书书书　 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 犛 犖／犜４ ４ ８ ８—２ ０ １ ６ 进出口纺织品 　异噻唑啉酮类抗菌剂的测定　高效液相色谱法 犜 犲 狓 狋 犻 犾 犲 狊犳 狅 狉 犻 犿 狆狅 狉 狋犪 狀 犱犲 狓 狆狅 狉 狋—犇 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳 犻 狊 狅 狋 犺 犻 犪 狕 狅 犾 狅 狀 犲犫 犻 狅 犮 犻 犱 犲 狊 —犎 犻犵犺狆犲 狉 犳 狅 狉 犿 犪 狀 犮 犲 犾 犻 狇狌 犻 犱犮 犺 狉 狅 犿 犪 狋 狅 犵狉 犪狆犺狔犿 犲 狋 犺 狅 犱 ２ ０ １ ６０ ６２ ８发布 ２ ０ １ ７０ ２０ １实施 中 华 人 民 共 和 国 国家质量监督检验检疫总局发 布 rHgCb@g · ykbûR60
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SÑU.书书书前　　言 　　本标准按照 Ｇ Ｂ／Ｔ１． １—２ ０ ０ ９给出的规则起草 。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口 。本标准起草单位 ：深圳市检验检疫科学研究院 、中华人民共和国深圳出入境检验检疫局 。本标准主要起草人 ：谢堂堂、刘彩明、钟声扬、林君峰、王成云、褚乃清、李丽霞、唐莉纯、李燕华。 Ⅰ犛 犖／犜４ ４ ８ ８—２ ０ １ ６ rHgCb@g · ykbûR60
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SÑU.进出口纺织品 　异噻唑啉酮类抗菌剂的测定　高效液相色谱法 １　范围 本标准规定了纺织品中 ５种异噻唑啉酮类抗菌剂 （参见附录 Ａ）的高效液相色谱测定方法 。本标准适用于各种纺织材料及其产品 。 ２　规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的 。凡是注日期的引用文件 ，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件 ，其最新版本 （包括所有的修改单 ）适用于本文件 。 Ｇ Ｂ／Ｔ６ ６ ８ ２　分析实验室用水规格和试验方法 ３　原理 试样用甲醇超声提取 ，提取液经滤膜过滤 ，用高效液相色谱仪测定 ，以保留时间定性 ，必要时结合紫外吸收光谱图进行确认 ，外标法定量 。 ４　试剂与材料 除非另有说明 ，仅使用分析纯级别的试剂 ，水为符合 Ｇ Ｂ／Ｔ６ ６ ８ ２规定的一级水 。 ４．１　甲醇：色谱纯。 ４．２　５种异噻唑啉酮标准品 ：纯度≥９ ８％，参见附录 Ａ。 ４．３　单组分标准储备溶液 ：分别准确称取适量的每种异噻唑啉酮标准品 （４． ２） ，用甲醇（４． １）分别配置成浓度为１０ ０ ０ｍ ｇ／Ｌ的标准储备溶液 。 ４．４　系列标准工作溶液 ：分别移取一定体积的 ５种异噻唑啉酮的标准储备溶液 （４． ３） ，置于棕色容量瓶中，用甲醇（４． １）稀释并定容至刻度 ，摇匀。混合标准工作溶液的浓度可根据实际需要配制 。 注：不同仪器不同工作条件下测定的线性范围有所不同 ，５种异噻唑啉酮标准溶液浓度范围在 ０． ２ ５ｍｇ／Ｌ～ ５ ０ｍｇ／Ｌ时的线性被证明可以满足要求 。 ４．５　滤膜：有机相针式 ，０． ２ ２μｍ。 ５　仪器与设备 ５．１　高效液相色谱仪 ：配有紫外检测器 （ＵＶＤ）或二极管阵列检测器 （ＤＡＤ） 。 ５．２　提取器：管状，具密闭塞 ，约５ ０ｍＬ，由硬质玻璃制成 。 ５．３　超声波提取器 ：工作频率 ４ ０ｋＨ ｚ。 １犛 犖／犜４ ４ ８ ８—２ ０ １ ６ rHgCb@g · ykbûR60
