以正式出版文本为准中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 1594 —2019 代替 SN/T 1594— 2005 出口茶叶及代用茶中噻嗪酮残留量的测定 Determination of buprofezin residue in tea and herbal tea for export 2019 -12-27 发布 2020 -07-01 实施ICS 67.050 C 53 中华人民共和国海关总署 发 布以正式出版文本为准以正式出版文本为准 SN/T 1594—2019I前 言 本标准依据 GB/T 1.1— 2009 给出的规则起草。 本标准代替 SN/T 1594— 2005《进出口茶叶中噻嗪酮残留量检验方法 气相色谱法》 。本标准与 SN/T 1594— 2005 的主要差异如下：——修改标准名称；——扩大标准适用范围；——修改气相色谱法前处理及仪器条件；——增加液相色谱 - 质谱 / 质谱法。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由中华人民共和国海关总署提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国杭州海关。本标准主要起草人： 朱晓雨，黄超群，崔晓美，楼成杰，吴娟，陈丽，蒋沁婷，方群。本标准所代替标准的历次版本发布情况为：—— SN/T 1594— 2005。以正式出版文本为准以正式出版文本为准1 SN/T 1594—2019出口茶叶及代用茶中噻嗪酮残留量的测定 1 范围 本标准规定了出口茶叶及代用茶中噻嗪酮残留量测定的液相色谱 - 质谱 / 质谱和气相色谱检测 方法。 本标准适用于出口绿茶、红茶、普洱茶、乌龙茶、牛蒡茶、菊花茶、杜仲茶和麦茶中噻嗪酮残 留量的测定。 2　规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于 本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 第一法 液相色谱 - 质谱 / 质谱法 3　方法提要 试样中噻嗪酮经丙酮、水提取，用正己烷抽提，经弗罗里硅土柱净化后，液相色谱 - 质谱 / 质 谱法测定，外标法定量。 4　试剂和材料 除特殊注明外，所用试剂均为色谱纯，所用水为符合 GB/T 6682 规定的一级水。 4.1　丙酮。 4.2　正己烷。4.3　无水乙醚。4.4　甲醇。4.5　氯化钠：分析纯。4.6　乙酸铵。4.7　甲酸。4.8　正己烷 - 乙醚（6+4， V/V） ：取 600 mL 正己烷和 400 mL 无水乙醚混合均匀。4.9　乙酸铵 - 甲酸混合溶液：准确称取 0.38 g 乙酸铵用水溶解，加入 1.0 mL 甲酸，用水定容至 1 000 mL。4.10 　标准物质：噻嗪酮，C 16H23N3OS，CAS 登录号 69327-76-0，纯度大于 99.0%。 4.11 　标准储备液：准确称取适量标准物质（4.10） ，用甲醇溶解并定容，配制成溶液浓度为 200 μg/mL 的标准储备液，于 0 ℃~4 ℃储存，有效期 6 个月。 4.12 　标准中间液：准确移取标准储备液（4.11）0.50 mL，用甲醇稀释并定容至 10 mL，配制成溶 液浓度为 10 μg/mL 的标准中间液。准确移取 10 μg/mL 的标准中间液 1.0 mL，用甲醇稀释并定容至 10 mL，配制成溶液浓度为 1.0 μg/mL 的标准中间液。以正式出版文本为准2 SN/T 1594—20194.13 　标准工作液：准确移取 1.0 μg/mL 的标准中间液（4.12）1.0 mL，用甲醇稀释并定容至 50 mL， 配制成溶液浓度为 20 ng/mL 的标准工作液。分别准确移取 20 ng/mL 的标准工作液 0.25 mL、0.50 mL、 1.0 mL、2.5 mL 和 5.0 mL，用甲醇稀释并定容至 10 mL，配制成溶液浓度为 0.50ng/mL、1.0ng/mL、2.0ng/mL、5.0ng/mL 和 10 ng/mL 的标准工作液，于 0 ℃~4℃储存，有效期 3 个月。 4.14 　弗罗里硅土固相萃取柱：1 g 或相当者，使用前用 5 mL 正己烷预洗。 4.15 　微孔滤膜：≤ 0.45 μm，有机相。 5　仪器和设备 5.1　液相色谱 - 质谱 / 质谱仪：配有电喷雾离子源。 5.2　分析天平：感量 0.000 1 g 和 0.01 g。 5.3　涡旋混合器。5.4　均质器。5.5　离心机：最大转速 4 000 r/min。5.6　旋转蒸发仪。5.7　固相萃取仪。 