ICS 13.100 C 59 备案号： ×××××—×××× MZ 中 华 人 民 共 和 国 民 政 行 业 标 准 MZ /T 140 — 2019 殡仪场所致病菌检测技术规范 T echnical specifications for examination of pathogenic bacteria in funeral home 2019 - 12 - 12 发布 2019 - 12 - 12 实施 中华人民共和国民政部 发 布MZ/T 140 — 2019 I 目    次 前言 ..................................................................................................................................................................... II 1 范围 ................................................................................................................................................................. 1 2 规范性引用文件 ............................................................................................................................................. 1 3 术语和定义 ..................................................................................................................................................... 1 4 细菌总数 ......................................................................................................................................................... 2 5 溶血性链球菌 ................................................................................................................................................. 3 6 大肠菌群 ......................................................................................................................................................... 4 7 金黄色葡萄球菌 ............................................................................................................................................. 5 8 参考文献 …………………………………………………………………………………………………… 8MZ/T 140 — 2019 II 前    言 本标准按照 GB/T 1.1 — 2009 给出的规则起草。 本标准由 中华人民共和国民政部提出。 本标准由全国殡葬标准化技术委员会（ SAC/TC 354 ）归口。 本标准起草单位：民政部一零一研究所、大地人本文化发展集团有限公司、广州市殡葬服务中心 、 中国殡葬协会、 一扫清（上海）环境科技有限公司 。 本标准主要起草人：李玉光、周雪媚、高青、李伯森、刘崇、肖成龙、光焕竹、 孙树仁、陈霜玲 、 徐炳达、林涛 。MZ/T 140 — 2019 1 殡仪场所致病菌检测技术规范 1 范围 本标准规定了各类殡仪场所致病菌的采样及检测检验方法。 本标准适用于殡仪馆、火葬场、骨灰堂、公墓、殡仪服务站、殡仪车等固定和流动殡仪场所。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的 。 凡是注明日期的引用文件 ， 仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 23287 殡葬术语 3 术语和定义 GB/T 23287 界定的及下列术语和定义适用于本文件。 3.1 细菌总数 total bacterial count 公共场所空气中采集的样品，或公共用品用具经过采样处理，计数在营养琼脂培养基上经 36 ℃± 1 ℃ 、 48 h 培养所生长发育的嗜中温性需氧和兼性厌氧菌落的总数。 3.2 大肠菌群 coliforms 在 37 ℃ 、 24 h 培养能发酵乳糖、产酸、产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌。 3.3 金黄色葡萄球菌 staphylococcus aureus 在 Baird Parker 培养基或血平板培养基上生长良好 ， 分解甘露醇产酸 ， 血浆凝固酶阳性的革兰氏阳 性葡萄状球菌。 3.4 溶血性链球菌 streptococcus hemolyticus 属于链球菌属，为革兰氏阳性菌，分解葡萄糖，产酸不产气，血平板上产生溶血圈。 3.5 撞击法 impacting method 采用撞击式空气微生物采样器 ， 使空气通过狭缝或小孔产生高速气流 ， 从而将悬浮在空气中的微生 物采集到营养琼脂平板上，经实验室培养后得到菌落总数的测定方法。 3.6MZ/T 140 — 2019 2 自然沉降法 natural sinking method 将营养琼脂平板暴露在空气中 ， 微生物根据重力作用自然沉降到平板上 ， 经实验室培养后得到菌落 总数的测定方法。 4 细菌总数 4.1 检测方法 采用撞击法或自然沉降法采样、营养琼脂培养基培养计数的方法测定殡仪场所空气中的细菌总数 。 4.2 撞击法 4.2.1 仪器和设备 六级筛孔撞击式空气微生物采样器、高压蒸汽灭菌器、恒温培养箱、冰箱、平皿（直径 90 mm ）。 4.2.2 培养基 4.2.2.1 营养琼脂培养基成分： 蛋白胨 10.0 g 牛肉膏 3.0 g 氯化钠 5.0 g 琼脂 15.0 g 蒸馏水 1 000 mL 4.2.2.2 制法：将上述成分混合后，加热溶解，调节 pH 值为 7.2 ～ 7.6 ，定容至 1000 mL ， 121 ℃ 高压 灭菌 20 min 。将灭菌好的营养琼脂以 15 mL 倾注直径为 90 mm 的培养皿，置 4 ℃ 备用。 4.2.3 采样 4.2.3.1 采样点 按房间的大小和位置设置采样点。采样布点方法为 : 室内面积 ≤ 30 m 2 时，设内、中、外对角线 3 点 ， 内、外点布点部位距墙壁 1 m 处；室内面积＞ 30 m 2 时，设 4 角及中央 5 点， 4 角的布点部位距墙壁 1 m 处 。 采样点距离地面高度 1.2 m ～ 1.5 m 。 4.2.3.2 采样方法 采样时 ， 将六级筛孔撞击式微生物采样器放在各采样点 ， 流量计设置 28.3 L/min ， 采样时间 5 min ～ 1 5 min ，采样结束后，立即盖好平皿盖。 4.2.4 检验步骤 将采集细菌后的营养琼脂平皿放入 36 ℃± 1 ℃ 培养箱，培养 48 h 后计数菌落。 试验采样完成后 ， 应将未用的同批培养基 ， 与上述试验样本同时进行培养或接种后培养 ， 作为阴性 对照。阴性对照组若有菌生长，说明所用培养基有污染，试验无效，更换后按 4.2.2 、 4.2.3 、 4.2.4 步 骤重新检测。 4.2.5 结果报告 4.2.5.1 采样点细菌总数结果计算：菌落计数，记录结果并按以下公式计算空气中细菌总数。 ······································· （ 1 ） 式中： Q —— 空气中细菌总数，单位 为菌落形成单位 每 立方米 （ cfu/m 3 ）； N —— 平板上菌落总数，单位 为菌落形成单位 （ cfu ）； L —— 每分钟采气量， 单位为升每分 钟（ L/min ）； T —— 采样时间， 单位为分 钟（ min ）。MZ/T 140 — 2019 3 4.2.5.2 一个区域细菌总数测定结果 ： 一个区域空气中细菌总数的测定结果按该区域全部采样点中细菌 总数测定值中的最大值给出。 4.3 自然沉降法 4.3.1 仪器和设备 高压蒸汽灭菌器、恒温培养箱、平皿（直径 90 mm ）、采样支架。 4.3.2 培养基 见 4.2.2 。 4.3.3 采样 4.3.3.1 采样点： 见 4.2.3.1 。 4.2.3.1 采样方法： 将营养琼脂平板置于采样点，打开皿盖，暴露 5 min 。 4.3.4 检验步骤 见 4.2.4 。 4.3.5 结果报告 计数每块平板上生长的菌落数，求出全部采样点的平均菌落数，检验结果以每平皿菌落数（ cfu/ 皿）给出。 5 溶血性链球菌 5.1 检测方法 采用