ICS 11.220 B 41 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T 3191-2018 奶牛酮病诊断及群体风险监测技术 Diagnostic and herds surveillance risk techniques of ketosis for dairy cows 2018-03-15 发布 2018-06-01实施 中华人民共和国农业部发布 NY/T 3191—2018 前 言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草 本标准由农业部兽医局提出。 本标准由全国动物卫生标准化技术委员会(TC181)归口。 本标准起草单位：黑龙江八一农垦大学。 本标准主要起草人：徐闯、夏成、陈媛媛、杨威、郑家三、李艳飞、张洪友、刘宇。 I NY/T 3191—2018 奶牛酮病诊断及群体风险监测技术规范 1范围 本标准规定了奶牛酮病样品采集与运输、临床型酮病诊断、亚临床型酮病诊断、酮病群体风险监测 技术和制度。 本标准适用于大、中、小型奶牛场奶牛酮病的临床诊断及群体风险监测。 2 规范性引用文件 GB 19489实验室 生物安全通用要 3 术语和定义 RESEA 下列术语和定义 订件 S 3. 1 奶牛酮病 dairy cow ketosis 养代谢性 发于奶牛泌乳早期 (分娩0 d～21 d) 产奶牛多发 3. 2 临床型酮病 患病奶牛血 液B CEN 下,并呈现明 显临床症状，称 3. 3 C 亚临床型酮病 tosis 患病奶牛血液 CHB mmol .60.mmol/ 七之间但 无明显 症状,称为亚临床型 ER 酮病。 3. 4 人 围产期 perinatal period 妊娠奶牛分娩前和分娩后的一段时期， 般指产前21 d和产后21 4 缩略语 下列缩略语适用于本文件。 AST:天门冬氨酸氨基转移酶 BCS:体况 GLU:血糖 NEFA:游离脂肪酸 β-HB:β-羟丁酸 5生物安全措施 在奶牛酮病进行实验室检测时,如血样、奶样处理等,按照GB 19489的规定执行。 1 NY/T 3191—2018 6奶牛样品采集与运输 6.1样品采集 6.1.1每个奶牛群选择不少于12头围产期奶牛采集样品。 6.1.2血样采集：选择BCS(3.0分～3.5分)的奶牛,不可选择BCS过高(3.5分以上)或过低(3.0分 以下)的奶牛。于清晨未采食、未挤奶状态下采集血样,尾静脉无菌采血10mL，常规方法分离血清或 血浆。 6.1.3奶样采集:选择 BCS(3.0 分～3.5 分)的奶牛,不可选择 BCS 过高(3.5 分以上)或过低(3. 0 分 以下)的奶牛。于清晨未采食状态下采集乳样，弃去前3把乳汁，然后接取乳样装于干净试管内，每头奶 牛的乳样为50mL。 6.2样品运输与储存 6.2.1样品采集后，4℃冷藏送检。 6.2.2如果在24 h内进行检测,血清/血浆和乳样的保存可以选择4℃冷藏,否则应选择一20℃保存。 6.3试剂与设备 6.3.1β-HB酶联免疫试剂盒。 6.3.2NEFA检测试剂盒。 6.3.3 AST 试剂盒。 6.3.41 低温高速离心机。 6.3.5 冰箱。 6.3.6 恒温培养箱。 6.3.7 洗瓶或者洗板机。 6.3.8 酶标仪。 6.3.9 全自动乳成分分析仪。 6. 3. 10 ）全自动生化分析仪。 6.3.11可见光分光光度计。 6.4检测方法 6.4.1BCS检测方法 由专业人员依据奶牛5分制BCS评分标准（见附录A)，通过眼观和手摸方法对产特21d以内的奶 牛进行评定。 6.4.2血样检测方法 通过β-HB酶法试剂盒测定奶牛血清/血浆中β-HB含量,NEFA比色法试剂盒测定奶牛血清/血 浆中NEFA含量,AST速率法试剂盒测定奶牛血清/血浆中AST含量,操作方法按照商品化试剂盒说 明书进行。通过全自动生化分析仪测定奶牛血清/血浆中GLU含量。 6.4.3乳样检测方法 通过全自动乳成分分析仪测定奶牛新鲜乳汁中乳脂，乳蛋白和乳糖含量 7 酮病临床诊断 7. 1 临床型酮病诊断 7. 1. 1 临床症状 7.1.1.1常发于围产期和泌乳早期的奶牛。 2 NY/T 3191—2018 7.1.1.2多数患病奶牛,表现消瘦，产奶量下降，便秘或腹泻，弓背缩腹，体温正常或略降低，有异嗜 癖等。 