ICS 65.020 B 16 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T 1248.13—2016 玉米抗病虫性鉴定技术规范 第13部分：粗缩病 Technical specification on evaluation of maize resistance to pests- Part 13:Maize rough dwarf disease 2016-10-26 发布 2017-04-01实施 中华人民共和国农业部 、发布 NY/T 1248. 13—2016 前 言 NY/T1248《玉米抗病虫性鉴定技术规范》拟分为13个部分： 第1部分：大斑病； 第2部分：小斑病； 第3部分：丝黑穗病； 第4部分：矮花叶病； 第5部分：玉米； 第6部分：腐霉茎腐病； 第7部分：镰孢茎腐病； 第8部分：镰孢穗腐病； 第9部分：纹枯病； 第10部分：弯孢叶斑病； 第11部分：灰斑病； 第12部分：瘤黑粉病； 第13部分：粗缩病。 本部分为NY/T1248的第13部分。 本部分按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本部分由农业部种子管理局提出并归口。 本部分起草单位：中国农业科学院作物科学研究所、全国农业技术推广服务中心、河北省农林科学 院植物保护研究所、四川省农业科学院植物保护研究所、吉林省农业科学院植物保护研究所。 本部分主要起草人：王晓鸣、孙世贤、石洁、李晓、晋齐鸣。 I NY/T 1248. 13—2016 玉米抗病虫性鉴定技术规范 第13部分：粗缩病 1范围 本部分规定了玉米抗粗缩病鉴定技术方法和抗性评价标准 本部分仅适用于栽培玉米（Zea maysL.）自交系、杂交种、群体、开放授粉品种以及野生玉米和玉米 近缘种对粗缩病抗性的田间鉴定和评价。 2术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 2. 1 昆虫介体接种insect vector inoculation 将携带有目标病毒的昆虫放置或驱赶至植株上的接种方法 2. 2 粗缩病maize rough dwarf disease 由斐济病毒属（Fijivirus)中的水稻黑条矮缩病毒（Rice black-streaked dwarf virus，RBSDV）、南 方水稻黑条矮缩病毒（Southern riceblack-streaked duwarf virus，SRBSDV）、玉米粗缩病毒（Maize rough dwarf virus，MRDV)、里奥夸尔托病毒（Mal de rio cuarto virus，MRCV)侵染、引起植株矮化、 叶片僵直、叶脉肿大为特征的玉米病害。在中国,引发粗缩病的主要病毒为水稻黑条矮缩病毒。 3粗缩病毒接种体准备 3.1传毒昆虫介体 在中国，传播水稻黑条矮缩病毒的介体主要为灰飞虱［Laodelphaa striatellus（Fallen)]。灰飞虱 从带毒植物上获毒后，以持久性方式传毒，但新生幼虫不带毒。 3.2病毒的鉴定 对用作抗病性鉴定接种体的病毒应进行种类鉴定，依据血清学反应和分子检测结果确定病毒的分 类地位(参见附录A)。 3.3病毒接种体繁殖 水稻黑条矮缩病毒侵染玉米、小麦、水稻及多种禾本科杂草,在寄主植物体内增殖。因此，带毒灰飞 虱发生较重的越冬麦田中的小麦植株、早播的有灰飞虱活动的秧田中的水稻秧苗中繁殖出了大量水稻 黑条矮缩病毒，也繁育了大量传毒介体,具备了粗缩病自然接种的基本条件。 4抗病性鉴定圃 4.1鉴定圃设置 鉴定圃具备良好的自然发病环境，与灰飞虱越冬的冬麦田或水稻黑条矮缩病常发的稻田相邻，以使 带毒灰飞虱能够及时、大量迁入鉴定圃中。 4.2鉴定设计 鉴定材料随机排列或顺序排列。鉴定选育品种时，每份材料种植2行，每15份品种设1组已知抗 病/耐病、高感对照材料（见附录B）；鉴定种质资源时，每份材料种植1行，每50份种质设1组已知抗 病/耐病、高感对照材料。鉴定小区两端应种植不少于2行的保护行。 1 NY/T 1248.13—2016 4.3种植要求 4.3.1播种 由于鉴定依赖介体昆虫自然传播病毒，因此，鉴定材料的播种时间应根据相邻麦田或稻田中灰飞虱 外迁高峰确定，确保玉米幼苗在7叶期前能够与带毒灰飞虱迁飞高峰相遇，以使植株被侵染阶段处于高 度敏感期。在夏玉米区，一般播种期选择在5月中旬至5月下旬。通过播期调整设置健康对照。种子 不得用含有杀虫剂的种衣剂进行包衣处理。 4.3.2小区 抗性鉴定小区行长5m，行距与植株密度 试验要求确定，条播或穴播。