ICS 65.020 B 04 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T 2017-2011 植物中氮、磷、钾的测定 Determination of nitrogen, phosphorus and potassium in plants 2011-09-01 发布 2011-12-01 实施 中华人民共和国农业部 发布 NY/T 2017—2011 前言 本标准按照 GB/T 1.1--2009给出的规则起草。 本标准由中华人民共和国农业部种植业管理司提出并归口。 本标准起草单位：农业部果品及苗木质量监督检验测试中心(郑州)、中国农业科学院郑州果树研究 所。 本标准主要起草人：方金豹、庞荣丽、郭琳琳、谢汉忠、李君、罗静、俞宏、刘彦、吴丰魁。 I NY/T 2017—2011 植物中氮、磷、钾的测定 1 范围 本标准规定了植物样品中用硫酸一过氧化氢消煮、全自动定氮仪测氮、分光光度法测磷、火焰原子 吸收分光光度法测钾的检测方法。 本标准适用于植物样品中氮、磷、钾的测定。 本标准方法线性范围。磷：钼锑抗吸光光度法为0.001mg/L～1.0mg/L，钒钼黄吸光光度法为 0. 01 mg/ L~10. 0 mg/ L;钾为 0. 01 mg/ L~1. 0 mg/ L 本标准方法检出限。氮为0.01g/100g;磷：钼锑抗吸光光度法为0.0005g/100g，钒钼黄吸光光度 法为0.002g/100g;钾为0.002g/100g。 2 规范性引用文件 下列文件对本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T 601化学试剂标准滴定溶液的制备 GB/T 602化学试剂杂质测定用标准溶液的制备 GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法 3原理 植物中的氮、磷大多数以有机态存在,钾以离子态存在。样品经硫酸和过氧化氢消煮,有机物被氧 化分解，使样品中的有机氮化物转化成无机铵盐，有机磷转化成无机磷酸盐，用同一消解液分别测定氮 (N)、磷(P)、钾(K)的含量。 氮的测定：消解液经碱化，加热蒸馏出氨，经硼酸吸收，用标准酸滴定其含量。 磷的测定:在一定酸度下,消解液中的正磷酸与偏钒酸和钼酸生成黄色的三元杂多酸,用比色法测 定磷含量,即钒钼黄吸光光度法。或在一定酸度下,消解液在三价锑离子存在下,其中的正磷酸与钼酸 铵生成三元杂多酸，被抗坏血酸还原为磷钼蓝，用比色法测定磷含量，即钼锑抗吸光光度法。 钾的测定：将处理过的样品导入原子吸收分光光度计的火焰原子化系统中，使钾离子原子化，钾的 基态原子吸收钾空心阴极灯发射的共振线，在共振线766.5nm处测定吸光度，其吸光度值与钾含量成 正比,与标准系列进行比较定量。 4 试剂 除非另有说明,所用水应达到GB/T 6682规定的二级水要求,所用试剂均为分析纯试剂。 4.1 硫酸(H2SO4)。 4.2过氧化氢(H2O2,30%)。 4.3氢氧化钠(NaOH)。 4.4 硼酸(H:BO)。 4.5 钼酸铵[(NH4)。MorO24· 4H2O]。 4.6 偏钒酸铵(HNO:V)。 4.7 酒石酸锑钾(KSbOC H4O·1/2H²O)。 1 NY/T 2017--2011 4. 8 抗坏血酸(CH:Os)。 4.9氯化(CsCI)。 4.102,6-二硝基苯酚或 2,4-二硝基苯酚(CH4N2Os）。 4.11氢氧化钠溶液（400g/L)：称取400g氢氧化钠，用水溶解并定容至1000mL。 4.12硼酸接收液(10g/L):称取100mg溴甲酚绿溶于100mL乙醇,即成0.1%溴甲酚绿溶液。另称 取100mg甲基红溶于100mL乙醇,即成0.1%甲基红溶液。称取100g硼酸,用水溶解并定容至10L， 添加100mL0.1%溴甲酚绿溶液和70mL0.1%甲基红溶液，即为10g/L硼酸接收液。 4.13氢氧化钠溶液（240g/L)：称取24g氢氧化钠，用水溶解并定容至100mL。 4.14硫酸溶液(2mol/L):吸取5.6 mL硫酸加水并定容至100mL。 4.15钒钼酸铵溶液：称取25.0g钼酸铵溶于400mL水中，必要时可适当加热，但温度不得超过60℃。 另将1.25g偏钒酸铵溶于300mL沸水中,冷却后加人125mL硫酸。将钼酸铵溶液缓缓注入偏钒酸铵 溶液中,不断搅匀,最后用水稀释至1L,避光贮存。 4.16钼锑抗显色剂：称取0.5g酒石酸锑钾，溶解于100mL水中，即成0.5%的酒石酸锑钾溶液。另 称取10.0g钼酸铵，溶解于450mL水中，缓慢加126mL硫酸，再加人0.5%酒石酸钾溶液 100mL，最后用水稀释至1L，避光存，即为钼锑抗贮存液。