ICS 65.020 B 16 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T 3060.6—2016 大麦品种抗病性鉴定技术规程 第6部分：抗黄矮病 Code of practice for evaluation of barley varieties for resistance to disease- Part 6: Yellow dwarf 2016-12-23 发布 2017-04-01实施 中华人民共和国农业部 发布 NY/T 3060. 6—2016 前言 NY/T3060《大麦品种抗病性鉴定技术规程》分为8个部分： 第1部分：抗条纹病； 第2部分：抗白粉病； 第3部分：抗赤霉病； 第4部分：抗黄花叶病； 第5部分：抗根腐病； 第6部分：抗黄矮病； 第7部分：抗网斑病； 第8部分：抗条锈病。 本部分为NY/T3060的第6部分 本部分由农业部种子管理局提出并归口。 本部分起草单位：中国农业科学院植物保护研究所、全国农业技术推广服务中心、西藏自治区农牧 科学院、西藏大学。 本部分主要起草人：冯晶、蔺瑞明、邱军、王凤涛、强小林、王文峰、王翠玲、彭岳林、陈万权、徐世昌 I NY/T 3060.6—2016 大麦品种抗病性鉴定技术规程 第6部分：抗黄矮病 1 范围 本部分规定了大麦黄矮病抗病性鉴定的技术方法和抗病性评价标准。 本部分适用于大麦（Hordeum ulgare L.）品种对黄矮病抗性的田间鉴定和抗病性评价。 2术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 2. 1 抗病性 disease resistance 植物体所具有的能够减轻或克服病原物致病作用的可遗传的性状。 2. 2 抗病性鉴定identification of disease resistance 通过相应技术方法和标准鉴别寄主植物对特定侵染性病害的抵抗水平。 2. 3 致病性pathogenicity 病原物所具有的破坏寄主和引起病变的能力。 2. 4 人工接种 artificial inoculation 在适宜条件下，通过人工操作将接种体放于植物体适当部位并使之发病的过程。 2. 5 抗性评价 evaluation of resistance 根据采用的技术标准判别植物寄主对特定病虫害反应程度和抵抗水平的描述。 2. 6 株系strain 从不同病植株上获得的血清学相关的同种病毒,对不同品种具有致病力差异的病毒株。 2.7 接种体inoculum 能够侵染寄主并引起病害的病原体。 2. 8 严重度severity 发病植物单元上发病面积或体积占该单元总面积或体积的百分率。严重度用分级法表示，是将发 病的严重程度由轻到重划分出几个级别，分别用各级的代表值或百分率表示，说明病害发生的严重 程度。 2. 9 大麦黄矮病barley yellow dwarf 由大麦黄矮病毒(Barleyyellowdwarf virus,BYDV)侵染所引起的大麦病毒病。大麦黄矮病毒 NY/T 3060.6—2016 只能通过蚜虫传播，主要介体昆虫有麦二叉蚜、麦长管蚜、禾谷缢管蚜、玉米蚜、麦无网长管蚜、百合蚜、 莓蚜、早熟禾缢管蚜、苹果缢管蚜（参见附录A）。症状是受BYDV侵染的植株老叶片绿色组织沿叶边 缘、叶尖或叶片中间出现不均匀褪色斑，褪色区域经常呈鲜黄色，但病变组织变为红色或紫色。这种点 片状、不均匀褪色是大麦黄矮病最典型特点之一。还表现为植株矮化，病株受到严重侵染时不能抽穗或 分减少、根系入土浅，常发生败育。 3病原物接种体制备和保存 3.1传毒介体的采集、纯化与标准饲养 将田间麦二叉蚜（Schizaphisgraminum）、麦长管蚜（Sitobionavenae）和禾谷缢管蚜（Rhopalosi- phumpadi)的无翅成蚜采回室内,用毛笔挑取成 蚜刚 若蚜，分别喂养在盆栽的健康大麦幼苗上， 隔离房间扣罩饲养或在养虫笼内饲养 光照时间为14h/d。 3.2毒源株系及繁殖 根据传毒介体的 委病毒 GPV.P PAV和RMV4个株 系。GPV株系主要 是由麦 播；PAV株系为 叉蚜，RMV株系 不同株 致病性 禾缢管蚜、麦长管蚜和麦 为玉米蚜 鉴定应以当地流行 采集由间具有典型大麦黄矮病症状的病株叶片，剪成 C2 株系为病毒接种体 cm 小 段，用饥饿24 黄病 h 的无毒蚜虫进 主 要株系种类。 分别以株系专化性蚜 牙虫为传 专毒介体，接种到指示作物“岸黑”燕麦（Avena satit E Black）上，大 麦黄矮病在岸黑燕麦 的症状为橘红色，适宜发病温度为18℃ 25℃光照 强度在 15 000~25000 RCH 1x。 R 3.3株系的保存 株系常年保存 防虫 CUL 鉴定圃设置 4.1！ 