6　试样制备与保存 6.1　试样制备 取代表性样品约 500 g，用粉碎机粉碎并通过 2.0 mm 圆孔筛，混匀，装入洁净的盛样容器中， 密封并标明标记。 6.2　试样保存 试样于室温下保存。在制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。 7　测定步骤 7.1　提取 准确称取 2 g 试样（精确至 0.01 g） ，置于 50 mL 塑料离心管中，加入 10 mL 水，浸泡 2 h，再 加入 20 mL 丙酮，在均质器中均质 2 min，加入 4 g 氯化钠，再加入 15 mL 正己烷，涡旋提取 1 min， 以 4 000 r/min 离心 5 min，将上清液收集于浓缩瓶中，残渣再加入 15 mL 正己烷，重复上述操作，合并提取液，在 45 ℃以下水浴减压浓缩至近干，待净化。 7.2　净化 准确移取 10 mL 正己烷溶解残渣。取 1.0 mL 转移至弗罗里硅土固相萃取柱（4.14）内。再用 10 mL 正己烷 - 乙醚混合溶液（4.8）洗脱，收集全部洗脱液，45 ℃以下水浴减压浓缩至干，加入 2.0 mL 甲醇溶解定容，经滤膜过滤，供液相色谱 - 质谱 / 质谱仪测定。 7.3　测定7.3.1　液相色谱 - 质谱 / 质谱条件 液相色谱 - 质谱 / 质谱条件如下：以正式出版文本为准3 SN/T 1594—2019a）色谱柱： C18， 100 mm×2.1mm（内径） ，3.5 μm，或相当者； b）流动相：乙酸铵 - 甲酸混合溶液（4.9）和甲醇，梯度洗脱程序见表 1 ； 表 1　液相色谱 - 质谱 / 质谱法梯度洗脱程序 时间 /min 乙酸铵 - 甲酸混合溶液 / % 甲醇 /% 0.00 70 30 3.00 70 30 4.00 20 80 11.00 20 80 12.00 70 30 15.00 70 30 7.3.2　定量测定 按 7.3.1 仪器条件测定标准工作溶液和样液，以外标曲线法计算样液中的噻嗪酮含量。如果样 液中噻嗪酮的含量超出标准曲线范围，应用甲醇稀释后再进行分析。在上述条件下，噻嗪酮的参考 保留时间约为 10.0 min。标准溶液多反应监测色谱图参见附录 B 中图 B.1。 7.3.3　定性测定 在上述液相色谱 - 质谱 / 质谱条件下，如果样液与标准工作液中待测物质色谱峰相对保留时间 偏差在 ±2.5％范围内；定性离子对的相对丰度与浓度相当的标准工作溶液的相对丰度一致，相对 丰度允许误差不超过表 2 规定的范围，则可判断样品中存在相应的被测物。 表 2 相对离子丰度最大容许误差 相对离子丰度（基峰）% ＞ 50 ＞ 20~50 ＞ 10~20 ≤ 10 最大容许误差 % ±20 ±25 ±30 ±50 7.4　空白试验 除不加试样外，均按上述操作步骤进行。 8　结果计算和表述 用色谱数据处理机或按公式（1）计算试样中噻嗪酮的残留量： 1 000 1 000cVXm××=× ……………………………（1） 式中： X──试样中噻嗪酮的残留量，单位为毫克每千克（mg/kg） ； c──从标准曲线上得到的待测物质的溶液浓度，单位为微克每毫升（ μg/mL） ； V──样液最终定容体积，单位为毫升（mL） ；以正式出版文本为准4 SN/T 1594—2019m──最终样液所代表的试样质量，单位为克（g） ； 计算结果应扣除空白值。 9　定量限和回收率 9.1　定量限 本方法对于绿茶、红茶、普洱茶、乌龙茶、牛蒡茶、菊花茶、杜仲茶和麦茶中噻嗪酮的定量限 均为 0.005 mg/kg。 9.2　回收率 本方法的添加水平和回收率数据见表 3。 表 3 茶叶中噻嗪酮添加水平及回收率数据 添加水平 mg/kg回收率范围 /% 绿茶 红茶 普洱茶 乌龙茶 牛蒡茶 菊花茶 杜仲茶 麦茶 0.005 84~104 74~86 92~106 76~102 86~104 90~104 86~98 84~106 0.01 76~89 73~97 82~108 86~101 72~92 82~101 82~97 70~98 0.05 80~94 92~102 80~104 84~110 76~94 88~104 80~108 88~104 0.20 91~102 86~107 88~99 83~105 90~104 83~103 84~90 92~107 30 80~96 74~91 84~100 85~96 74~92 76~90 92~104 77~98 第二法 气相色谱法 10　方法提要 试样中噻嗪酮经丙酮、水提取，用正己烷抽提，经弗罗里硅土柱净化后，用配有氮磷检测器的 气相色谱仪测定，外标法定量。 11　试剂和材料 除特殊注明外，所用试剂均为色谱纯，所用水为符合 GB/T 6682 规定的一级水。 11.1 　丙酮。 11.2 　正己烷。 11.3 　无水乙醚。 11.4 　氯化钠：分析纯