ICS 65.100 B 17 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T 1859.7—2014 农药抗性风险评估 第7部分： 抑制乙酰辅酶A羧化酶除草剂抗性风险评估 Guidelines on the risk assessment for pesticide resistance- Part 7 : The risk assessment of weed resistance to acetyl-coenzyme A carboxylase ( ACCase ) inhibiting herbicides 2014-10-17发布 2015-01-01实施 中华人民共和国农业部 发布 NY/T 1859.7—2014 前 言 NY/T1859《农药抗性风险评估》为系列标准： 第1部分：总则； -第2部分：卵菌对杀菌剂抗药性风险评估； 第3部分：蚜虫对拟除虫菊酯类杀虫剂抗药性风险评估； 第4部分：乙酰乳酸合成酶抑制剂类除草剂抗性风险评估； 第5部分：十字花科蔬菜小菜蛾抗药性风险评估； 第6部分：灰霉病菌抗药性风险评估； 第7部分：抑制乙酰辅酶A羧化酶除草剂抗性风险评估： 本部分是《农药抗性风险评估》的第7部分。 本部分按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 本部分由中华人民共和国农业部提出并归口。 本部分起草单位：农业部农药检定所、中国农业科学院植物保护研究所。 本部分主要起草人：张佳、李香菊、袁善奎、崔海兰、聂东兴、何静、赵肖静。 I NY/T 1859. 7--2014 农药抗性风险评估 第7部分：抑制乙酰辅酶A羧化酶除草剂抗性风险评估 1 范围 本部分规定了农药登记用抑制乙酰辅酶A羧化酶除草剂抗性风险评估的原则和要求。 本部分适用于杂草对抑制乙酰辅酶A羧化酶除草剂抗性风险评估。杂草对抑制乙酰辅酶A羧化 酶除草剂的抗药性监测、抗药性鉴定及抗药性治理可参照本部分执行。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的应用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修订单)适用于本文件。 NY/T1155.4农药室内生物测定试验准则除草剂第4部分：活性测定试验茎叶喷雾法 叶喷雾法 NY/T1667-2008农药登记管理术语（所有部分） 3术语和定义 NY/T1667-2008界定的以及下列术语和定义适用于本文件。 3. 1 乙酰辅酶A羧化酶acetyl-coenzyme A carboxylase (或 acetyl-coA carboxylase,ACCase) 在脂肪酸生物合成过程中起关键作用的一类生物素蛋白，催化乙酰辅酶A羧化生成丙二酰辅酶 A。而丙二酰辅酶A在细胞质中参与脂肪酸链的延长和次生代谢产物的合成。按其结构，乙酰辅酶A 羧化酶分为同质型和异质型。 3. 2 抑制乙酰辅酶 A羧化酶除草剂acetyl-coenzyme A carboxylase(或acetyl-coA carboxylase，ACCase) inhibiting herbicides 以同质型乙酰辅酶A羧化酶为作用靶标的一类除草剂。主要包括芳氧苯氧丙酸酯类（aryloxyphe noxypropionates，AOPPs或FOPs）、环已烯酮类（cyclohexanediones，CHDs或DIMs）和苯基吡唑啉类 （phenylpyrazolines，PPZs或DENs）。用于防除禾本科杂草。 3. 3 整株生物测定法whole-plant bioassay 通过整株杂草生物量对除草剂系列浓度的反应，建立除草剂剂量与杂草生物量的关系，以杂草地上 部生物量受除草剂的抑制程度来评价其对除草剂抗性的方法。 3. 4 生长抑制中量 the dose required for 50% growth reduction relative to untreated control(GR5o ) 使杂草地上部生物量降低50%的除草剂剂量。 3. 5 敏感种sensitive species 1 NY/T 1859.7—2014 能被除草剂登记的推荐剂量杀死的杂草种类， 3. 6 敏感生物型sensitive biotype 能被除草剂登记的推荐剂量杀死的杂草生物型。 3. 7 抗性生物型 resistant biotype 敏感种内不能被除草剂登记的推荐剂量杀死的杂草生物型。 3. 8 抗性指数 resistance index 同一除草剂对杂草抗性生物型GR5o（EDo或IC5o）与其敏感生物型GR50（EDsn或ICs）的比值。 4抗性风险评估 4.1抗性风险影响因子 4.1.1除草剂 包括除草剂作用靶标、持效期、相同作用机制的其他除草剂抗性发生频率。 