ICS 65.020.01 B 04 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T 3675—2020 红茶中茶红素和茶褐素含量的测定 分光光度法 Determination of thearubigin and theabrownine in black tea- Spectrophotometry 2020-08-26发布 2021-01-01实施 中华人民共和国农业农村部 发布 NY/T3675—2020 品标准 公共服务 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草 本标准由农业农村部种植业管理司提出并归口 食典通 茶叶质量安全控制重点实验室 本标准主要起草人：刘新、蒋迎、周苏娟、马桂岑陈利燕、于良子、金寿珍、张颖彬、王国庆。 NY/T3675—2020 红茶中茶红素和茶褐素含量的测定 分光光度法 1范围 本标准规定了红茶中茶红素和茶褐素含量测定的分光光度法。 本标准适用于红茶中茶红素和茶褐素含量的测定。 本标准茶红素的定量限为0.4%，茶褐素的定量限为0.6%。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件， 凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB/T8303茶磨碎试样的制备及其干物质含量测定 3原理 试样中茶红素和茶褐素经沸水提取后，再分别用正丁醇、乙酸乙酯和碳酸氢钠溶液进行液液萃取得到 测试液，于380nm处测定吸光度，根据罗勃兹（Roberts）经验系数计算茶红素和茶褐素含量。 4试剂或材料 4.1除非另有说明，本方法使用试剂为分析纯。水应符合GB/T6682中三级水的要求。 4.2正丁醇（C,HO,CAS号：71-36-3)。 4.3乙酸乙酯（C,H.O2，CAS号：141-78-6)。 4.495%乙醇(C,HO,CAS号：64-17-5)。 4.5碳酸氢钠溶液：p=25g/L。 4.6饱和草酸溶液：室温下，加一定体积的水于烧杯中，然后往其中加人草酸并不断搅拌直至有草酸固体 残留在烧杯中不能再溶解为止。 5仪器设备 5.1分光光度计：配置1cm比色皿。 5.2天平：感量0.001g。 5.3水浴锅。 5.4多管涡旋仪：≥2500r/min。 5.5离心机：≥4500r/min。 5.6一般实验室常用仪器和设备。 6样品制备 按GB/T8303的规定进行试样制备和干物质含量的测定。 7试验步骤 7.1提取液制备 5min，期间不时振摇以保证料液充分接触。取出离心管稍加冷却后，于4500r/min下离心10min，上清 1 NY/T3675—2020 液转移至50mL容量瓶中。在残渣中分别再次加入20mL和10mL沸水，重复上述提取操作各1次，将 上清液合并转移至同一50mL容量瓶中，冷却至室温后，定容至刻度。此为提取液， 7.2比色液A制备 准确吸取2mL提取液（7.1），置于25mL容量瓶，分别加入2mL饱和草酸溶液（4.6)和6mL水，用 95%乙醇（4.4)定容至刻度，记为比色液A。 7.3比色液B制备 准确吸取10mL提取液（7.1），置于50mL离心管，加入正丁醇（4.2)10mL，2500r/min连续式涡 旋10min，4500r/min离心10min。转移至30mL分液漏斗，静置分层后将下层（水层）放至小烧杯中， 准确吸取2mL，置于25mL容量瓶，加人2㎡L饱和草酸溶液（4.6 和6mL水，用95%乙醇（4.4）定容至 刻度，记为比色液B。 7.4比色液C制备 PUBLI 准确吸取15mL提取液（7 mL，2500r/min连续式 涡旋10min，4500r/min离 酸酯 氢钠溶液（4.5)6ml mL，置于25mL容 量瓶，用95%乙醇 定容至列 水色液 7.5测定 以95%乙醇 时比色 比色液B（7.3）、比 色液C(7.4)的吸光 度值 RA 8试验数据处理 试样中茶红素 和茶褐 4XEB (2) 式中： X TB 茶褐素 LX Ea 比色液A吸光度值； EB 比色液B吸光度 Ec 比色液C吸光度值 m 称样质量，单位为克（g)； m 干物质含量（质量分数），单位为百分号（%）； 16.944 罗勃兹(Roberts)经验系数 测定结果以2次测定的算术平均值表示，测定结果小数点后位数的保留与方法检出限一致，最多保留 3位有效数字。 9精密度 15%。 20%。 2 NY/T3675—2020 10 注意事项 本方法茶红素和茶褐素的线形含量范围分别为0.4%～15.0%和0.6%~20.0%。当含量超出范围， 则可酌情减少称样量或加大提取液定容体积。 3 NY/T 3675—2020 全国农业食品标准 中华人民共和国 农业行业标准 图 红茶中茶红素和茶褐素含量的测定 分光光度法 NY/T3675—2020 * 中国农业出版社出版 （北京市朝阳区麦子店街18号楼) （邮政编码：100125 网址：www.ccap.com.cn) 北京印刷一厂印刷 新华书店北京发行所发行 各地新华书店经销 * * 开本880mmX1230mm1/16 印张0.5 字数10千字 2020年12月第1版 2020年12月北京第1次印刷 书号：16109：8292 定价：12.00元 版权专有侵权必究 NY/T3675-2020 举报电话：（010）59194261 NY/T 3675—2020 全国农业食品标准 中华人民共和国 农业行业标准 图 红茶中茶红素和茶褐素含量的测定 分光光度法 NY/T3675—2020 * 中国农业出版社出版 （北京市朝阳区麦子店街18号楼) （邮政编码：100125 网址：www.ccap.com.cn) 北京印刷一厂印刷 新华书店北京发行所发行 各地新华书店经销 * * 开本880mmX1230mm1/16 印张0.5 字数10千字 2020年12月第1版 2020年12月北京第1次印刷 书号：16109：8292 定价：12.00元 版权专有侵权必究 NY/T3675-2020 举报电话：（010）59194261