称取1.50g抗坏血酸溶于100mL钼锑贮 存液中，即为钼锑抗显色剂，该显色剂现用现配。 4.17氯化溶液（50g/L)：称取5.0g氯化，用水溶解并定容至100mL。 4.18硫酸标准滴定溶液c(1/2H2SO4）:0.01mol/L,按GB/T601方法配制并标定。 4.19磷标准储备液(1000 mg/L):购买国家有证磷单元素标准溶液或用工作基准试剂磷酸二氢钾按 GB/T 602的方法配制。 4.20钾标准储备液(1000 mg/L)：购买国家有证钾单元素标准溶液或用工作基准试剂氯化钾按 GB/ T602的方法配制。 4.21磷标准使用液I（50mg/L）：用水将1000mg/L磷标准贮存液逐级稀释至50mg/L。 4.22磷标准使用液 Ⅱ（10 mg/ L):用水将1000 mg/ L磷标准贮存液逐级稀释至10 mg/ L。 4.23钾标准使用液(10 mg/ L):用水将1 000 mg/ L钾标准贮存液逐级稀释至10 mg/L。 4.24二硝基苯酚指示剂(2 g/L):称取 0.2 g 2,6-二硝基苯酚或 2,4-二硝基苯酚,用水溶解并定容至 100 mL. 5仪器 5.1全自动定氮仪。 5.2分光光度计。 5.3原子吸收分光光度计：备有火焰检测器。 5.4 分析天平,感量为0.0001g。 5.5 消煮炉。 6分析步骤 6.1试样制备 新鲜样品，用自来水和去离子水依次清洗后，用干净纱布轻轻擦去其表面水分，用四分法取样或直 接放入组织捣碎机中制成匀浆，备用。植物干样，先将样品在80℃～90℃鼓风烘箱中烘15min～ 30min，然后降温至60℃～70℃，赶尽水分，用植物样品粉碎机粉碎，过40目筛混匀，备用。 6.2试样消解 2 NY/T 2017—2011 称取均匀植物干样 0.1 g～0.5g(精确到0.000 1g)于 100 mL消化管内,加 1 mL水润湿。或称取 新鲜试样1g～5g(精确到0.0001g)于100 mL消化管内。在消化管内加人5mL硫酸,摇匀,分两次加 人过氧化氢，每次2mL，摇匀,加盖小漏斗，待激烈反应结束后，置于消煮炉上加热消煮，使固体物消失 成为溶液，待硫酸发白烟，溶液成褐色时，停止加热。稍冷后加人10滴过氧化氢，继续加热消煮约5 min,冷却,再加人10滴过氧化氢消煮，如此反复至溶液呈无色或清亮后（一般情况下，加过氧化氢总量 约6 mL～10 mL)再继续加热5 min，以除尽多余的过氧化氢。取下冷却后,用水将消化液全部转移到 100 mL容量瓶中,定容,用滤纸过滤或放置澄清即得待测液 A,用于氮(N)、磷(P)、钾(K)的测定。同时 做试剂空白试验。 6.3测定 6.3.1氮的测定：凯氏定氮仪法 6.3.1.1仪器参考条件 启动定氮仪,先添加硼酸接收液（4.12)（弃去前面的接收液，直到开始流出正常酒红色接收液），之 后预热蒸汽发生器。设定定氮仪分析程序,输入标准酸的浓度，精确到0.0001mol/L。选择硼酸接收 滴定判定终点的定氮仪进行测试。 6.3.1.2蒸馏及滴定 准确吸取10.00mL20.00mL待测液A于消化管内，将消化管放人仪器中。按仪器要求进行蒸 馏，先进行空白检测，样品测定结束后打印数据。 6.3.1.3样品中氮(N)含量的计算 样品中氮(N)的含量以质量分数计,数值以克每百克(g/100g)表示,按式(1)计算： (1) mX (Vi/) 式中: c——(1/2 H2SO4)硫酸标准滴定溶液浓度,单位为摩尔每升(0.01 mol/L); V²-—一样品消耗的标准酸溶液的体积,单位为毫升(mL); V。一一空白消耗的标准酸溶液的体积,单位为毫升(mL); Vi一—蒸馏时吸取待测液 A 的体积,单位为毫升(mL); V一一待测液 A 定容体积,单位为毫升(mL); m-—试料质量,单位为克(g); 0.0140—1mol/L硫酸标准滴定溶液c(1/2H²SO)1mL相当于氮的质量,单位为克(g)。 计算结果保留三位有效数字。 6.3.2磷的测定 6.3.2.1钒钼黄吸光光度法 6.3.2. 1.1标准工作曲线 分别吸取磷标准使用液 I（4.21)0.0mL、2.0 mL、4.0 mL、6.0mL、8.0mL、10.0 mL于50 mL容 量瓶中,再加人与吸取待测液A等体积的空白消化溶液,用水稀释至约30mL，加1滴～2滴二硝基苯 酚指示剂（4.24），滴加240g/L氢氧化钠溶液（4.13)中和至刚黄色，然后加人10.0mL钒钼酸铵溶液 (4. 15),摇匀,用水定容,即得 0. 0 mg/ L、2. 0 mg/ L、4. 0 mg/ L、6. 0 mg/ L、8. 0 mg/L、10. 0 mg/ L磷(P) 标准系列溶液。在室温高于15℃的条件下放置30min，用分光光度计在波长450nm处