ICS 65.020.20 B 66 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T 3200—2018 香蕉种苗繁育技术规程 Technical code of practice for Cavendish banana seedling propagation 2018-03-15 发布 2018-06-01实施 中华人民共和国农业部发布 NY/T 3200—2018 前言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 本标准由中华人民共和国农业部提出。 本标准由农业部热带作物及制品标准化技术委员会归口。 本标准起草单位：中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所、热作两院种苗组培中心。 本标准主要起草人：魏守兴、谢子四、魏军亚、黄丽娜、符运柳、韩丽娜、刘以道、覃和业。 I NY/T 3200—2018 香蕉种苗繁育技术规程 1范围 本标准规定了香芽蕉(Musa AAA Cavendish sub-group)种苗繁育技术规程的术语和定义、种苗组 培技术和种苗假植技术。 本标准适用于香芽蕉种苗的组培繁育 2规范性引用文件 下列文件对于本文 ,仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文 件， 包括所 NY/T357 NY/T2120 香蕉 无病莓禾 苗生产# 3 术语和定义 S NY/T 357 界定的术语和定义适用于本文件 ，以下重复 357中的某 RA 些术语和定义 3. 1 香蕉组培苗 banana tissue 利用优良香蕉品种的吸芽 等作为外植体，采 容器 植物组织 生长且已达到 菊香蕉 CEN 假植标准的完整无菌 3. 2 香蕉假植苗 banana plantlet planted in culture bag 定规格容 圃供大 田定植的香蕉小 ER 植株。 3. 3 假植 temporary plant 从香蕉组培苗移于荫棚(苗圃)至假植苗出圃之前的 3. 4 诱导培养induction culture 外植体经过消毒后，接种至分化芽诱导培养基中，于适宜温度和环境中进行茎尖分生组织培养。 3. 5 继代培养 subculture 在外植体初次培养基础上,把所获得不定芽转移到新鲜培养基中进行再培养,从而使培养物得以成 倍增殖的过程，又称增殖培养。 3. 6 培养代数 culture times 同一外植体,经历继代培养的次数。 3.7 生根培养 rooting culture 1 NY/T 3200—2018 把增殖芽转移到生根培养基中诱导生根,培养成组培苗的过程。 3. 8 变异variation 在组织培养过程中受培养基和培养条件等影响,培养出的香蕉植株遗传特性发生了明显变化,其形 态上也显著表现出有别于原品种植株的特征。 注：香蕉组培苗变异的主要特征表现为叶变细长，叶面不规则凹凸，叶片扭曲、失绿；叶柄变长；叶鞘散生呈散把；植 株变矮等。 4种苗组培技术 4.1组培苗接种前的准备 4.1.1培养基配制 4.1.1.1基本培养基母液配制 香蕉组织培养所用MS培养基母液配制参见附录A。 4.1.1.2植物生长调节剂配制 将香蕉培养所用植物激素 6-BA用1mol/LHCl溶解,NAA用95%酒精溶解，根据需要配制成一 定浓度的母液，装人容器，贴上标签后置于4℃冰箱中保存。 4.1.2培养基配置 根据不同培养阶段所需要的培养基类型,取出所需量母液等放人容器中，然后加人7g卡拉胶（或 琼脂)和 3%蔗糖,用蒸馏水定容,加相应的激素,搅拌均匀,用 0. 1 mol/L NaOH 或 HCl 调节 pH 至 5.8,然后分装到培养容器中，边搅拌边分装，每瓶或每袋分装量为25mL～30mL。 4.1.3培养基和其他用品灭菌 将分装好的培养基和接种用具等置于高压灭菌器内,采用高温高压蒸汽灭菌方法进行灭菌。 4.2外植体采集 4.2.1采芽母本园 品种纯正、无病毒病株的香蕉园。 4.2.2种芽采集 从母本园中选择健壮植株作为采芽母株，并做好标记。于晴朗天气，挖取优良母株健壮吸芽作为生 产香蕉组培苗的外植体。 4.3外植体无菌处理 将吸芽修成以生长点为中心、直径3cm～4cm、高4 cm～5cm的组织块，自来水冲洗干净,75%酒 精浸泡1min，然后修成直径1 cm～2 cm、长1 cm～3cm的组织块,再用3%～5%次氯酸钠消毒 20min～30min，无菌水清洗3次以上。 4.4外植体切割与接种 将消毒好的组织块纵切为2块～4块，接种到诱导培养基上，并编好序号。 4.5外植体诱导及病毒检测 诱导外植体于适宜的温度和环境中进行茎尖分生组织培养，将初次培养的分化芽用聚合酶链式反 应技术(PCR)或酶联免疫吸附法(ELISA)进行病毒检测。