ICS 65.020 B 16 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T 3197—2018 热带作物种质资源抗病虫鉴定技术规程 橡胶树炭疽病 Technical code of practice for resistance identification to diseases and insects of tropical crops germpalsm- Anthracnose of rubber tree 2018-03-15 发布 2018-06-01实施 中华人民共和国农业部 发布 NY/T 3197—2018 前言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 本标准由农业部农垦局提出。 本标准由农业部热带作物及制品标准化技术委员会归口。 本标准起草单位：中国热带农业科学院环境与植物保护研究所。 本标准主要起草人：黄贵修、刘先宝、李博勋、蔡吉苗、李超萍、陈奕鹏、时涛、杨扬 I NY/T 3197—2018 热带作物种质资源抗病虫鉴定技术规程 橡胶树炭疽病 1范围 本标准规定了橡胶树种质抗炭疽病评价的术语和定义、接种体制备、田间接种鉴定、田间自然条件 下抗病性评价、鉴定有效性判定、重复鉴定和抗病性终评 本标准适用于橡胶树种质抗炭疽病品系筛选。 2规范性引用文件 PUBL 下列文件对于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版 件 NY/T 221 栽培技术规 NY/T2263 校树栽培 3术语和定义 S NY/T2263 界定的 活用 3.1 橡胶树炭疽 L 天 ubber 由胶孢炭疽 Cutgtu omplex）侵染 引起的真菌病害 4接种体制备 C 4.1病原物分 E 用常规组织 人橡胶 病的叶部病斑上分 离病原菌又 勿进行 和致病性测定， 分离物经形态和 尖孢炭疽菌后, 强致病 菌株 温保存备用。 4.2接种体制备 U T 将保存的供试菌接 葡萄糖琼脂培养基(PDA)平板上 自然光照下培养48h， 用灭菌的棉签将菌落充 打断成菌丝小片段 受，加大 灭菌永混勺菌丝片 200μL均匀地涂布到 新配制的PDA培养基平 （28±1 光照培养 肉眼可见亲 菌丝长出培养基表面时，再 用灭菌的棉签轻轻将菌丝打断 用灭菌水冲洗干净， 盖上4层 i，（28士1)℃，光照培养24h～ 48h。当培养基表面产生大量的炭疽菌 分生孢子时，用灭菌水洗下孢子，调节孢子浓度为106个孢子/ mL，加人0.02%（体积分数）的吐温20，备月 5田间接种鉴定 5.1鉴定对照品系 设“化59-2”为感病对照品系，“热研8-79”为抗病对照品系。 5.2鉴定圃设计 鉴定圃选址于橡胶树炭疽病常发区，地势平坦，土壤理化性质均一，四周无高大乔木，立地环境 致，每个种质种植20株，完全随机排列，种植规格75cmX75cm，鉴定圃管理按NY/T221的规定进行 锄草、浇水及施肥，确保苗木生长旺盛。 1 NY/T 3197—2018 5. 3 3接种苗木准备 每年2月，将种植一年多的供试橡胶树苗，在接穗上方约40cm处锯干，待橡胶树整齐抽出大量古 铜色叶片时，进行接种试验。 5.4接种时间 接种时间为当年的3月。 5.5接种方法 用喷雾器向橡胶树叶片喷施孢子悬浮液直至叶片挂满水滴为止，每份种质接种5株，重复3次，以 喷施灭菌水做对照，塑料袋套袋保湿24h。 5.6 病情调查 5.6.1调查时间 接种后第7d进行调查。 5.6.2调查方法 调查对象为接种的古铜期叶片，每株随机调查4片复叶，共12片小叶。每个种质共调查180片小叶。 5.6.3病情分级 病情级别及相对应的分级标准见表1。 表 1 橡胶树炭疽病病情分级标准 病级 分级标准 0 叶片上无病斑 1 0<病斑面积占叶片面积<1/16 2 1/16≤病斑面积占叶片面积<1/8 3 1/8≤病斑面积占叶片面积<1/4 4 1/4≤病斑面积占叶片面积<1/2 5 病斑面积占叶片面积1/2,或叶片严重皱缩，或落叶 5.6.4病情指数计算 调查记载每个品系叶片的病情,并按式(1)计算病情指数 (R; X T) DI = (1) SX5 式中： DI——病情指数; R; 病级代表值； 各级病叶数； S 调查的总叶片数。 5.7抗病性评价 5.7.1抗病性评价标准 依据鉴定材料3次重复的病情指数(DI)的平均值确定其抗病性水平,划分标准见表2。 表 2 橡胶树对炭疽病抗病性评价标准 病情指数(DI) 抗病性等级 DI<5 高抗(HR) 5<DI≤20 抗病(R) 20<DI≤30 中感(MS) 30<D40 感病(S) DI>40 高感(HS) 2 NY/T 3197—2018 5.7.2结果记录 抗病性评价结果按附录 B中的表B.1填写。 6 田间自然条件下抗病性评价 6.1鉴定对照品系 按5.1的规定进行。 6.2鉴定圃设计 按5.2的规定进行。 6.3调查时间 评价当年新抽第一蓬叶，分别调查古铜期利 叶片各1次， 6.4调查方法 PUBL 每个品系5点取样调查15 调香 树嫩时 6.5 病情调查 按5.6的规定 6.6 抗病性评价 按5.7的规 6.7 结果记录 抗病性评 . 鉴定有效性判 定 感病对照 品 )时该批次鉴定视 重复鉴定 8 鉴定品系初 抗病性终评 载的抗 同一年田间 寸以 性水平低的为准。 进行重复鉴定 订折 结果，并按表B.3 填写。 人 NY/T 3197—2018 附录A （资料性附录） 橡胶树炭疽病 A.1 田间症状 胶孢炭疽菌主要危害嫩叶、嫩梢。病菌多从叶尖叶缘侵人，向叶基部扩展。古铜色嫩叶出现近圆形 或不规则形、暗绿色水渍状病斑，像被开水烫过一样,边缘有黑色坏死线，即急性型病斑(图A.la)；在高 温、高湿条件下，常在病部形成黏稠的粉红色孢子堆。老叶染病，在叶尖或叶缘呈现近圆形或不规则形、 灰褐色至灰白色病斑，其上散生或轮生小黑点（图A.1b、c)。嫩梢、叶柄、叶脉染病后，出现黑色下陷小 点或黑色条斑。尖孢炭疽菌侵染嫩叶后形成黑色或褐色圆形或不规则病斑，周围有的产生黄色晕圈，病 斑边缘皱缩，背面有黄色的小点，后期病斑中央穿孔（图A.2a、b)，老叶病斑凸起呈圆锥状,严重时整片 叶布满向上凸起的小病斑，后期病斑中央穿孔，造成大量落叶（图A.2c)。 说明： 嫩叶急性型病斑； 一病斑轮生黑色小点。 老叶病斑； 图 A.1胶孢炭疽菌危害橡胶树叶片症状 说明： 嫩叶上的黑色病斑； 老叶布满向上凸起的小病斑。 病叶边缘皱缩； 图 A.2尖孢炭疽菌危害橡胶树叶片症状 NY/T 3197—2018 A.2病原 无性态为腔孢纲、黑盘孢目、刺盘孢属。按照最新的分类文献，病原菌为胶孢炭疽菌复合种(Colle- totrichum gloeosporioides complex)中的一个种或尖孢炭疽菌复合种(Colletotrichum acutatum com- plex)中的一个种。有性态自然条件下少见。 5