书书书　 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 犛 犖／犜４ ５ １ ８—２ ０ １ ６ 纸和纸制品中松香酸含量的测定高效液相色谱法 犇 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳狉 犲 狊 犻 狀犪 犮 犻 犱犮 狅 狀 狋 犲 狀 狋 犻 狀 狆犪狆犲 狉犪 狀 犱狆犪狆犲 狉狆狉 狅 犱 狌 犮 狋 狊—犎 犻犵犺 狆犲 狉 犳 狅 狉 犿 犪 狀 犮 犲 犾 犻 狇狌 犻 犱犮 犺 狉 狅 犿 犪 狋 狅 犵狉 犪狆犺狔犿 犲 狋 犺 狅 犱 ２ ０ １ ６０ ６２ ８发布 ２ ０ １ ７０ ２０ １实施 中 华 人 民 共 和 国 国家质量监督检验检疫总局发 布 rHgCb@g · ykbûR60
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SÑU.书书书前　　言 　　本标准按照 Ｇ Ｂ／Ｔ１． １—２ ０ ０ ９给出的规则起草 。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口 。本标准起草单位 ：深圳市检验检疫科学研究院 、中华人民共和国深圳出入境检验检疫局 、华南理工大学轻工与食品学院 、中华人民共和国天津出入境检验检疫局 、中华人民共和国广东出入境检验检疫局。本标准主要起草人 ：徐嵘、王成云、杨左军、武书彬、周俊辉、顾浩飞。 Ⅰ犛 犖／犜４ ５ １ ８—２ ０ １ ６ rHgCb@g · ykbûR60
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SÑU.纸和纸制品中松香酸含量的测定高效液相色谱法 　　警示— — —使用本标准的人员应有正规实验室工作的实践经验 。本标准未指出所有可能的安全问 题，使用者有责任采取适当的安全和健康措施 ，并保证符合国家有关法规规定的条件 。 １　范围 本标准规定了采用高效液相色谱测定纸和纸制品中松香酸含量的方法 。本标准适用于纸和纸制品中松香酸含量的测定 。 ２　规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的 。凡是注日期的引用文件 ，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件 ，其最新版本 （包括所有的修改单 ）适用于本文件 。 Ｇ Ｂ／Ｔ４ ５ ０　纸和纸板试样的采取及试样纵横向 、正反面的测定 Ｇ Ｂ／Ｔ４ ６ ２　纸、纸板和纸浆 　分析试样水分的测定 Ｇ Ｂ／Ｔ６ ６ ８ ２　分析实验室用水规格和试验方法 ３　原理 在水中疏解成单纤维后的试样 ，经加热蒸发浓缩至只余少量水分 。加入氢氧化钠 ／尿素／硫脲混合溶液溶解 ，用叔丁基甲醚超声 、摇床振荡萃取 ，离心分离后 ，萃取液经浓缩处理 ，用高效液相色谱仪测定 ，外标法定量 。 ４　试剂和材料 除非另有说明 ，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂 。 ４．１　水，Ｇ Ｂ／Ｔ６ ６ ８ ２规定的三级水 。 ４．２　松香酸标准品 ：纯度＞７ ５％。 ４．３　甲醇：色谱纯。 ４．４　叔丁基甲醚 。 ４．５　氢氧化钠 ／尿素／硫脲混合碱溶液 ：７％氢氧化钠 ／９％尿素／９％硫脲溶液 。