ICS 67 B 22 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T 3163—2017 稻米中可溶性葡萄糖、果糖、蔗糖、棉籽糖和 麦芽糖的测定 离子色谱法 Determination of soluble glucose, fructose, sucrose, raffinose and maltose in rice -Ion chromatography method 2017-12-22 发布 2018-06-01实施 中华人民共和国农业部发布 NY/T 3163—2017 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由农业部种植业管理司提出并归口。 本标准起草单位：中国水稻研究所、农业部稻米及制品质量监督检验测试中心、中国计量大学。 本标准主要起草人：胡贤巧、陈铭学、方长云、段彬伍、朱敏、邵雅芳、卢林、朱智伟。 I NY/T 3163—2017 稻米中可溶性葡萄糖、果糖、蔗糖、棉籽糖和麦芽糖的测定 离子色谱法 1 范围 本标准规定了稻米中可溶性葡萄糖、果糖、蔗糖、棉籽糖、麦芽糖的离子色谱-电化学检测方法。 本标准适用于大米、糙米中葡萄糖、果糖、蔗糖、棉籽糖、麦芽糖5种可溶性糖的测定。 本标准的检出限见附录 2规范性引用文件 RD 不可少的。 是注日期 手文件 本（包括所有的修订 GB5009.3 食品安全国家标准 食品中水分的测定 RESE GB/T 668 子析实验 用水规格 和试验 S 3原理 试样中的葡萄糖果糕 糖、蔗糖、棉籽糖、麦芽糖 种可溶性糖用50%乙醇 溶液振 炭荡提取，稀释至合 适的浓度后采用 脉冲安培检测器测定，保留时间定性，外标法定量 4试剂 U 除非另有说 明，在 4.1氢氧化 4.2乙醇水溶液 5 和分 醇和刀 #体积 4.3 流动相 A TER 4.4流动相B:2 取 2 25 mL氢氧化钠溶液（ 子水定容至1000 mL. 4.5 葡萄糖(CAS 号 99 4.6 果糖(CAS号:57 7)标准品：纯度 4.7 蔗糖(CAS号:57-50 1)标准品：纯度 4.8棉籽糖（CAS号：17629 )标准品：纯度99%； 4.9麦芽糖(CAS号：69-79-4)标准品纯度≥99） 4.10单一标准储备溶液：分别称取0.1000g葡萄糖、0.0200g果糖、0.2000g蔗糖、0.0500g棉籽 糖、0.0500g麦芽糖单一标品，用乙醇水溶液(4.2)溶解，并定容至10mL,分别得到10.00mg/mL葡萄 糖、2.00mg/mL果糖、20.00mg/mL蔗糖、5.00mg/mL棉籽糖和5.00mg/mL麦芽糖的单一标准储 备液。冰箱低温冷藏，有效期6个月。 4.11混合标准储备液：分别移取1.00mL的葡萄糖、果糖、蔗糖、棉籽糖、麦芽糖单一标准储备液(4.6) 于100mL容量瓶中，用乙醇水溶液（4.2)定容至刻度，得到混合标准储备液。 mL混合标准储备液(4.7)于6个100mL容量瓶中，用乙醇水溶液（4.2)定容至刻度，得到混合标准工 1 NY/T 3163—2017 作溶液,其葡萄糖、果糖、蔗糖、棉籽糖、麦芽糖的浓度见表1。 表1混合标准工作溶液中葡萄糖、果糖、蔗糖、棉籽糖、麦芽糖的浓度 单位为毫克每升 糖类名称 工作标准液1 工作标准液 2 工作标准液3 工作标准液4 工作标准液5 工作标准液6 葡萄糖 1. 00 2. 00 5.00 10.00 20. 00 50. 00 果糖 0. 20 0. 40 1. 00 2. 00 4. 00 10.0 蔗糖 2. 00 4. 00 10.0 20.00 40. 00 100.0 棉籽糖 0. 50 1. 00 2.50 5. 00 10. 0 25.0 麦芽糖 0.50 1. 00 2.50 5. 00 10. 0 25.0 5仪器 5.1离子色谱仪；带有脉冲安培电化学检测器。 5.2分析天平：感量为0.0001g。 5.3振荡摇床。 