4.1.2靶标杂草 包括杂草生活周期、繁殖系数、种子寿命、抗药性突变起始频率和适合度。 4.1.3农事操作 包括同一类作用机制除草剂每年施用次数、使用量、种植作物种类、轮作方式和耕作方式。 4.2抗性风险评估内容 4.2.1杂草抗药性水平 杂草对除草剂抗性水平的评估采用整株生物测定法。 4.2.1.1靶标杂草的选择 试验杂草种子应分别来源于用药区域和未用药区域，需有足够的种子量，发芽率85%以上， 供试种：应为对被评价除草剂敏感的杂草种，不应选择对被评价除草剂有耐受性的杂草种；每种杂 草至少包括4～5个不同生态类型区的样本。 对照种：与供试材料种类对应，来源于未使用过抑制乙酰辅酶A羧化酶除草剂的区域。 供试种和对照种需有足够的种子数量，种子发芽率85%以上。 4.2.1.2种群培养及生物测定 种群培养及生物测定方法按NY/T1155.4或NY/T1155.9要求执行。测定两种不同来源的杂 草生物型对待评估除草剂的GRso或EDsα。 4.2.1.3抗性指数计算 抗性指数按式(1)计算。 RI = / (1) 式中： RI — 抗性指数； 用药区杂草种群的GRs0或ED50，单位为克每公（g/hm²） 2 未用药区杂草种群（敏感生物型）的GRs0或ED5o，单位为克每公项（g/hm²）。 4.2.1.4抗性水平评价 抗性指数≤1.00，表明供试杂草种群对靶标除草剂无抗性；10.00>抗性指数>1.00，表明供试杂草 种群对靶标除草剂中等抗性；抗性指数≥10.00，表明供试杂草种群对靶标除草剂高抗。 4.2.2靶标杂草抗药性机理 2 NY/T 1859.7—2014 采用附录A的测定方法，检测由靶标酶敏感性变化引起的抗药性。采用附录B的测定方法，检测 ACCase基因突变引起的抗药性。 4.2.3靶标杂草交互抗药性 靶标杂草应为对已经登记的抑制乙酰辅酶A羧化酶除草剂产生中等以上抗性的种群。采用4.2.1.2 方法，同时测定该种群对被评价药剂和已登记药剂的抗性指数。按4.2.1.3方法，评价靶标杂草对两药剂 的抗性水平。如果靶标杂草对被评价药剂的抗性指数>1.00，则两药剂之间可能具有交互抗性。 4.2.4抗性风险级别分析 根据除草剂类别、靶标生物特性、产生抗性频率以及抗性指数将抗性风险分成高、中、低三个级别。 4.2.4.1高抗性风险 田间有相同作用机制的药剂使用，同类药剂有较多抗性生物型报道，农事操作方面每年施用同类作 用机制的除草剂2次或2次以上、大面积种植单一作物、连作或与使用相同作用机制除草剂的作物轮 作，抗性指数≥10.00，属靶标突变，有交互抗性，风险值高。 4.2.4.2中等抗性风险 田间有相同作用机制的药剂使用，同类药剂少有抗性生物型报道，农事操作方面每年施用同类作用 机制的除草剂1次、作物种植布局合理，10.00>抗性指数1.00,靶标突变和交互抗性不确定，风险值 中等。 4.2.4.3低抗性风险 田间无相同作用机制的药剂使用，同类药剂无抗性生物型报道，农事操作方面轮换施用同类作用机 制的除草剂、作物种植布局合理，抗性指数<1.00，无靶标突变和交互抗性，风险值低。 5抗性风险管理 5.1一般原则 对于高抗性风险的药剂，农药生产企业需要为登记的产品提供抗性风险评估资料及管理措施，并在 产品标签和使用说明书上注明相应的抗性杂草种类、是否存在交互抗性的药剂及如何规避抗性风险。 对于中等抗性风险的药剂，鼓励农药生产企业为登记的产品提供抗性风险评估资料及管理措施，并在产 品标签和使用说明书上注明相应的抗性杂草种类、是否存在交互抗性的药剂及如何规避抗性风险。 5.2抗性风险管理措施 5.2.1杂草综合治理 利用生态控草、生物防治、轮作及合理耕作、机械除草及人工除草等措施防除杂草，减少化学药剂的 使用次数。 5.2.2限制性使用技术 对于高、中等抗性风险药剂应规定年使用或连续使用次数、使用时间、使用剂量、使用区域范围、施 药方法等。 5.2.3轮换用药 采用抗性机制类型不同的药剂轮换使用，延缓抗药性的发展。 5.2.4负交互抗性药剂的使用 使用通过试验证明与抗性药剂具有负交互抗性的除草剂防除杂草。 5.2.5监测抗药性发生和发展 对于高、中等抗性风险的除草剂应实施抗药性监测。 5.2.6产品标签标注 在产品标签上标注抗性风险级别、抗性杂草种类，并标明相应抗性风险管理的措施。 NY/T1859.7—2014 附录A （规范性附录） 乙酰辅酶A羧化酶对药剂敏感性测定法 A.1杂草准备 敏感和抗药性种群分别进行盆栽培养，培养方法参见NY/T1155.4或NY/T1155.9。待杂草生 长到3叶～4叶期，选取生长良好的敏感和抗药性种群杂草，分别取幼嫩叶片5.0g，3次重复，样品于 一70℃冻存。 A.2溶液配制 ACCase提取缓冲液：含有100mMTricine