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SÑU.６　分析步骤 ６．１　样品溶液的制备 取有代表性试样 ，剪成约５ｍｍ×５ｍｍ 的碎片，混匀。准确称取上述试样 １． ０ｇ，精确至０． ０ １ｇ，置于５ ０ｍＬ提取器（５． ２） ，准确加入 ２ ０ｍＬ甲醇（４． １） ，置于超声波提取器 （５． ３）中，于４ ０℃下超声萃取 ２ ０ｍ ｉ ｎ，冷却至室温后 ，提取液经滤膜 （４． ５）过滤，所得滤液供液相色谱测定 。 ６．２　测定 ６．２．１　液相色谱条件 由于测试结果取决于所使用仪器 ，因此不可能给出色谱分析的通用参数 。下面给出的操作参数已被证明是可行的 ，仅作为测定时的参考 ： ａ）　色谱柱：ＸＲ  ＯＤ Ｓ （２． ２μｍ） ，１ ０ ０ｍｍ×３． ０ｍｍ （内径） ，或相当者 ； ｂ）　流速：０． ４ｍＬ／ｍ ｉ ｎ； ｃ）　柱温：４ ０℃； ｄ）　检测器：二极管阵列检测器 （ＤＡＤ） ； ｅ）　检测波长 ：１ ９ ０ｎ ｍ～４ ５ ０ｎ ｍ； ｆ）　定量波长 ：２ ７ ７ｎ ｍ，２ ８ ５ｎ ｍ，３ １ ９ｎ ｍ； ｇ）　进样量：１． ０μＬ； ｈ）　流动相Ａ：甲醇； ｉ）　流动相Ｂ：水； ｊ）　梯度：起始时用 ４ ０％流动相Ａ和６ ０％的流动相 Ｂ，在２． ０ｍ ｉ ｎ 内线性转变为 ９ ０％流动相Ａ和 １ ０％的流动相 Ｂ，保持４ｍ ｉ ｎ；然后０． ５ｍ ｉ ｎ 内线性转变为 ４ ０％流动相Ａ和６ ０％的流动相 Ｂ，保持４ｍ ｉ ｎ。 ６．２．２　标准工作曲线的制作 取系列标准工作溶液 （４． ４） ，按６． ２． １分析条件进样测定 ，参考附录 Ａ规定的定量波长 ，以标准溶液浓度为横坐标 ，峰面积为纵坐标 ，绘制标准工作曲线 。在上述液相色谱分析条件下 ，标准物质的液相色谱图参见附录 Ｂ。 ６．２．３　液相色谱分析 按６． ２． １的测定条件对待测样进行测定 ，记录色谱峰的保留时间和峰面积 。根据色谱峰的保留时间定性，如采用二极管阵列检测器 ，可结合其紫外吸收光谱图进行确认 ，标准物质的紫外吸收光谱图参见附录Ｃ。根据色谱峰的峰面积进行外标法定量 。 ６．３　空白试验 除不加试样外 ，均按步骤 ６． ２进行。 ７　结果计算 按式（１）计算纺织品中异噻唑啉酮的含量 ： 犡＝（犮－犮０）×犞犿…………………………（ １） ２犛 犖／犜４ ４ ８ ８—２ ０ １ ６ rHgCb@g · ykbûR60