称取７． ０ｇ的氢氧化钠 、 ９． ０ｇ尿素、９． ０ｇ硫脲，置于装有 １ ０ ０ｍＬ 蒸馏水的 １ ５ ０ｍＬ 锥形瓶中 ，超声使其完全溶解 ，置于冰箱中 ，冷冻至－１ ０℃。 ４．６　盐酸：分别为浓盐酸 （１． １ ８ｇ／ｍＬ） 、１＋９、１＋９ ９。 ４．７　松香酸标准储备溶液 ：准确称取适量的松香酸标准品 （４． ２） ，用甲醇（４． ３）配制成浓度为 １０ ０ ０ｍ ｇ／Ｌ的松香酸标准储备溶液 。 ４．８　松香酸标准工作溶液 ：移取适量体积的松香酸标准储备溶液 （４． ７） ，用甲醇稀释 ，配制成所需浓度的标准工作溶液 。 １犛 犖／犜４ ５ １ ８—２ ０ １ ６ rHgCb@g · ykbûR60
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SÑU.４．９　酚酞指示剂 ，取０． ５ｇ酚酞，用乙醇溶解并稀释至 １ ０ ０ｍＬ 。 注：标准储备溶液于 ０℃～４℃冰箱中保存 ，有效期为 ６个月。标准工作溶液于 ０℃～４℃冰箱中保存 ，有效期 为３个月。 ５　仪器 ５．１　纤维疏解装置 ，可日常带搅拌刀片的果汁机替代 。 ５．２　加热板。 ５．３　ｐＨ计。 ５．４　超声振荡仪 。 ５．５　摇床（摇瓶器） ，振荡频率可达 １ ２ ０次／ｍ ｉ ｎ，振荡幅度可达 ２ ０ｍｍ。 ５．６　离心机，转速可达 ３０ ０ ０ｒ／ｍ ｉ ｎ。 ５．７　旋转蒸发器 。 ５．８　氮吹仪。 ５．９　有机相过滤膜 ：孔径０． ２ ２μｍ。 ５．１ ０　高效液相色谱仪 ：配有紫外检测器 （ＵＶＤ）或二极管阵列检测器 （ＤＡＤ） 。 ６　取样与试样的制备 ６．１　取样 纸和纸板试样的采取按照 Ｇ Ｂ／Ｔ４ ５ ０的有关规定进行 。 ６．２　试样的制备 将样品剪成约 ５ｍｍ×５ｍｍ 的小块。彻底混匀 ，防止污染 。试样称量前在天平附近至少平衡 ２ ０ｍ ｉ ｎ。 ６．３　水分含量的测定 按照Ｇ Ｂ／Ｔ４ ６ ２测定试样的水分 ，以计算试样的绝干物含量 。 ７　分析步骤 ７．１　预试验 取少量试样于锥形瓶中 ，加入１ ０ ０ｍＬ 已冷冻至 －１ ０℃的氢氧化钠 ／尿素／硫脲混合碱溶液 （４． ５） ，手摇１． ０ｍ ｉ ｎ ，观察，如试样能完全溶解成单纤维状 ，试验可省去 ７． ３～７． ４两个步骤 。 ７．２　称量 做两份试样的平行测定 。称取１． ０ｇ左右的风干试样 ，精确至０． ０ ０ １ｇ。 ７．３　疏解 在纤维疏解装置 （５． １）中加入试样 ，加入少量水 ，加水量确保方便试样疏解即可 。疏解试样至单纤维状。 ２犛 犖／犜４ ５ １ ８—２ ０ １ ６ rHgCb@g · ykbûR60
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SÑU.７．４　加热浓缩 将疏解后的试样 ，转移至２ ５ ０ｍＬ 锥形瓶中 ，在加热板 （５． ２）上加热蒸发至水少于 １ ０ｍＬ。 ７．５　提取 在锥形瓶中加入 １ ０ ０ｍＬ 已冷冻至 －１ ０℃的氢氧化钠 ／尿素／硫脲混合碱溶液 （４． ５） ，手摇１． ０ｍ ｉ ｎ ，使试样完全溶解 。滴入酚酞指示剂 （４． ９） ，溶液呈粉红色 ，加入不同浓度的盐酸 （４． ６） ，使溶液变为无色后，继续用ｐＨ计（５． ３）观测，直至调节溶液 ｐＨ＝７． ５ ０ 。