ICS27.010 CCSF13 NB 备案号：XXX一XXX 中华人民共和国能源行业标准 NB/T34057.8—2020 木质纤维素类生物质原料 化学成分的测定 第8部分：蛋自质的测定 Determination of chemical components in lignocellulosicfeedstocks- Part 8:Determination of proteir 2020-10-23发布 2021-02-01实施 国家能源局发布 NB/T34057.8—2020 前言 本文件是NB/T34057《木质纤维素类生物质原料化学成分的测定》的第8部分。NB/T34057分为9 个部分： 第1部分：标准样品的制备； 一第2部分：标准样品的纯化； 一第3部分：水分的测定； 一第4部分：可溶性糖的测定， 一一第5部分：纤维素、半纤维素、果胶和木质素的测定 第6部分：灰分的测定； 一第7部分：淀粉的测定， 一第8部分：蛋白质的测定； 一第9部分：脂类的测定。 本文件由能源行业非粮生物质原料标准化技术委员会（NEA/TC24）归口。 本文件起草单位：中国农业大学。 本文件主要起草人：李蒙、谢光辉。 NB/T34057.82020 木质纤维素类生物质原料化学成分的测定 第8部分：蛋自质的测定 1范围 本文件规定了木质纤维素类生物质原料蛋白质测定的术语和定义、原理、仪器设备、试剂、试验步骤、 试验数据处理以及精密度。 本文件适用于农林废奔物、能源植物等各类草本或木本木质纤维素类生物质原料标准样品（包括衍生 材料)。 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB/T6432饲料中粗蛋白的测定 GB/T18246饲料中氨基酸的测定 GB/Z21922食品营养成分基本术语 GB/T32687 氨基酸产品分类导则 NB/T34029非粮生物质原料名词术语 NB/T34057.1木质纤维素类生物质原料化学成分的测定第1部分：标准样品的制备 NB/T34057.3木质纤维素类生物质原料化学成分的测定第3部分：水分的测定 NB/T34057.6木质纤维素类生物质原料化学成分的测定第6部分：灰分的测定 3术语和定义 NB/T34029、GB/Z21922、GB/T32687界定的下列术语和定义适用于本文件。为了便于使用，以下 重复列出了NB/T34029、GB/Z21922、GB/T32687中的某些术语和定义。 3. 1 木质纤维素lignocellulose 混有木质素、纤维素和半纤维素的天然植物纤维。 ［来源：NB/T34029—2015，4.11] 3. 2 氨基酸amino acid 含有氨基和羧基的一类有机化合物的通称，通式为：H2NCHRCOOH。 ［来源：GB/T32687—20163.2] 3.3 蛋白质protein 含氮有机化合物，以氨基酸为基本组成单位。 ［来源：GB/Z21922—2008,2.2.4] 4原理 可定量测定木质纤维素生物质原料中的氨基酸组成。 蛋白质在催化加热的条件下转化为硫酸铵，经碱性蒸馏后以氨气的形式逸出，经硼酸吸收后，可通过 凯氏定氮仪定量测定木质纤维素生物质原料中的氮含量。 1 NB/T34057.8—2020 根据氨基酸组成、绝对含量和相对分子质量，确定各类木质纤维素生物质原料中蛋白质换算系数。通 过计算蛋白质换算系数和氮含量的乘积，可确定特定木质纤维素生物质原料中蛋白质的含量。 5仪器设备 所用仪器除注明外，均按照GB/T18246和GB/T6432中使用仪器设备。 6试剂 所用试剂除注明外，均按照GB/T18246和GB/T6432中使用试剂耗材。 7试验步骤 7.1标准样品的制备 7.1.1标准样品的制备方法按照NB/T34057.1的规定执行。 7.1.2所采用水分除注明外，均为相对含水量，水分的测定方法按照NB/T34057.3的规定执行。 7.1.3标准样品和校正样品灰分的测定方法按照NB/T34057.6的规定执行。 