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SÑU.　　式中： 犡— — —试样中异噻唑啉酮的含量 ，单位为毫克每千克 （ｍｇ／ｋｇ） ； 犮— — —从标准工作曲线上读取的样液中异噻唑啉酮的浓度 ，单位为毫克每升 （ｍｇ／Ｌ） ； 犮０— — —从标准工作曲线上读取的空白溶液中异噻唑啉酮的浓度 ，单位为毫克每升 （ｍｇ／Ｌ） ； 犞— — —样液最终的定容体积 ，单位为毫升 （ｍＬ） ； 犿— — —试样的质量 ，单位为克 （ｇ） 。试验结果以各种异噻唑啉酮的检测结果分别表示 ，计算结果表示到小数点后一位 。低于测定低限时，试验结果为未检出 。 ８　测定低限和回收率 本方法的测定低限均为 ５． ０ｍｇ／ｋｇ。在阴性样品中添加适量标准溶液 ，按步骤６． ２～６． ３进行分析 ，异噻唑啉酮类抗菌剂的回收率为 ８ ０％～１ １ ０％。 ９　精密度 在同一实验室 ，由同一操作者使用相同设备 ，按相同的测试方法 ，并在短时间内对同一被测对象相互独立进行的测试 ，获得的两次独立测试结果的绝对差值不大于这两个测定值的算术平均值的 １ ０％，以９ ５％的置信度为前提 。 １ ０　试验报告 试验报告至少应给出以下内容 ： ａ）　样品来源及描述 ； ｂ）　使用的标准 ； ｃ）　测试结果 ； ｄ）　任何偏离本标准的细节 ； ｅ）　试验日期 。 ３犛 犖／犜４ ４ ８ ８—２ ０ １ ６ rHgCb@g · ykbûR60
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SÑU.附　录　犃（资料性附录 ） ５种异噻唑啉酮的资料及 犎 犘 犔 犆的检测波长 表犃．１　５种异噻唑啉酮的资料及 犎 犘 犔 犆的检测波长 序号 中文名称 英文名称 简称化学文摘编号 （ＣＡ Ｓ号）结构式　ＨＰ Ｌ Ｃ检测 波长／ｎ ｍ １　２ 甲基 ４ 异噻 唑啉 ３ 酮２  Ｍ ｅ ｔ ｈｙｌ  ４  Ｉ ｓ ｏ ｔ ｈ ｉ ａ ｚ ｏ ｌ ｉ ｎ  ３  ｏ ｎ ｅＭ Ｉ ２ ６ ８ ２  ２ ０  ４ ２ ７ ７ ２５ 氯代 ２ 甲基  ４ 异噻唑啉  ３ 酮５  Ｃ ｈ ｌ ｏ ｒ ｏ  ２  Ｍ ｅ ｔ ｈ ｙｌ  ４  Ｉ ｓ ｏ ｔ ｈ ｉ ａ ｚ ｏ ｌ ｉ ｎ  ３  ｏ ｎ ｅＣＭ Ｉ ２ ６ １ ７ ２  ５ ５  ４ ２ ７ ７ ３　１，２ 苯并异噻 唑啉 ３ 酮１，２  Ｂ ｅ ｎ ｚ ｉ ｓ ｏ ｔ ｈ ｉ ａ ｚ ｏ ｌ ｉ ｎ  ３  Ｏ ｎ ｅＢ Ｉ Ｔ ２ ６ ３ ４  ３ ３  ４ ３ １ ９ ４２ 正辛基 ４ 异噻 唑啉 ３ 酮２  ｎ  Ｏ ｃ ｔｙｌ  ４  Ｉ ｓ ｏ ｔ ｈ ｉ ａ ｚ ｏ ｌ ｉ ｎ  ３  ｏ ｎ ｅＯ Ｉ ２ ６ ５ ３ ０  ２ ０  １ ２ ７ ７ ５　４，５ 二氯 ２ 正辛 基 ４ 异噻唑啉  ３ 酮４，５  Ｄ ｉ ｃ ｈ ｌ ｏ ｒ ｏ  Ｎ  Ｏ ｃ ｔ ｙｌ  ４  Ｉ ｓ ｏ ｔ ｈ ｉ ａ ｚ ｏ ｌ ｉ ｎ  ３  ｏ ｎ ｅＤ ＣＯ Ｉ ６ ４ ３ ５ ９  ８ １  ５ ２ ８ ５ ４犛 犖／犜４ ４ ８ ８—２ ０ １ ６ rHgCb@g · ykbûR60
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SÑU.附　录　犅（资料性附录 ） 不同检测波长下异噻唑啉酮标准物质的 犎 犘 犔 犆色谱图 说明： １— — —２ 甲基 ４ 异噻唑啉  ３ 酮； ２— — —５ 氯代 ２ 甲基 ４ 异噻唑啉  ３ 酮； ３— — —１，２ 苯并异噻唑啉  ３ 酮； ４— — —２ 正辛基 ４ 异噻唑啉  ３ 酮；