ICS 65.120 B 46 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T 3137-2017 饲料中香芹酚和百里香酚的测定 气相色谱法 Determination of carvacrol and thymol in feeds- Gas chromatography 2017-12-22 发布 2018-06-01实施 中华人民共和国农业部发布 NY/T 3137—2017 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由农业部畜牧业司提出。 本标准由全国饲料工业标准化技术委员会（SAC/TC76)归口。 本标准起草单位：上海市农业科学院农产品质量标准与检测技术研究所、上海市饲料质量监督检 验站。 本标准主要起草人：赵志辉、董茂锋、杨海锋、韩薇、白冰、饶钦雄。 NY/T 3137—2017 饲料中香芹酚和百里香酚的测定 气相色谱法 1范围 本标准规定了饲料中香芹酚和百里香酚含量测定的气相色谱检测方法。 本标准适用于配合饲料、浓缩饲料、添加剂预混合饲料、混合型饲料添加剂中香芹酚和百里香酚的 测定。 本标准方法中香芹酚和百 ！香酚的定量限均为5mg/kg 2规范性引用文件 仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引 新版本(包括所 有的修改单 GB/T 6682 析实验室 和试验方法 GB/T 14699 饲料 采样 GB/T 20195 试样的制备 S 3原理 试样中香芹 酚和百 里香酚经乙酸乙酯提取 化炭黑分散固 相萃取净化 火焰离 U 4试剂 除非另有 明，所 剂均为分析 4.1乙酸乙酯 4.2乙酸乙 色谱纯 4.3无水硫酸 4.4N-丙基乙 4.5石墨化炭黑 4.6香芹酚对照品 >98 4.7百里香酚对照品 4.8香芹酚和百里香酚标准储备溶液（10. mg/ nm 别准确称 芹酚（4.6）和百里香酚（4.7） 0.25g(精确至0.0001g,视其含量，换算成100%再称样）,置于25 5mL容量瓶中，用乙酸乙酯（4.2)溶 解，定容至刻度，摇勾。使香芹酚和百里香酚泌 .0mg L,储存于4℃冰箱中，有效期为3个月。 4.9标准中间溶液（1000.0μg/mL）：准确量取标准储备溶液5.0mL,置于50mL容量瓶中,用乙酸乙 酯(4.2)定容至刻度,摇匀,配制成香芹酚和百里香酚浓度为1000.0μg/mL的标准中间溶液,有效期为 2 周。 4.10 0标准工作溶液：准确量取标准中间溶液0.010mL、0.10mL、0.50mL、1.0mL、4.0mL，置于10 mL容量瓶中，用乙酸乙酯（4.2)定容至刻度，摇匀勾，配制成香芹酚和百里香酚浓度为1.0μg/mL、10.0 μg/mL、50.0μg/mL、100.0μg/mL和400.0μg/mL的标准工作溶液，临用现配。 5仪器和设备 5.1实验室常用仪器设备。 1 NY/T 3137—2017 5.2分析天平：感量0.0001g。 5.3分析天平：感量0.01g。 5.4离心机：转速4000r/min及以上。 5.5样品筛：孔径0.45mm。 5.6超声仪。 5.7涡动混合器。 5.8微孔滤膜：0.45μm，有机相。 5.9气相色谱仪（配有火焰离子化检测器）。 6采样和试样制备 按GB/T14699.1的规定抽取有代表性的样品，四分法缩减取样。按GB/T20195的规定磨碎，通 过0.45mm孔筛，混匀，装人密闭容器中，避光低温保存备用， 7分析步骤 7.1提取 称取一定量的试样（配合饲料、浓缩饲料和添加剂预混合饲料6.00g，混合型饲料添加剂1.00g）， 置于50mL离心管中，加20.0mL乙酸乙酯（4.1），超声波（5.6)提取90min（不超过30℃），其间用手摇 动2次，以4000r/min离心1min(5.4)，待净化。 7.2净化 取1.0mL提取液于存有50mg无水硫酸钠（4.3)、50mgPSA(4.4)、50mgGCB(4.5)的2mL离 心管，涡旋混合30s，经滤膜（5.8)过滤，待测。 7.3测定 7.3.1气相色谱参考条件 色谱柱：毛细管色谱柱（5%二苯基/95%二甲基聚硅氧烷），30.0m×0.25mmX0.25μm，或性能相 当者； 升温程序：80℃保持1min，以10℃/min升至120℃，再以5℃/min升至145℃，最后以35℃/ min升至250℃，保持2min; 载气流速：1.0mL/min(恒流模式）； 进样体积：1μL(不分流进样）； 进样口温度：250℃； 检测器温度：300℃； 氢气流量：30mL/min； 空气流量：300mL/min; 尾吹气流量：30mL/min; 色谱图：参见附录A中图A.1。 7.3.2标准曲线绘制 按气相色谱条件（7.3.1)，向基线平稳的气相色谱仪（5.9)连续注入标准工作溶液，浓度由低到高， 以浓度为横坐标、峰面积为纵坐标作图，得到标准曲线回归方程。 7.3.3定量测定 分别取适量的标准工作溶液和试样溶液，按上述列出参考条件进行气相色谱分析测定。按照保留 时间进行定性，以标准工作溶液作单点或多点校准，并用色谱峰面积定量。待测样溶液中香芹酚和百里 香酚的响应值应在标准曲线范围内,超过线性范围则应由乙酸乙酯(4.2)稀释后再进样分析。并在试样 2 NY/T 3137—2017 溶液分析间适当穿插标准工作溶液，以确保定量的准确性。 8 结果计算 试样中香芹酚或百里香酚的含量X以质量分数表示,单位为克每千克(g/kg),按式(1)计算。 (1) m; X 10-3 式中： C;一—试样溶液中对应的香芹酚或百里香酚浓度,单位为微克每毫升(μg/mL)； V 定容体积，单位为毫升（mL）； n 稀释倍数； m; 试样质量，单位为克(g)。 测定结果用平行测定的算术平均值表示，计算结果保留3位有效数字。 9 重复性 混合型饲料添加剂：在重复性条件下，获得的2次独立测定结果的绝对差值应不大于这2个测定值 的算术平均值的5%；配合饲料、浓缩饲料和添加剂预混合饲料：在重复性条件下，获得的2次独立测定 结果的绝对差值应不大于这2个测定值的算术平均值的20%。 3 NY/T 3137—2017 附 录 A (资料性附录） 百里香酚和香芹酚标准溶液气相色谱图 百里香酚和香芹酚标准溶液气相色谱图见图A.1 pAt 百里香酉 50 P 30 20 9.25 7 ,mir 百里香酚和香芹酚标准溶液(10 μg/mL)气相色 人 NY/T 31372017 中华人民共和国 农业行业标准 饲料中香芹酚和百里香酚的测定 气相色谱法 NY/T3137—2017 * ? 中国农业出版社出版 (北京市朝阳区麦子店街18号楼) （邮政编码：100125 网址：www.ccap.com.cn) 北京印刷一厂印刷 新华书店北京发行所发行 各地新华书店经销 * * * 开本880mmX1230mm1/16 印张0.75 字数15千字 2018年5月第1版 2018年5月北京第1次印刷 书号：16109·4343 定价：18.00元 版权专有侵权必究 NY/T 3137-2017 举报电话：（010）65005894