ICS 65.020.01 B 15 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T 31482017 农药室外模拟水生态系统（中宇宙） 试验准则 Guideline on outdoor simulated aquatic ecosystem (mesocosm) test for pesticides 2017-12-22 发布 2018-06-01实施 中华人民共和国农业部发布 NY/T 3148—2017 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准的技术性内容等效采用了经济合作与发展组织（OECD)测试指导文件NO.53（2006年）《模 拟静态淡水田间试验(室外微宇宙和中宇宙)》(英文版)。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任， 本标准由农业部种植业管理司提出并归口。 本标准起草单位：农业部农药检定所、沈阳化工研究院安全评价中心。 本标准主要起草人：陈朗、曲寰、赵榆、林荣华、杨海荣、姜辉、丁琦。 I NY/T 3148—2017 农药室外模拟水生态系统(中宇宙)试验准则 1 范围 本标准规定了农药室外模拟水生态系统(中宇宙)试验材料与条件、试验设计与操作、质量控制、数 据处理、试验报告等环节的基本要求。 本标准适用于室外静态淡水生态(中宇宙)系统或小型自然生态系统中的封闭围隔,不适用于室内、 实验室微宇宙，以及流动系统。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件 ，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引 用文件 ,其最新版 的修改单 态系统 NY/T 2882. 2 农药 登记环 NY/T 3151 农药登 和水 化学农药分析方法建立 和验证 3 术语和定义 S 下列术语和 定义 文件 3. 1 A simulatedaquatic ecosystem(mesocosm （中宇宙）系统试验体系，用以评 古农药 供试物对不同 水生物种群乃至整 水生生 工 3. 2 无可见效应浓度 (种群 no-observed effect concentration populatior 在一定暴露期内 对于 共试物浓度，用 NOECpopu表示。 注：单位为毫克有效成3 3. 3 无可见效应浓度(群落）ho-ob rved effect concentration( community 在一定暴露期内,对于所关注的生物群落, ，与对照组相比无明显影响白 最高供试物浓度,用 NOEComm 表示。 注：单位为毫克有效成分每升(mg 3. 4 无可观察生态不良效应浓度no observed ecologically adverse effect concentration 在中宇宙研究中不会观测到持久不良生态效应的最高浓度,用 NOEAEC表示。供试物在该浓度 水平下对中宇宙水生态系统中的生物产生了短期显著效应,但总影响时间小于8周。 注：单位为毫克有效成分每升（mga.i./L）。 3.5 无灰干重 ash free dry weight 又称为干有机质,其值为干重减去灰分。灰分指经高温灼烧(500℃～600℃)至恒重后的残留物重 量，用AFDW表示。 注：单位为克（g）。 1 NY/T 3148—2017 3. 6 丰度richness 物种的丰度(丰富度),指生物群落中物种的数量。 3. 7 多度abundance 某一物种在某个生物群落内的个体数量。 4试验概述 4.1中宇宙系统 在模拟水生态系统的人工水槽、池塘,或自然静态水域的封闭围隔中添加适当的水生生物，以建立 中宇宙试验体系。该水生态系统包含本土底泥和适宜的生物，如浮游动植物、中上层无脊椎动物、大型 底栖无脊椎动物、大型水生植物等。也可适当添加外源生物，特别是一些分布能力低的无脊椎生物（如 腹足软体动物、大型甲壳类）。 4.2试验原理 通过采样分析确认中宇宙系统适于开展试验后，将供试物添加至中宇宙系统中。试验期间定期采 样,对中宇宙系统中的相关结构性测试端点和功能性测试端点进行调查。结构性测试端点主要指种群 丰度、生物量及其空间分布、生物学分类和营养层级。功能性测试端点主要指受结构影响的所有非生物 指标,如营养盐水平、氧含量、呼吸率、矿物质浓度、pH、电导率和有机质含量等。在非除草剂类农药的 中宇宙试验中，功能性指标也可作为测试条件而非测试端点。试验通常至少需持续到最后一次施用供 试物8周后。基于各生物种群测试指标、生物群落结构指标、功能性指标/水质条件等测试端点随着时 间变化对供试物的响应情况,确定每个采样日的NOECpopu、NOECcomm等，如可能，依据生物种群恢复情 况，确定NOEAEC。 