5.4离心机：转速≥3000r/min。 5.5磨粉机。 5.615mL离心管。 5.750mL具塞离心管。 6分析步骤 6.1试样制备 取有代表性的稻谷样品500g，脱壳后，去除稻壳、稻谷和其他杂质，混匀后，采用四分法分取有代表 性的样品至少20g,经磨粉机磨粉后，过0.25mm筛,混匀,置于密闭容器内,冰箱低温冷藏保存备用。 6.2提取 称取0.5g(精确至0.0001g)精米粉试样或0.25g(精确至0.0001g)糙米粉试样置于15mL离心 管中,准确加入10.0mL乙醇水溶液（4.2),振荡混匀后，置于振荡摇床振荡30min。然后3000r/min 离心15min,将上清液倒人50mL具塞离心管中。再向沉淀中准确加入10.0mL乙醇水溶液（4.2）,振 荡混匀后，再次置于振荡摇床振荡30min，3000r/min离心15min，最后将第二次提取的上清液倒人同 一个具塞离心管中。两次上清液混合均匀后，取约3mL，过0.45μm微孔滤膜后，待测。 6.3测定 6.3.1仪器参考条件 色谱柱：糖离子交换柱(MetrosepCarb1柱,5.0μm，150mmX4.0mm或其他等效柱)；保护柱 (MetrosepCarb1或其他等效柱)。 流动相：流速1mL/min，流动相比例为60%流动相A十40%流动相B(V+V)。 进样量：10μL。 检测器：脉冲安培检测器，金工作电极，Ag/AgCl参比。检测电位：Ei=0.1V,ti=0.4s,E2= 0. 7 V,t2 =0. 2 s,E3=-0. 1 V,t3=0. 4 s,tsample=40 ms。 6.3.2标准曲线的绘制 将标准工作溶液进行离子色谱测定，以各种糖的浓度作为横坐标，峰面积作为纵坐标，绘制标准 曲线。 6.3.3样品中糖的测定 本方法采用标准曲线法定量，标准工作溶液和样品中被测物的响应值均应在仪器线性相应范围内， 2 NY/T 3163—2017 如浓度过高，应稀释后再进行测定。取相同体积标准工作溶液和样品溶液分别注入离子色谱仪中进行 测定。以保留时间定性，峰面积定量。在上述色谱条件下，葡萄糖、果糖、蔗糖、棉籽糖和麦芽糖标准物 质色谱图参见附录B。 6.3.4水分的测定 按照GB5009.3的规定执行。 7 结果计算 试样中葡萄糖、果糖、蔗糖、棉籽糖和麦芽糖的含量(以干基结果表示)按式(1)计算。 c X V X 100 w= 1000Xm× (100-W) (1) 式中： 样品中糖(葡萄糖、果糖、蔗糖、棉籽糖和麦芽糖)的含量,单位为毫克每克(mg/g); 根据标准曲线计算出的试样中糖的含量，单位为毫克每升(mg/L)； V—提取液体积,单位为毫升(mL); m 试样的质量,单位为克(g)； W——试样水分的质量分数,单位为百分率(%)。 测定结果取2次测定值的算术平均值,计算结果保留小数点后3位。 8精密度 在重复性条件下,获得的2次独立测试结果的绝对差值不大于这2个测定值的算术平均值的9%。 在再现性条件下,获得的2次独立测试结果的绝对差值不大于这2个测定值的算术平均值的20%。 3 NY/T 3163—2017 附 录 A （规范性附录） 稻米(精米和糙米)样品中5种游离糖检出限 稻米(精米和糙米)样品中5种游离糖检出限见表A.1。 表A.1 稻米（精米和糙米）样品中5种游离糖检出限 糖类名称 精米检出限，mg/g 糙米检出限,mg/g 葡萄糖 0.028 果糖 0.003 茂 0.141 籽糖 0.022 麦芽 0.003 NY/T 3163—2017 附录B （资料性附录） 葡萄糖、果糖、蔗糖、棉籽糖和麦芽糖标准物质离子色谱图 葡萄糖、果糖、蔗糖、棉籽糖和麦芽糖标准物质离子色谱图见图B.1。 响应值，μA 30 4 3 2 5 10 15 20 25 t,min 说明： 葡萄糖，浓度10mg/L； 棉籽糖，浓度5mg/L 2 果糖,浓度2 mg/ L; 5- 麦芽糖，浓度5mg/ L。 3——蔗糖,浓度20 mg/ L; 图 B. 1 葡萄糖、果糖、蔗糖、棉籽糖和麦芽糖标准物质离子色谱图 5