜４ ５ ９ １—２ ０ １ ６ rHgCb@g · ykbûR60
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SÑU.出口水果蔬菜中脱落酸等 ６ ０种农药残留量的测定 　液相色谱 质谱／质谱法 １　范围 本标准规定了水果蔬菜中脱落酸 、对氯苯氧乙酸 （４  Ｃ Ｐ Ａ） 、２ 甲 ４ 氯苯氧乙酸 （ＭＣ Ｐ Ａ） 、２ （４ 氯苯氧基）丙酸（４  Ｃ Ｐ Ｐ） 、２ 萘氧乙酸 、２ 甲 ４ 氯苯氧基丙酸 （ＭＣ Ｐ Ｐ） 、２，４ 二氯苯氧乙酸 （２，４  Ｄ） 、噻苯隆、６ 苄氨基嘌呤 、２ 甲 ４ 氯苯氧基丁酸 （ＭＣ Ｐ Ｂ） 、２，４ 滴丙酸、地乐酚、特乐酚、苯达松、氯吡脲、２，４，５ 三氯苯氧乙酸（２，４，５  Ｔ） 、氟草烟、绿草定、五氯苯酚 、噻酰菌胺 、２，４，５ 涕丙酸、环丙酸酰胺 、溴苯腈、甲基咪草烟、咪草烟、抑草生、环酰菌胺 、甲氧咪草烟 、灭幼脲、除虫脲、灭草喹、麦草氟、氯甲酰草胺 、嘧草硫醚 、氟草灵、恶唑禾草灵 、氟吡草腙 、喹禾灵、氟幼脲、赤霉酸（ＧＡ３） 、氨磺乐灵 、杀铃脲、双氟磺草胺 、三氟羧草醚、吡氟氯禾灵 、碘苯腈、氟苯脲、磺菌胺、双草醚、氟虫腈、氟磺胺草醚 、氟铃脲、氟啶胺、氟虫脲、氟酰脲、啶蜱脲、虱螨脲、噻呋菌胺 、氟啶脲、氟虫双酰胺 ６ ０种农药残留量的液相色谱 质谱／质谱检测方法 。本标准适用于苹果 、桃子、大葱、西红柿、西兰花、菠菜、芦笋、荷兰豆、胡萝卜、香菇、橙、葡萄、猕猴桃中上述６ ０种农药残留量的筛选检测 。 ２　规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的 。凡是注日期的引用文件 ，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件 ，其最新版本 （包括所有的修改单 ）适用于本文件 。 Ｇ Ｂ／Ｔ６ ６ ８ ２　分析实验室用水规格和试验方法 ３　方法提要 样品中残留的农药采用含 １％乙酸的乙腈溶液提取 ，经无水硫酸镁及乙酸钠盐析分层 ，提取液经无水硫酸镁 、Ｃ１ ８固相吸附剂分散固相萃取净化 ，液相色谱 质谱／质谱检测和确证 ，基质匹配标准曲线外标法定量。 ４　试剂和材料 除特殊注明外 ，所有试剂均为分析纯 ，水为Ｇ Ｂ／Ｔ６ ６ ８ ２规定的一级水 。 ４．１　乙腈：液相色谱纯 。 ４．２　甲酸：液相色谱纯 。 ４．３　乙酸：液相色谱纯 。 ４．４　无水乙酸钠 。 ４．５　无水硫酸镁 ：５ ５ ０℃灼烧４ｈ，在干燥器内冷却至室温 ，贮于密封瓶中备用 。 ４．６　Ｃ１ ８固相吸附剂 ：粒径４ ０μｍ～６ ０μｍ。 ４．７　１％乙酸乙腈：１ ０ｍＬ乙酸（４． ３）加９ ９ ０ｍＬ 乙腈（４． １）混匀。 ４．８　０． １％甲酸水溶液 ：移取１． ０ｍＬ 甲酸（４． ２）加入１０ ０ ０ｍＬ 水中，摇匀备用 。 ４．９　０． １％甲酸乙腈：移取１． ０ｍＬ 甲酸（４． ２）加入１０ ０ ０ｍＬ 乙腈（４． １）中，摇匀备用 。 １犛 犖／犜４ ５ ９ １—２ ０ １ ６ rHgCb@g · ykbûR60
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SÑU.４．１ ０　６ ０种农药标准品 ：纯度大于或等于 ９ ７％，见表Ａ． １。 ４．１ １　标准储备溶液 ：准确称取适量标准物质 ，分别以乙腈配制浓度为 １ ０ ０μｍ／ｍＬ的各个农药标准溶液，－１ ８℃避光保存 。 ４．１ ２　混合标准溶液 ：以乙腈配制氟虫腈浓度为 ０． ２μｇ／ｍＬ、其他５ ９种农药浓度为 １． ０μｇ／ｍＬ的６ ０种农药混合标准溶液 ，０℃～４℃避光保存 。 ４．１ ３　混合标准工作溶液 ：吸取适量的上述混合标准溶液 ，用空白样品基质配制成适当浓度的混合标准工作溶液 ，现配现用 。 ４．１ ４　微孔滤膜 ：０． ２μｍ，有机型。 ５　仪器和设备 ５．１　高效液相色谱 串联质谱仪 ，配电喷雾离子源 （Ｅ Ｓ Ｉ） 。 ５．２　电子天平 ：感量（０． １ｍｇ和０． ０ １ｇ） 。 ５．３　组织捣碎机 。 ５．４　高速均质器 ：８０ ０ ０ｒ／ｍ ｉ ｎ。 ５．５　离心机：４０ ０ ０ｒ／ｍ ｉ ｎ。 ５．６　氮吹仪。 ５．７　涡旋混合器 。 ５．８　离心管：５ ０ｍＬ，聚丙烯材质 （Ｐ Ｐ） 。 ６　试样制备与保存 ６．１　试样制备 取代表性试样 ５ ０ ０ｇ，用组织捣碎机将样品加工成浆状 ，混匀，装入洁净的盛样容器内 ，密封并标明标记。 ６．２　试样保存 试样于－１ ８℃以下冷冻保存 。在制样和保存的操作过程中 ，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化 。 ７　分析步骤 ７．１　提取 称取１ ０ｇ（精确到０． ０ １ｇ）均质试样于 ５ ０ｍＬ具塞离心管中 ，加入２ ０ｍＬ含１％乙酸的乙腈溶液 （４． ７） 、４． ０ｇ无水硫酸镁 （４． ５） 、１． ０ｇ无水乙酸钠 （４． ４） ，高速均质 （８０ ０ ０ｒ／ｍ ｉ ｎ）１ｍ ｉ ｎ，４０ ０ ０ｒ／ｒ ａ ｉ ｎ离心 ５ｍ ｉ ｎ。 ７．２　净化 取上层溶液 ５ｍＬ于预先加有 ２ ５ ０ｍｇＣ１ ８（４． ６）及７ ５ ０ｍｇ无水硫酸镁 （４． ５）的离心管中 ，涡旋３ ０ｓ， 以４０ ０ ０ｒ／ｍ ｉ ｎ离心５ｍ ｉ ｎ，静置３ ０ｍ ｉ ｎ，取０． ５ｍＬ 上清液至离心管中 ，加入０． ５ｍＬ０． １％ 甲酸水溶液混匀，经０． ２μｍ微孔膜过滤 ，供液相色谱串联质谱仪检测 。 ２犛 犖／犜４ ５ ９ １—２ ０ １ ６ rHgCb@g · ykbûR60
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SÑU.７．３　测定 ７．３．１　液相色谱条件 液相色谱条件如下 ： ａ）　色谱柱：Ｃ１ ８，１ ５ ０ｍｍ×２． １ｍｍ （内径） ，粒径３． ５μｍ或相当者 ； ｂ）　柱温：３ ０℃； ｃ）　进样量：１ ０μＬ； ｄ）　流动相：０． １％甲酸水溶液 （Ａ相）和０． １％甲酸乙腈（Ｂ相） ，梯度洗脱参见表 １； ｅ）　流速：０． ２ｍＬ／ｍ ｉ ｎ。 表１　流动相及梯度洗脱条件 时间／ｍ ｉ ｎ 流速／（μＬ／ｍ ｉ ｎ） 流动相Ａ（０． １％甲酸水溶液 ） 流动相Ｂ（０． １％甲酸乙腈） ０． ０ ０ ２ ０ ０ ６ ０ ４ ０ ４． ０ ０ ２ ０ ０ ５ ０ ５ ０ ２ ４． ０ ０ ２ ０ ０ １ ０ ９ ０ ２ ５． ０ ０ ２ ０ ０ ６ ０ ４ ０ ４ ０． ０ ０ ２ ０ ０ ６ ０ ４ ０ ７．３．２　质谱条件 质谱条件如下 ： ａ）　离子化模式 ：电喷雾电离负离子模式 （Ｅ Ｓ Ｉ－） ； ｂ）　质谱扫描方式 ：多反应监测 （ＭＲＭ） ； ｃ）　雾化气、气帘气、辅助加热气 、碰撞气均为高纯氮气 ；使用前应调节各气体流量以使质谱灵敏度达到检测要求 ，参考条件参见附录 Ｂ； ｄ）　喷雾电压 、去簇电压 、碰撞能量等参数应优化至最优灵敏度 ，参考条件参见附录 Ｂ。 ７．３．３　液相色谱 质谱／质谱检测 ７．３．３．１　定性测定 在相同的实验条件下 ，样液中被测物的色谱峰保留时间与基质标准溶液一致 ；定性离子对的相对丰度与浓度相当的基质标准溶液的相对丰度一致 ，相对丰度偏差不超过表 ２的规定，则可判断样品中存在相应的被测物 。 表２　定性测定时相对离子丰度的最大允许偏差 相对离子丰度 ／％ ＞５ ０ ＞２ ０～５ ０ ＞１ ０～２ ０ ≤１ ０ 允许的相对偏差 ／％ ±２ ０ ±２ ５ ±３ ０ ±５ ０ ７．３．３．２　定量测定 根据试样中被测物的含量 ，选取响应值适宜的标准工作溶液进行分析 。标准工作液和待测样液中农药的响应值均应在仪器线性响应范围内 。如果含量超过标准曲线范围 ，应稀释到合适浓度后分析 。 ３犛 犖／犜４ ５ ９ １—２ ０ １ ６ rHgCb@g · ykbûR60
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SÑU.在上述仪器条件下 ，６ ０种农药的保留时间参见表 Ｂ． １，混合标准溶液的提取离子色谱图参见图 Ｃ． １。 ７．４　空白试验 除不加试样外 ，均按上述测定步骤进行 。 ７．５　结果计算与表述 按式（１）或仪器数据处理系统计算所测农药的残留含量 ，计算结果需扣除空白值 。 犡＝犮×犞犿×１０ ０ ０１０ ０ ０…………………………（ １） 式中： 犡— — —试样中待测组分的含量 ，单位为微克每千克