鉴定圃选址 鉴定圃设在 约地块。 4.2播种时期及播 鉴定圃播种时间 成适当 和发病期能够与 适宜的气候条件(湿度 温度）相遇 冬性品种按当地气候正常秋播,弱冬性品利 免秋播，春性品种顶凌 春播。条播，每延长米播种量 ，每穴播种1 20粒 3g；穴播 4.3田间布局及种植方式 采用等行距配置、顺序排列方式种植，哇宽0.5m，宽2.0ml,哇长视地形、地势而定；垂直于哇 种植鉴定材料,3次重复,鉴定病圃四周种植2行 通常自然诱导发病鉴定采用条播法， 人工接种鉴定采用堆测法播种。 a）条播法：每个鉴定品种播种3行，行长1.0m，每次重复设1组抗病和感病对照品种。 b）堆测法：穴播，穴距0.25m，每隔19个材料播种1穴当地感病品种做对照，每个品种在接种哇 和对照哇各播种1穴。 4.4接种 4.4.1接种时期 成株期鉴定在大麦分孽期接种。 4.4.2接种方法 采用带毒蚜虫人工接种法。采集经大量扩繁的大麦黄矮病毒纯合株系并具典型症状的病叶，将病 2 NY/T 3060.6—2016 叶剪成1cm～2cm小段，放入保湿的培养皿内（培养皿底部放滤纸并加适量水），然后投放经饥饿了约 24h的无毒蚜虫（根据所用株系选用适宜的传毒蚜虫），将培养血盖严，放入15℃生长箱内，在黑暗条件 下离体饲毒24h～48h。之后将已获带毒蚜虫用毛刷放置到大麦植株叶片上进行接种。穴播材料每穴 放45头。接种7d后，全田喷施灭蚜药（10%吡虫啉WP），杀灭各种蚜虫 4.5田间管理 土壤肥力水平和耕作管理与大田生产相同，出苗后每隔15d全田喷杀虫剂，防止外界蚜虫干扰。 另外，接种7d后也采取相同措施，避免蚜虫干扰。及时锄草、施肥，若田间干旱应及时浇灌，保证植株 健康生长。 病情调查 PUBLI 5. 1 调查时间 抗性鉴定调查 在大 5.2调查方法 条播品种每个重 重复含选 查，穴播品种逐 查20茎，记载产 重度每 1周调 根据 调查结 正，使得待鉴定品种在同 时期的情况 下进 比较，以消除待鉴， 育时期不 抗病 性程度的差异。 S 5.3 病情分级 成株期用 目测法 国内6级 RA 黄矮病成株期抗 及症状描 严重 度 症状描述 有叶片无黄化 旗叶黄化面积占旗叶总面积的1/2 其他口 黄化面 只 1/2以下 占旗叶总面积的 叶黄化面积 其他叶片 51/2以上 植株矮化显著 ，穗变小甚至不抽稚 通过对鉴定 平均严重度。平均严重 度按式(1)计算 (1) 式中: s 平均严重度； Z 病级数（0～n）; 病情为i级的单元数； 病情为i级严重度值。 6 抗病性评价 6.1 鉴定有效性判别 当鉴定圃中的感病对照品种平均严重度达到其相应感病程度，该批次抗黄矮病鉴定结果视为有效， 6.2抗性评价标准 依据成株期鉴定品种的平均严重度分级，评价其抗性水平，具体评价标准见表2。 3 NY/T 3060.6—2016 表2大麦成株期对黄矮病抗性的评价标准 平均严重度 抗性评价 0 免疫型Immune(IM) 0'1>S>0 高度抗病型Highlyresistant(HR) 1. 0≤S<2. 0 抗病型 Resistant(R) 2. 0S<3. 0 中度抗病型Moderately resistant(MR) 3. 0S<4. 0 感病型Susceptible(S) 4. 0≤S 高度感病型 Highly susceptible(HS) 6.3重复鉴定 凡是平均严重度为3.0以下的材料，翌年以同样的方法重复鉴定。经2年重复鉴定，平均严重度为 3.0以下的材料才能定为抗病材料。 6.4抗性评价 根据两年抗病性鉴定结果对供鉴材料进行抗病性评价。如果两年鉴定结果不一致时，以抗病性弱 的级别为准，即抗病性以记载的最高病情级别为准。若一个鉴定群体中出现明显的抗、感分离，则在调 查记载表中注明抗病性分离，以R/S表示，前则代表抗病植株，后者代表感病植株。 鉴定记载表格 大麦抗黄矮病鉴定原始记录及结果记载表格见附录B。 8检测质量控制标准 8.1抗病性评价结论，每个品种需要鉴定2次，记录最高严重度。 8.2在每次接种前需对所用病毒纯合株系进行鉴定，确保所用株系相同。 4 NY/T 3060.6—2016 附录A （资料性附录） 大麦黄矮病病毒 A.1病原学名和形态描述 大麦黄矮病毒（Barleyyellowdwarfvirus，BYDV），其编码程式：R/1:2/：S/S:S/Ap。粒体球形 （正20面体），直径24nm～30nm，沉降系数115S～118S,致死温度65℃～70℃（或60℃～70℃），稀释 倍数终点1X10-3。病毒颗粒内含一条单链RNA基因组,其分子量约为2X106Da,约占颗粒总重量的 28%。病毒蛋白衣壳主要由一分子量为22000Da的蛋白亚基组成。 A.2病毒株系与传播介体 根据传毒介体的专化性和鉴别寄主反应，美国和加拿大鉴定出5个