7.1.1.3严重病例,呼出气体、尿液和乳汁中有烂苹果气味(丙酮味),尿液呈黄色,落地易形成泡沫。 7.1.1.4有的病例,除呈现消化紊乱症状外,有不同程度的神经症状,初期兴奋不安、眼球震颤、全身震 颤、喙叫、冲撞，不久转为抑制，低头耳套、眼脸闭合、嗜睡，呈沉郁状。 7.1.1.5有的病例,除呈现消化紊乱症状外,有四肢瘫痪症状,但症状较轻,头屈向颈部侧,瘫痪前有乱 冲乱撞的兴奋症状。 7.1.1.6临床型酮病奶牛极少死亡，但如不及时治疗,病程延长,产奶量很难恢复到正常水平。 7.1.2血液生化检查 7. 1. 2. 1 患病奶牛血液 β-HB含量升至 1. 60 mmol/ L 以上。 7. 1. 2. 2 患病奶牛血液 GLU 含量降至 2. 80 mmol/ L 以下。 7. 1. 2. 3患病奶牛血液 NEFA含量升至 285. 0 mg/ L以上。 7. 2亚临床型酮病诊断 7.2. 1 临床症状 7.2.1.1一般常发于围产期和泌乳早期的奶牛。 7.2.1.2亚临床型酮病奶牛无明显的临床症状,食欲略有下降,产奶量下降。 7.2.2血液生化检查 患病奶牛血液 β-HB含量在 1. 20 mmol/L～1. 60 mmol/L之间。 7.3 诊断 符合7.1.1和7.1.2.1中描述的条件，该牛即可被诊断为疑似临床型酮病；符合7.1.1和7.1.2中 描述的条件，该牛即可被确诊为临床型酮病；符合7.2.1和7.2.2中描述的条件，该牛即可被确诊为亚 临床型酮病。 8 奶牛酮病群体监测 8. 1 监测指标体系 8.1.1泌乳早期奶牛BCS 分娩牛BCS为3.0分～3.5分时,在泌乳早期BCS损失>0.5分的奶牛百分率25%。 8. 1. 2 产前 3 d~14 d 血清/血浆中 NEFA 产前3d~14d血清/血浆中NEFA>0.40mmol/L的奶牛百分率>15%。 8. 1. 3 产后 3 d~14 d 血清/血浆中 NEFA % 8. 1. 4 产前 2 d~14 d血清/血浆中β-HB 产前2 d~14d 血清/血浆中β-HB>0.60 mmol/L的奶牛百分率>10%。 8. 1.5 产前 2 d~14 d 血清/血浆中 AST 产前2d～14d血清/血浆中AST>69.5U/L的奶牛百分率>20%。 8. 1.6 产后3d~14d乳脂/乳蛋白 % 8.1.7产后3d~14d乳蛋白 产后3d～14d乳蛋白<3.05%的奶牛百分率>15%。 8.1.8产后3d~14d乳糖 产后3d～14d乳糖<4.50%的奶牛百分率>15%。 3 NY/T 3191—2018 8.2 综合判定 被监测牛群的8 项指标中,任何3项(含3项)以上指标符合8.1中描述的条件,可被判断为该牛群 产后有患酮病的风险；凡符合2项(含2项)以下条件的牛群，可被判断为该牛群产后无患酮病的风险。 8. 3监测频度 每年春季和秋季分别对围产期奶牛进行1次检测 NY/T 3191—2018 附录A (规范性附录) 奶牛5分制BCS评分表 奶牛5分制BCS评分表见表A.1 表A.1 奶牛5分制BCS评分表 分制，分 BCS 奶牛的两面肋骨上，没有任何脂肪沉淀，皮下覆盖着薄薄的肌肉。脊椎、腰部和尾部的骨骼突出，没有脂肪 沉淀,没有平滑的感觉。臀部和髋骨明显突出，覆盖肌肉非常薄，并且骨骼之间的衔接处，凹陷很深。牛尾根 高高翘起，与髋骨的连接面积上，出现较深凹陷，骨骼结构明显突出 通过视觉，可以清楚看到奶牛两侧的每一根肋骨。 触摸起来，肋骨末梢明显，同时肌肉覆盖层比1分牛稍 2 厚。通过视觉，可以看到脊椎、腰部和尾部区域中的单独骨骨骼明显。臀部和骨突出，但是它们之间的凹陷 程度好于1分牛。牛尾根以下的区域以及髋骨之间的区域有些凹陷，但是骨骼结构有一定的肌肉覆盖层 轻压可以感觉到排骨，从奶牛的后部一测，向前观看，可以隐约显现奶牛的肋骨。整体上讲，覆盖排骨的外 3 表，显得很平滑。脊椎呈现出少量脂肪支撑下三角形的平滑脊背，要想感觉到单个骨头，则需要用手触摸。臀 部和髋骨圆润、平滑。髋骨之间和牛尾根周围的区域平滑，没有脂肪堆积的现象 只有通过强压才能区分单独的排骨。排骨显得扁平而浑圆。脊椎区域的脊椎骨浑圆而平滑。腰部、背部和 4 尾部区域显得很平。臀部浑圆，臀部之间部分很平。牛尾根和髋骨区域浑圆，有脂肪堆积迹象 5 脊椎骨、排骨、臀部及髋骨的骨骼结构不明显，皮下脂肪堆积非常明显。牛尾根埋在脂肪组织中 5