对选育品种 进行抗性鉴定时，双行留苗≥50株；对种质资源等材料进行抗性鉴定时.单行留苗≥25株。土壤肥力水 平和耕作管理与大田生产相同 5 接种 5.1接种时期 RESEA 5.2接种方法 A 采用相邻麦田或稻田中带 毒灰飞虱进 玉米苗田传毒的自然接种方法 虱群体带毒率高于 10%、每株玉米幼苗上落0 飞虱15头 α头时，能够形成较均匀的田间植 自然接种期适 当进行田间浇水.保证幼苗叶片 萎，利于灰飞虱刺吸取食 鉴定材料全生 育期内不喷施农药 项农事操作应在同一天内 完成 U 6 病情调查 CENT 6. 1 调查时间 在玉米灌浆 期 ，生育进程相近的材料在同 成调 6.2调查方法 C 在自然接种圃中 型症状的发病植株数量,选 发病植株测量 株高并计算平均株 力的 斗，调查 查结穗株(每穗有籽粒20粒以 穗)数量，并选取 10株的果穗进行长度 照小区中 均株高，并选取10 株测量果穗长度。株高 穗长度白 算单位为厘米 (cm）,精确到整数 6.3病情分级 田间病情分级、相对应的症状描述见表 玉米粗缩病病情分级 病情级别 1 植株株高为正常株高的80%以上，果穗长度为正常的80%以上 3 植株株高为正常株高的61%～80%，果穗长度为正常的51%～80% 植株株高为正常株高的41%～60%，果穗长度为正常的21%～50% 7 植株株高为正常株高的31%～40%，无果穗 9 植株株高为正常株高的0%～30%，无果穗 抗性评价 7.1鉴定有效性判别 当设置的高感对照材料发病程度达到感病(7级)及以上时，该批次鉴定视为有效。 2 NY/T 1248. 13—2016 7.2抗性评价标准 依据鉴定材料病情级别确定其抗性水平，评价标准见表2。鉴定材料的发病株率和结穗率作为 参考。 表 2玉米对粗缩病抗性的评价标准 病情级别 抗 性 高度抗病 Highly resistant(高抗 HR) 3 抗病 Resistant(抗 R) 中度抗病Moderatel 7 感病 Susceptible(感 S) 9 高度感病Highly sus 7. 3 重复鉴定 若鉴定材料初 次鉴定 年进 行重复鉴定。 7.4抗性评价 对初次鉴 定结 最终鉴 定结果，并依此对鉴定 材料进行抗性评价 NY/T 1248. 13—2016 附录A （资料性附录） 玉米粗缩病病原物 A.1名称和形态描述 水稻黑条矮缩病毒(Riceblack-streaked dwarfvirus,RBSDV)。 病毒粒子直径约70nm～75nm,完整的粒子呈等轴二十面体结构、球形。在12个顶点处各有一个 约11nm宽的球状突起A。病毒粒子具双层蛋白质衣壳，外壳蛋白的组成结构为：外层厚约8nm，由12 个呈五边形、中空的管状突起B和亚单位C组成,B突起大小为11nmX8nm。外层衣壳极其不稳定， 容易脱去A突起和亚单位C,形成带有B突起的内层粒子，称为亚病毒粒子（subviralparticle,SVP）。B 突起脱落后,形成直径约为50nm的光滑的核心粒子，内含10条分散的双链RNA基因组。水稻黑条 矮缩病毒的致死温度为70℃，在提纯状态的汁液中可存活37d,完整粒子具有较强的侵染力，但由于结 构不稳定，只有在快速的粗抽提制剂中，才能有保持完整的和中间型的病毒粒子,在冰箱中仅保存1d～ 2d后，大部分粒子的外层衣壳便消失。 其他引起玉米粗缩病的病毒： 南方水稻黑条矮缩病毒（Southernrice black-streaked dwarf virus，SRBSDV）。 玉米粗缩病毒(Maize rough dwarf virus,MRDV)。 里奥夸尔托病毒(Mal de rio cuarto virus,MRCV)。 4 NY/T 1248. 13—2016 附录B (规范性附录) 鉴定结果汇总和对照用自交系 B. 1 鉴定结果汇总表格 玉米抗粗缩病鉴定结果整理后填入鉴定结果表格，见表B.1。 表 B. 1 年玉米抗粗缩病鉴定结果表 品种/种质 平均株高 与正常株高 平均穗长 来源 与正常穗长 发病株率 结穗率 编号 比率,% 抗性评价 名称 cm cm 比率,% % % 注1：鉴定地点 注2:接种病原菌分离物编号 注3：接种日期 调查日期 鉴定技术负责人(签字)： B. 2 2抗病对照自交系 X178，对粗缩病表现中度抗病（Moderatelyresistant，MR），选自美国玉米杂交种P78599。 齐319，对粗缩病表现中度抗病（Moderatelyresistant，MR），选自美国玉米杂交种P78599。 B. 3 3 感病对照自交系 478，对粗缩病表现稳定的高度感病（Highlysusceptible，HS），选自玉米自交系8112和5003的 组配后代。 5