ICS 65.020.30 B 43 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T 3185—2018 家兔人工授精技术规程 Code of practice for rabbit artificial insemination techniques 2018-03-15 发布 2018-06-01实施 中华人民共和国农业部 发布 NY/T 3185—2018 前 言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由农业部畜牧业司提出。 本标准由全国畜牧业标准化技术委员会(SAC/TC 274)归口。 本标准起草单位：中国畜牧业协会、全国畜牧总站、江苏省畜牧总站、青岛康大食品有限公司。 本标准主要起草人：刘强德、朱满兴、唐良美、秦应和、刘长春、于福清、颉国忠、阎英凯、潘雨来。 H NY/T 3185—2018 家兔人工授精技术规程 1 范围 本标准规定了家兔人工授精的基本要求,采精技术,精液检查、稀释、保存和运输及输精等环节的技 术要求。 本标准适用于家兔的人工授精 2规范性引用文件 凡是不注日期的引用文 件,其最新版本( 括所有的修 修改单）适 GB/T25172 2010 猪常温精 中华人民共和 1960 兽药国家标准（化学 药品 3 术语和定义 S 下列术语和定义适用于 文件 3. 1 A 台兔dummy rabhit 用于诱导公兔爬跨、采集 3. 2 原精液 采集后未经稀释处理的精液 3. 3 C 采精量volume 3. 4 人 精子密度 sperm concentration 单位体积精液中的精子数，单位为亿 3. 5 精子活力 sperm motility 在37℃环境下直线前进运动精子占总精子数的百分率 4基本要求 4.1公兔调教 4.1.1调教月龄 公兔达到成年体重70%可进行调教，一般地方品种为4月龄～4.5月龄，引进品种为4.5月龄～5 月龄，有自然交配经验的公兔也可进行调教。 4.1.2调教方法 将成年发情的母兔放入公兔笼内，让公兔空爬母兔3次～4次为宜。 4.1.3调教频率 NY/T 3185—2018 配种前3周开始，每周2次～3次，每次调教时间以不超过10min为宜。 4.2采精公兔 公兔外生殖器四周的被毛作清洁消毒处理，长毛兔需剪短外生殖器四周的被毛。 4.3台兔 选择与公兔体重接近、性情温顺、四肢有力、健康的母兔。 4.4输精母兔 选择适龄的可繁母兔。 4.5设备与器具 4.5.1光学显微镜 应配置相差镜头，镜头有10×10、10×16、10×40、10×100。初次安装与调试务必将光路系统调节 好，观察视野能受到均匀而又充分的照明，恒温载物台提前预热。 4.5.2采精器 采精器组成及组装方法见附录A。 4.5.3稀释液及激素 稀释液可选择5%葡萄糖溶液、0.9%生理盐水或商品稀释液，激素选择促黄体素释放激素A3 (LRH-A）,质量应符合《兽药国家标准(化学药品、中药卷)第一册》的规定。 4.6输精器械 输精枪、输精管按配种母兔数量配备。 4.7精液运输保存器具 保温箱、车载恒温箱及其他保温容器。 4.8计量器具(温度计、天平、量筒、移液器、恒温箱、水浴锅、显微镜恒温载物台、压力容器等)应按照规 定的时间进行检定和校准。 4.9所用的器具在使用前后清洁消毒，不同材质的器具采用相应的洗涤和消毒方法。 5采精技术 5.1方法 将台兔放人公兔笼内，当公兔爬跨时，一手抓台兔双耳及颈部皮肤使其头部朝向操作者，压低台兔 头部，另一手握组装好的采精器并置于台兔腹下两后腿之间，顺势抬高台兔臀部，使采精器无集精瓶 端与台兔外阴部相平或略超出一些，与水平约呈30°角，同时根据阴茎伸出的方向和角度及时调整采精 器位置，迎合公兔阴茎插人。