7.2标准样品的氨基酸组成的测定 按GB/T18246的规定，测定标准样品的氮基酸组成，确定标准样品中第i种氨基酸含量，记录为 Ai. 7.3标准样品的氮含量的测定 按GB/T6432的规定，测定标准样品的氮含量，记录为N。 8试验数据处理 8.1蛋白质换算系数 8.1.1按公式（1)计算氨基酸残基含量：即需涵盖所要分析样品的全部特性。创建一个新的模型，一般需 要收集样品数量不少于100个，样品过少将不能获得有效模型。木质纤维素类生物质原料中常见氨基酸 摩尔质量、残基摩尔质量、氨基酸中氮含量见表A.1。 AA; .....(1) 式中： E, 一标准样品中第i种氨基酸残基含量，单位为百分号（%） A, 一标准样品中第i种氨基酸含量，单位为百分号（%）； AAA，标准样品中第i种氨基酸残基的摩尔质量，单位为克每摩尔（g/mol)； AA，一一标准样品中第i种氨基酸的摩尔质量，单位为克每摩尔（g/mol）。 8.1.2按公式（2)计算氨基酸残基含量。 100 .....（2) 式中： D一标准样品中第i种氨基酸残基的氮含量，单位为百分号（%）； N一一第i种氨基酸中的氮含量，单位为百分号（%）。 8.1.3按公式（3）计算蛋白质换算系数上限值。 KA= ........(3) Z D; 式中： KA——蛋白质换算系数上限值。 8.1.4按公式（4）计算蛋白质换算系数下限值。 2 NB/T34057.8—2020 Kp N （4） 式中： Kp——蛋白质换算系数下限值， N一一标准样品中的氮含量，单位为百分号（%）。 8.1.5按公式(5)计算蛋白质换算系数。 2 （5） 式中： F——蛋白质换算系数。 8.2蛋白质含量 8.2.1按公式(6)计算标准样品中蛋白质含量。 P40/80=NXFX100 （6) 式中： 标准样品中蛋白质含量，单位为百分号（%） F 蛋白质换算系数。一般玉米秸秆为5.02；小麦秸秆为4.58；水稻秸秆为5.22；高梁秸秆为 4.86。 8.2.2按公式（7)计算样品中蛋白质含量。 （P40/80XF40/80） 100-Ash80 Porigianl = (100-Ash40/80 XF 100 (7) 100 式中： Poriginal 标准样品中蛋白质含量，单位为百分号（%）； F40/80 标准样品获得率，单位为百分号（%）； F8o 校正样品获得率，单位为百分号（%）； Ash 40/80— 标准样品灰分，单位为百分号（%）； Ash80— 校正样品灰分，单位为百分号（%）。 9精密度 取2次平行测定结果的算术平均值为测定结果。 蛋白质平行测定结果的绝对差值不大于10%。 NB/T34057.8—2020 附录A （资料性） 未质纤维素类生物质原料中常见氨基酸信息汇总 木质纤维素类生物质原料中常见氨基酸信息汇总见表A.1。 表A.1木质纤维素类生物质原料中常见氨基酸信息汇总 摩尔质量 残基摩尔质量 氨基酸中氮含量 种类 g/mol g/mol % 丙氨酸 89.09 71.09 15,72 精氨酸 174.20 156.20 32.16 天冬氨酸 133.10 115.10 10.52 半胱氨酸 121.06 103.06 11.56 谷氨酸 147.13 129.13 9.52 甘氨酸 75.05 57.05 18.66 组氨酸 155.16 137.16 27.08 异亮氨酸 131.17 113.17 10.68 亮氨酸 131.17 113.17 10.68 赖氨酸 146.19 128.19 19.16 蛋氨酸 149.21 131.21 9.39 苯丙氨酸 165.19 147.19 8.48 脯氨酸 115.13 97.13 12.17 丝氨酸 105,09 87.09 13.33 苏氨酸 119.12 101.12 11.76 色氨酸 204.23 186.23 13.72 酪氨酸 181.19 163.19 7.73 缬氨酸 117.15 99.15 11.96 4