加入２ ５ｍＬ叔丁基甲醚 （４． ４） ，室温下超声 （５． ４）振荡３ ０ｍ ｉ ｎ，用摇瓶器 （５． ５）以１ ２ ０次／ｍ ｉ ｎ的频率振荡 ３ ０ｍ ｉ ｎ，离心（５． ６）分离后，将叔丁基甲醚层转移至鸡心瓶中 。残留液用 ２ ５ｍＬ叔丁基甲醚超声振荡 、摇瓶器振荡第二次 。合并叔丁基甲醚层 。 ７．６　萃取液的处理 用旋转蒸发器 （５． ７）将滤液浓缩至近干 ，置于氮吹仪 （５． ８）中，室温下用氮气缓慢吹干 。用２ｍＬ甲醇（４． ３）溶解残留物 ，转移到１ ０ｍＬ容量瓶中 ，用甲醇定容至刻度 。用０． ２ ２μｍ有机相过滤膜 （５． ９）过滤后进行液相色谱测定 。必要时，进行稀释或浓缩 ，以保证上机分析时试样的峰面积在标准工作曲线的工作范围内 。 ７．７　测定 ７．７．１　液相色谱条件 由于测试结果取决于所使用的仪器 ，因此不可能给出液相色谱分析的通用参数 。设定的参数应保证分析时被测定组分与其他组分能够得到有效的分离 ，下面给出的参数已被证明是可行的 ： ａ）　色谱柱：ＸＲ  ＯＤ Ｓ （２． ２μｍ） ，７ ５ｍｍ×３． ０ｍｍ （内径） ，或相当者 ； ｂ）流动相：甲醇＋水（９ ５＋５，体积比） ； ｃ）流速：０． ４ｍＬ／ｍ ｉ ｎ； ｄ）柱温：４ ０℃； ｅ）检测器：二极管阵列检测器 （ＤＡＤ） ； ｆ）检测波长 ：２ ４ １ｎ ｍ； ｇ）进样量：１． ０μＬ。 ７．７．２　标准工作曲线的制作 按７． ７． １分析条件进样测定 ，以松香酸浓度为横坐标 ，峰面积为纵坐标 ，绘制标准工作曲线 。在上述液相色谱分析条件下 ，松香酸标准物的液相色谱图参见附录 Ａ，紫外吸收光谱图参见附录 Ｂ。 ７．７．３　液相色谱分析 试样溶液按 ７． ７． １分析条件进样测定 。通过比较试样与标准品色谱峰的保留时间进行定性 ，测定色谱峰面积 ，外标法定量 。 ８　结果计算 按式（１）计算纸和纸制品中松香酸的含量 ： 犃＝（犮－犮０）×犞 犿１－犡１ ０ ０（ ）…………………………（ １） ３犛 犖／犜４ ５ １ ８—２ ０ １ ６ rHgCb@g · ykbûR60
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SÑU.　　式中： 犃— — —试样中松香酸的含量 ，单位为毫克每千克 （ｍｇ／ｋｇ） ； 犮— — —从标准工作曲线上读取的样液中松香酸的浓度 ，单位为毫克每升 （ｍｇ／Ｌ） ； 犮０— — —从标准工作曲线上读取的空白溶液中松香酸的浓度 ，单位为毫克每升 （ｍｇ／Ｌ） ； 犞— — —样液最终的定容体积 ，单位为毫升 （ｍＬ） ； 犿— — —试样的风干质量 ，单位为克 （ｇ） ； 犡— — —按Ｇ Ｂ／Ｔ４ ６ ２测得的试样水分 ，％。计算结果表示到小数点后一位 。两测试结果的绝对差值不得大于算术平均值的 １ ０％，以平均值作为测试结果 。低于测定低限时 ，试验结果为未检出 。 ９　质量保证和控制 ９．１　对于由多层浆页并网形成的试样 ，如白卡纸 、白纸板，挂面箱纸板 ，需用剪刀剪成小块 ，而不能选用手撕的方式 ，因各层浆页的施胶量不同 ，需确保所取样品的面 、芯、底层的纸页面积一致 。 ９．２　试样在称量前在天平附近平衡 ２ ０ｍ ｉ ｎ，可解决因试样本身的水分变化而导致称量数据的不稳定 。 ９．３　当预实验时试样能直接被氢氧化钠 ／尿素／硫脲混合碱溶液溶解成单纤维状态时 ，可省略疏解 、加热浓缩工序 ，缩短试验时间 。