ICS 11.120.01 B 38 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T 3676—2020 灵芝中总三含量的测定 分光光度法 Determination of total triterpene in ganoderma- Spectrophotometric method 2020-08-26发布 2021-01-01实施 中华人民共和国农业农村部 发布 NY/T3676—2020 本标准按照GB/T1.1一2009的规则起草。 本标准由农业农村部种植业管理司提出并归口 食典通 本标准起草单位：农业农村部食用菌产品质量监督检验测成中心（上海）、上海市农业科学院农产品质 量标准与检测技术研究所。 本标准主要起草人：周昌艳、刘海燕、蔡祥、金晓芬、李亚莉、邵毅、赵晓燕。 GRI 人 NY/T3676—2020 灵芝中总三含量的测定 分光光度法 1范围 本标准规定了灵芝中总三菇含量的分光光度测定方法。 本标准适用于灵芝子实体、切片以及超细粉等灵芝产品总三含量的测定，测定范围为0.06%～ 10%。 按照样品0.5g称样量，加50mL提取液，提取液的移取量为2.5mL进行测定计算，该方法的检出 限（LOD)为0.02%，定量限（LOQ)为0.06%。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3原理 灵芝中三类化合物在酸性条件下与香草醛反应生成蓝紫色产物，在550nm波长下有最大吸收，吸 光度值与总三含量呈正比 4试剂 除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的三级水。 4.1无水乙醇（CH,OH)。 4.2高氯酸（HCIO）。 4.3冰醋酸(CH:COOH)。 4.4甲醇(CHOH)。 4.5 55%香草醛-冰醋酸溶液：称取香草醛5g，加人约70mL冰醋酸溶解，溶解后加冰醋酸定容至100 mL 4.6 6齐墩果酸标准品：CAS号508-02-1，纯度≥99%。 4.7齐墩果酸标准储备溶液：准确称取105℃干燥至恒重的齐墩果酸标准品20mg（精确至0.1mg），用 甲醇（4.4)溶解并定容至100mL。该标准液中齐墩果酸的质量浓度为200μg/mL，4℃冰箱密封保存，有 效期1个月。 5仪器和设备 5.1分析天平：感量为0.1mg。 5.2分光光度计：配1cm比色Ⅲ，波长550nm。 5.3水浴锅：温度控制范围在60℃~100℃。 5.4超声波提取仪：500W。 5.5离心机8000r/min。 5.6样品粉碎机。 5.70.425mm标准网筛。 NY/T3676—2020 6分析步骤 6.1样品制备 取不少于200g具代表性样品，用样品粉碎机（5.6）粉碎（灵芝超细粉样品无须粉碎），过0.425mm 标准网筛（5.7），将样品装于密封容器中，0℃~20℃保存备用。 6.2样品提取 称取样品0.5g（精确至0.0001g）至250mL具塞锥形瓶中，准确加人无水乙醇（4.1)50mL，盖紧 塞子，摇匀，置于超声波提取仪（5.4)中超声提取1h.其间经常摇动，提取后混合均匀，取适当体积于 8000r/min的离心机（5.5）中离心10mim，取上清液作为样品提取液备用。 6.3测定 6.3.1标准曲线 PUBLI 准确移取齐墩果酸标 mL和0.5mL，置于 10mL试管中，标准品质 将试个 管置于温度为90℃~ 100℃的水浴锅中挥 1加 冰醋酸溶液子 2）0.8mL，混匀后 于60℃水浴中保温 min. 迅速置于冰水浴中冷 5 20 显色反应，再加入 昆年后室 5.0mL冰醋酸（4 温放置 min立 如用 1cm心m以0 波长550nm处 测定吸光度。以齐墩 果酸尔准 品的质量为纵坐标相应的吸光度为横坐棕 出线 6.3.2样品测定 E 准确移取适 本积祥品 提取液手1试管 不同金正样品其提取液利 多取量的 值参见附录 A)，置于温度为90 的水浴锅中挥干溶剂 步骤同631同时 做试剂 并根据样品 提取液的吸光度计 品中总站含量测定值超出标准曲线范 适 当稀释或增加移 取体积后再次测 7 试验数据处理 样品中总三店（） 以齐墩果酸计的含量按式计介 R 式中： U r 样品中总 韩的金量 为百分 m1 从标准曲线 查的样品反应液的 三站的量（以齐墩果酸），单位 微克（μg）； Vi 提取时准确加 无水乙醇体积 f 样品溶液稀释倍数 m2 样品的质量，单位为克（） V2 比色测定时移取的样品提取液的体积，单位为毫升（mL）。 106 克换算为毫克的换算系数。 总三菇的测定结果以2次测定结果的算数平均值表示，测定结果小数点后位数的保留与方法检出限 -致，最多保留3位有效数字。 8重复性 在重复性条件下获得2次独立测试结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。 2 NY/T3676—2020 附 录 A （资料性附录） 样品中总三含量与提取液建议移取体积对应关系 样品中总三含量与提取液建议移取体积对应关系见表A.1。 表A.1 样品中总三枯含量与提取液建议移取体积对应关系 样品总三粘含量，% 提取液移取量，mL ≥3.0 <0.2 1.5~3.0 0.3~0.2 0.5~1.5 0.6~0.3 0.25~0.5 2.0~0.6 0.06~0.25 2.5~2.0 注：样品中总三帖含量超过3%且2次独立测试结果未达标准重复性要求时，建议将样品提取液稀释合适倍数后再 测定。 3 NY/T 3676-2020 中华人民共和国 食 农业行业标准 灵芝中总三枯含量的测定 分光光度法 NY/T3676—2020 * 中国农业出版社出版 （北京市朝阳区麦子店街18号楼） （邮政编码：100125 网址：www.ccap.com.cn) 北京印刷一厂印刷 新华书店北京发行所发行 各地新华书店经销 * * * 开本880mmX1230mm1/16 印张0.5 字数10千字 2020年12月第1版 2020年12月北京第1次印刷 书号：16109·8281 定价：12.00元 版权专有 侵权必究 NY/T3676-2020 举报电话：（010）59194261 NY/T 3676-2020 中华人民共和国 食 农业行业标准 灵芝中总三枯含量的测定 分光光度法 NY/T3676—2020 * 中国农业出版社出版 （北京市朝阳区麦子店街18号楼） （邮政编码：100125 网址：www.ccap.com.cn) 北京印刷一厂印刷 新华书店北京发行所发行 各地新华书店经销 * * * 开本880mmX1230mm1/16 印张0.5 字数10千字 2020年12月第1版 2020年12月北京第1次印刷 书号：16109·8281 定价：12.00元 版权专有 侵权必究 NY/T3676-2020 举报电话：（010）59194261