公兔射精后，立刻竖起采精器，尽快将精液送检， 5.2频率 每周不宜超过3次，如果连续采精2次至少休息1d。 6精液检查 6.1感官 乳白色或灰白色，无味或略带腥味，及时剔除胶状物， 6.2采精量 从刻度集精管读取采精量。 6.3活力 按GB/T25172—2010中3.3和5.3.3方法测定，活力60%以上。 6.4密度 2 NY/T 3185—2018 采用目测法，在显微镜视野中按照精子间隙大小分为4个等级：密、中、稀和无，其代号为十十十、 十，“，° 精子长度的明显空隙；“十”指视野中精子间空隙很大；“一”指视野中无精子。十十（含十十）以上方可 稀释。 6.5记录 详细记录精液品质检查的各项指标，表格见附录B。 7精液稀释 7.1精液采集后应尽快稀释。 7.2精液在 30℃～35℃之间等温稀释,稀释时轻轻转动集精瓶,混匀。 7.3根据采精量、精子活力和精子密度确定稀释倍数。密度“十十十”的精液按10倍～15倍进行稀 释，密度“十十”的精液按5倍～9倍进行稀释。每只母兔输精量为0.5mL～1mL，每份输精剂量中确 保前进运动精子数不低于0.2亿个。 7.4稀释完成后,随机抽样进行检查。 8精液保存和运输 8.1精液一般现采现用。 8.2 精液应在16℃～18℃环境中保存,2d内用完。 8.3精液在运输过程中，应保持规定温度，避免剧烈振荡，并尽可能缩短途中运输时间。精液使用前， 水浴升温至25℃,方可输精。 9输精 9.1输精前轻轻旋转集精瓶至精子混合均匀，输精时操作者一手抓住母兔尾根及臀部皮肤倒提母兔使 后肢离地,另一只手用酒精消毒外阴。拇指下压阴门至外翻后,用拇指、食指和中指抓住输精管末端与 输精枪连接处将输精管沿着阴道上壁缓慢插入7cm～12cm处，即到达子宫颈口附近，遇阻力稍回抽一 点，再将精液缓慢输入母兔体内。输精结束后，用手轻捏母免外阴部并轻拍臀部。 9. 2 输精后肌肉注射促黄体素释放激素 A;(LRH-A;)0.5 μg/只～1. 0 μg/ 只。 9.3将配种日期、与配公兔情况等相关信息登记在母兔卡片上，表格见附录C。 3 NY/T 3185—2018 附录A (规范性附录) 采精器组成及组装方法 A.1采精器组成 包括假阴道外壳、假阴道内胎和集精瓶,经清洗、高温煮沸或微波消毒后备用。采精前将外壳和内 胎组装成假阴道，假阴道 先将光面朝内的 分别翻套在外壳的两端,且保持内胎 松紧适度，平滑无扭转 然后在两端分别套上橡皮圈或用胶水粘接 固定内胎；接 C的温水通过外壳 完上的小孔用漏斗注人假阴道的夹层中，且尽量使夹层不 含有空气，以 形 龙采精所 的压力和温度，最后用塞子将外壳小孔堵住 同时检查内胎禾 和外壳小孔是否 有漏水现象 装完毕 后，将2ml剂量的稀释液倒人假阴道中进行压力 检测，正 常 为 2 s～3s稀释液 全部漏人集精 胎过紧、压力过大。利用温度 42℃～45℃即可 RCH, A.3无水假阴道组装 先将内胎人 从中间 内胎两 部分各保持 cm 3 cm 长度，先将外壳粗端 一边内胎反套 固定， 漏斗 状、中间为针眼 样大小空隙日 内胎反套固定.并用橡皮圈或胶水将内胎两端粘接固定在外壳上 月道即制作完成。 组装完毕后 过调节插人的深度调控压力,同时将 集 2mL剂量 的稀释液倒入假阴 道中利用上述方 法进行压 假阴道的温度是通过将假阴道放人 5℃以 人上的温水中浸泡形成所 即可。 人 NY/T 3185—2018 附录B (规范性附录) 公兔精液品质检查记录表 公兔精液品质检查记录表见表B.1。 表B.1公兔精液品质检查记录表 采精量 精子活力 精子密度 输精母兔 采精日期 公兔耳号 采精时间 颜色 气味 备注 检验员 mL % 亿个/mL 只数 注1：颜色按实际观察的情况填写。 注2：气味按“正常”或异常”判定。 注3：精子活力按“%”等级评定。 注4:精子密度按十十十、十十、十、一”4个等级评定。 5