病毒检测方法按照NY/T2120的规定执 行,经检测无病毒分化芽继续增殖培养。 4.6外植体继代培养 经检测无病毒分化芽接种至继代培养基中,于适宜温度和环境中通过继代培养不断增殖,获得大量 分化芽，继代培养次数不应超过10代，时间不应超过12个月，每代培养的时间在20d～30d。 4.7生根培养 2 NY/T 3200—2018 将生长到一定高度的分化芽,转接到生根培养基中，于适宜的温度和环境中进行生根培养,分化芽 应大小分级,室内光照1500lx～3000lx,光照时间12h/d,温度(28士2)℃,培养健壮组培苗。 4.8组培苗质量标准 4. 8. 1 基本要求 4.8.1.1种源来源清楚、品种纯正、可靠。 4.8.1.2培养基及材料无真菌或细菌污染。 4.8.1.3根系白、粗,且有分叉侧根及根毛,具有长3cm以上的白色根2条以上。 4.8.1.4假茎黄绿色，基部不成钩状，叶鞘不散开。 4. 8. 1.5 变异率<2% 。 4.8.2分级 按照NY/T357的规定进行分级。 5种苗假植技术 5.1苗圃地选择 交通方便，水源充足，排水良好，远离老蕉园,远离香蕉枯萎病疫区，周围无辣椒或茄子等茄科植物、 瓜类等葫芦科植物以及豆类等豆科植物。 5.2建圃 清除杂草,平整土地，根据地形搭建荫棚。荫棚遮光度达到50%～75%，防虫网40目～60目；如需 御寒保温，则加盖塑料薄膜。 5.3营养土配制 根据当地具体情况配制营养土，基质充分混匀后，平铺在1.5m宽的苗床上或装人育苗容器中。 5.4育苗容器规格 育苗容器选用10 cm×10 cm或10cm×12cm且具小孔的塑料育苗杯。 5.5炼苗 把生根良好的组培苗直接置于无直射阳光且遮光度75%的荫棚下5d～7d,幼苗从嫩绿色转变为 正常绿色。 5.6洗苗、消毒与分苗 打开瓶盖或撕开袋口，轻轻将组培苗取出，浸泡于洗苗盆中，洗苗时可单株或多株搓洗根部，洗净根 部培养基，然后放人0.1%～0.3%的代森锌溶液或其他高效低毒杀菌剂溶液中浸泡15s,再按大、中、小 进行分苗。 5.7假植 假植前1d～2d,消毒处理营养土，按大、中、小将幼苗分别分哇假植。 5.8管理 5.8.1保温保湿 假植后，淋足定根水，加盖塑料薄膜小拱棚，7d内见干浇水，7d后揭去塑料薄膜，做好保温、保湿 工作。 5.8.2 施肥 待小苗抽出第1片新叶后，可施磷酸二氢钾或氮磷钾（N：P：K=15：15：15）复合肥等进行施肥 管理，每周2次，浓度为0.1%，待小苗完全变绿后，营养液浓度可加大至0.2%～0.3%。 5. 8. 3 病虫害防治 在营养土装袋前，苗床上施少量药剂防治地下害虫。假植后应经常检查植株的生长情况,每10d～ 3 NY/T 3200—2018 15d结合施肥喷施杀虫杀菌剂等。注意要短时间通风排气，降低空气湿度，减少真菌病害的发生。 5.8.4变异株剔除 假植后，及时剔除变异株。 5.9假植苗质量标准 5.9.1 基本要求 5.9.1.1种源来源清楚、品种纯正、可靠。 5. 9. 1. 2 纯度≥98% 。 5.9.1.3叶色青绿不徒长，叶片无病斑或虫咬缺口，也无蚜虫等害虫为害。 5.9.1.4无机械性损伤 5. 9. 1.5 无检疫性病虫害。 5.9. 1. 6 变异率≤ 5.9.2假植苗分级 TAN 为两级（表1）。 GD 级 新出叶一斤 假 病虫 最新 所展开叶 2 NY/T 3200—2018 附录A （资料性附录） MS培养基母液及培养基配制参考 MS培养基母液及培养基配制参考见表 A.1。 表 A.1 MS 培养基母液及培养基配制参考 母液 培养基配方用量 扩大倍数 扩大后称量 母液定容体积 配制培养基吸取量 名称 化学药品名称 mg/ L 倍 mg mL mL/L 硝酸钾(KNO) 1900 50 000 96 硝酸铵（NHNO:） 1650 50 大量 82 500 硫酸镁(MgSO4·7HzO) 370 50 18 500 1000 20 元素 磷酸二氢钾(KH,PO） 170 50 8 500 氯化钙(CaCl²·2H,O) 440 50 22 000 硫酸锰（MnSO4·4HO） 22.3 100 2 230 硫酸锌（ZnSO4·7HzO） 8. 6 100 860 硼酸（H,BO3） 6. 2 100 620 微量 碘化钾(KI) 0. 83 100 83 1000 10 元素 钼酸钠(NazMoO·2H20) 0.25 100 25 硫酸铜(CuSO4·5HzO) 0. 025 100 2. 5 氯化钴(CoCl²·6HzO) 0. 025 100 2. 5 乙二胺四乙酸二钠(Na²-EDTA) 37.3 100 3730 铁盐 1000 10 硫酸亚铁(FeSO4·7H,O) 27. 8 100 2 780 甘氨酸 2. 0 50 100 维生素 BI 0.