5试验方法 5.1试验条件与材料 5.1.1中宇宙系统的建立 室外中宇宙试验研究可采用人工水槽或池塘进行，也可通过在已有静态水域中设置封闭围隔进行。 宜构建一个或多个“供体池塘”,作为中宇宙系统中底泥、水和生物的共同来源。建设中宇宙系统既可使 用自然基质，也可使用惰性材料,如混凝土(适当封闭)、纤维类、树脂玻璃或不锈钢。中宇宙系统还可内 衬惰性塑料，以防止中宇宙系统与周围环境之间发生水交换。应避免增塑剂进人试验水体，必要时可使 用环氧油漆。试验体系上空应覆盖防护网，避免大型禽类的干扰。也可将小型试验系统部分埋于地下 或浸人池塘以缓冲日温波动。 关于中宇宙系统的规模参见附录A。关于试验体系中各组成要素(底泥、试验用水和生物)的详细 描述,见 5. 1. 3. 1~5.1.3. 3。 5.1.2中宇宙系统的再利用 中宇宙系统如何再次利用取决于前一试验中供试物的化学特性(尤其是持久性)和系统中的生物状 况。对于非持久性物质，如已证明在水体和底泥中检出限内无前供试物残留、且试验体系各水槽/池中 的生物易于恢复到彼此非常接近的状态，此时中宇宙系统可重新利用。否则,应将中宇宙系统中的水排 干,空置一段时间；或清除原系统并重新植人新的底泥。 5.1.3中宇宙系统的培养 5.1.3.1底泥 底泥可从“供体池塘”中采集，也可从自然系统中采集。采自清洁地区的底泥通常已包含丰富的植 2 NY/T 3148—2017 物群和动物群这些固有生物可用于建立池塘水生态系统。底泥应进行化学残留分析(包括重金属分 析)、粒径分布与有机质含量分析,如可能,进一步分析氮/磷含量、阳离子交换量、pH等。将底泥充分 混匀后加至中宇宙系统中，然后加水。底泥厚度应大于5cm。 5.1.3. 2试验用水 试验用水应进行化学残留、营养盐水平、pH、硬度、溶解氧含量及浊度分析等。 试验开始前，不同水槽/池间可适当进行水循环，但至少应在试验前1周停止，以保证试验体系相对 稳定。施药后不再进行水交换。 试验期间及时补水,使中宇宙系统中水位变化范围保持在初始水位的20%以内。在多雨季节，为 防止水从中宇宙系统中溢出，可采取遮盖措施。紧急情况下，可将水出。如果在施药后将水出，应 估算移走的药量（依据出的水体积推算，或者进行化学分析）。 5.1.3.3生物 中宇宙系统通常是- 型水生植物、浮游无脊椎 关手毕物类型及其在中宇宙系统中 宇宙试验通常应包括经 的详细要求,参见附录 5. 1. 3. 4 驯化培养 施药前,中宇宙系统应驯化 培养兰段时间，使生物群落中的物种数量和看 可代表田间实际。 化时间与中宇 SEA 次样品。试验前， 中宇宙系统应具 有足够程度 生物多样性以满足研究目标要求，且各重复间保 ARCH 均 性。 5. 1. 4供试物 A 根据已有试验结果风 检评估结果以及试验目的，选择农药 药或制剂进 时，还应考 虑可能的供试物的 主要代谢物的相 5.1.5施药时 施药时间以春天和仲夏为宜， 宇宙系经 可观测周期较 殊情况下 下，也可依据 制剂产品的特定 使用 2次（来 确 认各水槽/ 水池之间生物与非生 物指标无 显者性差 中宇宙系统活 展试验 5. 1. 6 试验周期 根据试验目的、 衣 的环境归趋特征 次施用供试 物开始，试验持续时间通常应不少于 5.2 试验设计 5.2.1处理组与重复 除对照组外最好设置 5个浓度(任何情况下都不得低于3个),每个处理组至少 2 个重复(对照组至 少3个)。在此原则下,浓度数和重复数可根据试验目的做适当调整。 当试验目的为获得NOEC时，可 减少浓度数而增加重复数，以更好地应用统计学方法获取可靠的测试端点。例如，设置3个处理组，每 个处理组3个重复。当试验目的为考察生物种群恢复、获得 NOEAEC时,可设置 5 个处理组,每个处理 组2个重复(对照组重复数应至少3个)。对某个变量的试验设计不一定适合于其他变量,应重点关注 关键的测试端点。 5. 2. 2 浓度水平 根据已有试验及评估结果选择合适的试验浓度，通常需包括可能产生影响的浓度，如可能，还应包 括最大预测环境浓度(PEC)。浓度设定至少应包含一个不会产生明显生态效应的浓度和一个会产生明 显生态效应的浓度。 5.2.3暴露方案 3 NY/T 3148—2017 根据供试物的化学性质、施用方式、暴露途径以及试验目的等选择合适的暴露方案，包括载荷（添加 的供试物量）、施药频率等。施药次数的选择与浓度表征方法参见附录C。 5.2.4采样方案 采样方案取决于试验目的、农药性质及其在中宇宙系统中的预测分布情况等。基于初级阶段试验 所获得的核心物种生态毒性数据,以及其他高级阶段的研究结果（如扩展的单一物种测试、种群水平的 研究、室内多物种测试等),确定采样的目标生物、样本量大小和采样方法。例如,水生生物物种敏感度 分析有助于确定需进行相对详细调查的种群和群落。 中宇宙试验中代表性测试项目与测试频率参见