SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 1957—2007 进出口中药材及其制品中五氯硝基苯 残留量检测方法 气相色谱-质谱法 Determination of quintozene residues in medicinal plant and their products for import and export-GC-MS method 行业标准信息服务平台 2007-08-06发布 2008-03-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T1957—2007 前 言 本标准的附录A为资料性附录。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国天津出人境检验检疫局。 本标准主要起草人：林安清、许泓、张曼、古珑、何佳、张骏、吴延晖、肖亚兵。 本标准系首次发布的检验检疫行业标准。 行业标准信息服务平台 I SN/T1957—2007 进出口中药材及其制品中五氯硝基苯 残留量检测方法 气相色谱-质谱法 1范围 本标准规定了中药材及其制品中五氯硝基苯残留量气相色谱-质谱检测方法。 本标准适用于人参、人参口服液中五氯硝基苯残留量的测定。 2方法提要 试样用正已烷-丙酮混合溶液提取，经浓硫酸磺化，气相色谱-质谱法测定，外标法定量， 3试剂和材料 除另有规定外，试剂均为分析纯，水为一级水。 3.1正已烷：色谱纯。 3.2丙酮：色谱纯。 3.3浓硫酸：优级纯。 3.4无水硫酸钠：于650℃灼烧4h，置于干燥器中备用。 3.5硫酸钠溶液：40g/L。 3.6五氯硝基苯（Quintozene，CCl,NO2，CAS：82-68-8）标准品：纯度大于等于99%。 3.7五氯硝基苯标准溶液：准确称取适量的五氯硝基苯标准品，用正已烷配制成浓度为100μg/mL标 准储备液。根据需要用正已烷稀释成适当浓度的标准工作溶液。于0℃～4℃冰箱中保存。 3.8无水硫酸钠柱：80mmX40mm（内径）筒形漏斗，底部垫约5mm高脱脂棉，再装10g无水硫酸钠 (3.4)。 4仪器和设备 4.1气相色谱-质谱仪，配电子轰击源（EI) 标准信息服 4.2涡旋混合器。 4.3高速均质器：24000r/min。 4.4离心机：3000r/min。 4.5旋转蒸发器。 4.6药材粉碎机。 5样品制备与保存 取有代表性人参样品约500g，充分粉碎后过2.0mm筛。取有代表性样品人参口服液约500g，混 匀，装入洁净容器内，密封并标明标记，于4℃冷藏保存。 在抽样和制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生五氯硝基苯残留物含量的变化 6测定步骤 6.1提取 6.1.1人参样品 称取5g（精确至0.01g）试样于100mL离心管中，加入50mL丙酮+正已烷（2+8，体积比）溶液， SN/T1957—2007 于高速均质器14000r/min均质5min，3000r/min离心3min，过滤至150mL浓缩瓶中，重复上述操 作一次。合并提取液，于50℃水浴旋转蒸发至约50mL，转移至150mL分液漏斗中。 6.1.2人参口服液样品 称取5g（精确至0.01g）试样于100mL离心管中，加入50mL内酮十正已烷（2十8，体积比）提取 液，涡旋混合5min，转移至500mL分液漏斗中。加入300mL水，振摇，静置分层，弃去水相。再加人 300mL水，重复上述操作一次。 6.2净化 在上述分液漏斗中加入10mL浓硫酸（3.3），轻轻振摇0.5min后，静置分层，弃去下层酸液。再重 复净化3次～4次（净化至下层酸液呈无色）。再用2×100mL硫酸钠溶液（3.5）洗涤两次，静置分层 后，弃去水相。将净化液通过无水硫酸钠柱（3.8），用10mL正已烷洗涤无水硫酸钠柱，收集正已烷至 浓缩瓶中，于50℃水浴旋转蒸发至干，用1.0mL正已烷溶解残渣，供气相色谱-质谱仪测定 6.3测定 6.3.1气相色谱-质谱条件 a) 色谱柱：DB-35MS石英毛细管柱25m×0.25mm（内径），膜厚0.25μm，或相当者； b) 柱温程序：100℃- c) 进样口温度：280℃； d) 接口温度：250℃； e) 离子源温度：200℃； f) 载气：氮气，纯度大于等于99.999%，流速1.0mL/min； g) 进样方式：无分流，1.0min后开阀； h) 溶剂延迟：2.8min； 进样量：2μL； j) 电子轰击源EI能量：70eV； 监测方式：选择离子监测方式（SIM)； 1) 选择离子（mz）：定量295，定性142、214、237、297。 6.3.2气相色谱-质谱测定 根据样液中被测物含量情况选定峰面积相近的标准工作溶液，标准工作溶液和待测样液中五氯硝 基苯的响应值均应在仪器检测的线性范围内，对标准工作溶液与样液等体积参插进样测定 如果样液与标准工作溶液的选择离子色谱图中，在相同保留时间有色谱峰出现，同时所选择离子的 丰度比与标准样品相关离子的相对丰度一致（m/z142、214、237、295、297.其丰度比100：73：85：51： 36），相似度在允差之内（见表1），根据选择离子m/z295对其进行外标法定量。在上述气相色谱-质谱 条件下，五氯硝基苯的参考保留时间约为8.0min。五氯硝基苯标准品总离子流图和质谱图参见附录 A中图A.1和图A.2。 表1定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差 >50 >10~20 相对离子丰度/% >20~50 <10 允许的相对偏差/% ±20 ±25 ±30 ±50 6.4空白试验 除不加试样外，均按上述测定步骤进行。 7结果计算和表述 用色谱数据处理机或按式（1）计算试样中五氯硝基苯残留量，计算结果应将空白值扣除： 2